UPLC法同时测定复配甜味剂中安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜的研究

岑 琴，赵 卉，胡梦坤

（沈阳产品质量监督检验院，沈阳 110022）

复配食品甜味剂由2种或几种具有不同甜度、不同口感的甜味剂复配而成，可以克服单一甜味剂甜度不够、口感发苦发涩、成本太高等缺点，具有改善口感、提高甜味稳定性、协同增效、降低成本的作用。复配食品添加剂往往在包装上不标明所含成份含量，应用企业很难掌握具体的添加量。为此，用水提取复配食品甜味剂中安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜后，采用超高效液相色谱-二极管阵列检测器进行测定，以期为复配食品甜味剂中的成分含量测定提供简单准确的方法。

1 材料与方法

1.1 仪器与设备

Waters ACQUITY H-class UPLC超高效液相色谱仪（配二极管阵列检测器）：美国waters公司；色谱柱：Waters Symetry RP18（2.1 mm ×100 mm，1.7 μm）；电子天平：北京赛多利斯仪器系统有限公司；超纯水制备系统：美国Milli-Q公司。

1.2 试剂

安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜标准品：中国计量科学研究院；甲醇（色谱纯）：美国fisher公司；色谱用水：符合GB／T 6682-2008规定的一级水。

1.3 样品前处理

准确称取 1 g粉末样品 （精确至 0.000 2 g）至100 mL容量瓶中，用水溶解并定容至100 mL；移取1.0 mL至100 mL容量瓶中，用水定容至100 mL，混匀；取适量上清液过0.22 μm的GHP滤膜，待测定。

1.4 色谱条件

1.4.1 流动相选择甲醇、0.02 mol／L 乙酸铵缓冲溶液和水为流动相。在流速0.3 mL／min、柱温30℃的条件下，当甲醇、0.02 mol／L乙酸铵缓冲溶液和水的比例为 35∶5∶60（v／v）时，3种甜味剂分离效果理想，分析时间短。

1.4.2 检测波长在 190～400 nm 之间进行全波长扫描，确定安赛蜜和糖精钠的检测波长为225 nm，阿斯巴甜的检测波长为210 nm。

在以上色谱条件下进样0.4 μL，以色谱峰面积外标法定量，在225 nm下测得安赛蜜和糖精钠的色谱图（见图 1）。

图1 安赛蜜、糖精钠标准品色谱图Figure 1 Standard chromatogram of acesulfame and saccharin sodium

在以上色谱条件下进样0.4 μL，以色谱峰面积外标法定量，在210 nm下测得阿斯巴甜的色谱图（见图2）。

图2 阿斯巴甜标准品色谱图Figure 2 Standard chromatogram of aspartame

1.5 标准曲线

准确称取安赛蜜、糖精钠、阿斯巴甜各100 mg，加水溶解，移入100 mL容量瓶中，用水定容至100 mL，作为储备溶液，每毫升相当于含安赛蜜、糖精钠、阿斯巴甜 1 mg。 分别移取 0.2，0.4，1.0，2.5，5.0 mL 储备液于100 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，得到浓度分别为 2.0，5.0，10.0，25.0，50.0 mg／L 的混合标准溶液，在 1.2.2 色谱条件下进样 0.4 μL，根据浓度与峰面积的关系绘制标准曲线。

1.6 方法回收率及精密度

为考察方法的可靠性，对添加剂进行加标样的回收率测定。安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜加标量分别为150、250和 180g／kg的样品，平行测定 6次。

2 结果与分析

2.1 线性范围及检出限

色谱峰高为噪声信号的10倍（S／N＝10）相对应的浓度为定量限。各组分的线性方程、相关系数、线性范围及定量限见表1。

表1 各组分的线性范围及检出限Table 1 Linear range and detection limit of each component

从表1可以看出，各组分在线性范围内线性关系良好。

2.2 方法回收率及精密度

通过加标回收率试验对方法进行回收率和精密度测定，结果见表2。

由表2可知：安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜的回收率为 96.3%～100.4%，RSD≤2.1% （n＝6），表明该方法的精密度和准确度能满足分析要求。

表2 回收率及精密度（n＝6）Table 2 Recovery and precision results（n＝6）

3 结论

应用超高效液相色谱法测定复配食品甜味剂中安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜的含量。样品用水提取后，以甲醇、0.02 mol／L 乙酸铵和水 35：5：60（v／v）为流动相洗脱， 经 Waters Symetry RP18 （2.1mm ×100mm，1.7μm）色谱柱分离，二极管阵列检测器检测，检测波长为225 nm和210 nm。

试验结果表明：安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜在质量浓度 2.0～50.0 mg／L 的范围内与其峰面积成线性关系， 线性方程分别为y＝4 604x-1 511、y＝4 965x-1 344、y＝6 069x-2 418，定量限均为 1.0%，平均回收率为 96.3%～100.4%，RSD≤2.1%（n＝6）。 该方法精密度和准确性好、灵敏度高，样品预处理简单，避免了滴定分析方法中复配甜味剂之间相互干扰的问题，是复配食品甜味剂中成分含量的理想检测方法。