牛痘疫苗接种家兔炎症皮肤提取物联合α-硫辛酸治疗老年痛性糖尿病性神经病变的效果及机制

李改仙 张 虹 刘 萍 车秀英 杨 静

(河北医科大学附属华北石油总医院内分泌科，河北 沧州 062552)

糖尿病(DM)神经病变(DN)是DM的三大慢性并发症之一，其中以DM周围神经病变(DPN)最常见，约90%DM患者存在DPN。DPN发病机制与机体代谢异常(多元醇通路激活机制、非酶促糖基化反应、氧化应激)、缺血缺氧、神经营养因子缺乏等有关〔1〕，临床表现包括感觉障碍、运动障碍。感觉障碍中以对称性下肢疼痛多见。目前DPN治疗主要包括控制血糖、营养神经、改善循环、抗氧化应激及药物治疗，而药物包括改善循环药物、神经生长因子、自由基清除剂、B族维生素类药物等〔2〕。本文观察牛痘疫苗接种家兔炎症皮肤提取物联合α-硫辛酸应用于痛性DN治疗前后氧化、炎症因子等指标的变化，旨在探讨两药联合应用的临床价值及作用机制。

1 资料和方法

1.1一般资料 2015年3～12月唐山市工人医院内分泌科住院治疗的DPN患者58例，其中男33例，女25例，年龄45～70岁，平均(58.6±12.1)岁，DM病程5～13年，平均(9.8±3.7)年。纳入标准：①符合1999年世界卫生组织(WHO)提出的2型DM诊断标准；②有明显的神经性疼痛症状，表现为四肢远端(以下肢为主)的电击样痛、灼痛、刺痛、刀割样痛；③神经电生理检查右侧腓总运动神经传导速度(MCV)<45 m/s，感觉神经传导速度(SCV)<40 m/s；④血糖稳定至少3个月以上〔糖化血红蛋白(HbA1c)<9%〕；⑤停用DN的药物至少2 w。排除标准：①其他原因所致的周围神经病变，如颅脑病变、脊椎病变、酒精、药物中毒等；②有严重的心肝肾等脏器功能不全；③合并肿瘤、结缔组织病者；④足溃疡、感染及水肿；⑤近半个月发生DM酮症酸中毒、严重感染者；⑥精神疾病或其他原因不能合作者。按照入组顺序随机分为对照组和试验组各29例。均知情同意，且经我院医学伦理委员会同意。两组性别、年龄、DM病程、DPN病程、空腹血糖、 HbA1c差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。

1.2治疗方法 基础治疗：患者均通过胰岛素泵(门冬胰岛素)与口服降糖药物，监测三餐前、三餐后2 h、当天22时共7次末梢血糖，调整胰岛素用量，目标血糖为空腹<7.0 mmol/L，餐后<10.0 mmol/L。在基础治疗上两组均加用α-硫辛酸(奥力宝，德国STADA，批号90527)治疗：α-硫辛酸注射液600 mg+生理盐水250 ml静脉滴注，1次/d，连续使用2 w。试验组加用牛痘疫苗接种家兔炎症皮肤提取物注射液〔日本脏器制药株式会社生产，批准文号：S20010023，规格：每支3 ml中含有3.6个神经妥乐平(NU)〕3 ml+生理盐水3 ml，静脉推注，1次/d，连续使用2 w。治疗期间均不服用止痛药及应用抗血小板药物、抗纤溶、活血化瘀药、维生素B族、抗抑郁药等。两组疗程均为2 w。

表1 两组一般临床指标比较

1.3观察指标 ①一般指标及血糖水平：比较两组入组时年龄、DM病程、DPN病程、空腹血糖、HbA1c等一般临床指标。②疼痛缓解情况:治疗过程中每日8时以疼痛视觉模拟评分(VAS)10分法评定患者疼痛情况。治疗前后VAS下降率>80%为显效，20%～80%为有效，<20%为无效，上升为恶化。比较两组的疼痛缓解时间(VAS下降率≥20%)、有效率(显效+有效)。③神经电生理状况:治疗前后分别以肌电图仪测定两组右侧腓总MCV和右侧腓浅神经感觉传导速度(SSCV)。④氧化因子及炎症因子:治疗前后抽取空腹肘静脉血5 ml，采集血浆，检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。酶联免疫吸附法检测治疗前后血浆颗粒蛋白前体(PGRN)、白细胞介素(IL)-6，荧光免疫法检测超敏C反应蛋白(hs-CRP)，硝酸还原酶法测定血浆一氧化氮(NO)水平。

1.4统计学方法 采用SPSS13.0软件行t，χ2检验。

2 结 果

2.1两组疼痛缓解情况比较 治疗前，对照组和试验组VAS分别为(5.72±1.63)分、(5.63±1.71)分，治疗后两组分别为(3.58±1.35)分、(2.03±1.32)分；治疗后，两组VAS均较治疗前显著下降(t=5.445，8.974，均P<0.05)，且试验组下降较对照组更明显(t=4.421，P<0.05)。试验组疼痛缓解时间〔(5.17±1.09)d〕、有效率〔93.1%，显效7例(24.1%)、有效20例(69.0%)、无效2例(6.9%)〕均显著优于对照组〔(7.13±0.95)d,t=2.022，P<0.05；72.4%,显效2例(6.9%)、有效19例(65.5%)、无效8例(27.6%)，χ2=6.138，P<0.05〕。

2.2两组神经电生理状况比较 治疗前，两组MCV、SSCV水平差异无统计学意义(t=0.799、0.515，均P>0.05)。治疗后，两组MCV、SSCV均较治疗前明显提高(P<0.05)。且试验组治疗后MCV、SSCV均显著高于对照组(t=3.513、3.953，均P<0.01)。见表2。

2.3两组氧化应激指标比较 治疗前，两组的MDA、SOD水平差异无统计学意义(t=0.712、0.630，均P>0.05)。对照组治疗前后两指标均无明显变化(P>0.05)，试验组治疗后MDA显著降低，SOD显著升高，且与对照组差异均有统计学意义(MDA：t=3.822，P<0.01；SOD：t=7.398，P<0.01)。见表2。

表2 两组神经电生理状况、氧化应激指标、炎症因子、NO、PGRN水平比较

与对照组比较：1)P<0.01

2.4两组炎症因子及NO、PGRN水平的比较 治疗前，两组IL-6、hs-CRP及NO、PGRN水平差异均无统计学意义(t=0.043、0.199、0.427、0.630，均P>0.05)。治疗后，两组IL-6、hs-CRP、PGRN较治疗前明显降低(P<0.05)，且试验组降低较对照组更加明显(t=2.082、4.109、3.207，P<0.01)。试验组治疗后NO较治疗前明显升高(P<0.01)，而对照组治疗前后NO差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

3 讨 论

牛痘疫苗接种家兔炎症皮肤提取物注射液是经牛痘疫苗接种于家兔炎症皮肤提取的物质，其可作用于α2受体和5-羟色胺(HT)系统，激活疼痛下行性抑制系统；抑制缓激肽，减轻局部炎症反应；恢复钠钾三磷酸腺苷酶(Na-K-ATP)酶活性，稳定细胞膜，保护神经细胞；促进神经轴突形成及血旺细胞增殖；改善微循环等，从而起到营养神经细胞，修复受损神经纤维，镇痛的药理作用〔3〕。α-硫辛酸是一种强抗氧化剂，可以抑制脂质过氧化，并能清除自由基和活性氧，减弱氧化应激反应〔4〕，并有研究显示α-硫辛酸可通过增加核因子(NF)-κB表达，抑制天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3激活的糖基化终末产物(AGEs)诱导的内皮细胞凋亡〔5〕，从而起到改善血管内皮功能，改善循环。本研究说明在α-硫辛酸基础上将牛痘疫苗接种家兔炎症皮肤提取物用于老年痛性DN的临床治疗可显著改善临床症状、神经电生理，疗效优于单纯应用α-硫辛酸组。

DPN的发病中，氧化应激及炎症损伤是重要机制。研究证实DM患者体内氧化应激增强〔6〕，氧化应激可导致神经元线粒体功能障碍，轴突变性〔7〕，并可能通过微血管损害影响神经微循环，神经血流灌注减少导致DN，氧化应激可导致IL、肿瘤坏死因子等炎性因子生成增多，引起内皮功能紊乱，影响神经血管循环，加重神经病变。SOD活力可反映机体清除自由基的能力，可通过清除超阴离子而保护细胞免受损伤，MDA是脂质过氧化产物，可反映体内脂质过氧化的程度。PGRN是由593个氨基酸组成的生长因子，具有促进炎性因子表达及刺激巨噬细胞迁移的作用〔8〕，可促进IL-6等炎症因子的表达〔9〕，并进一步增加胰岛素抵抗作用〔10〕、血管内皮功能紊乱。因此通过减轻氧化应激达到保护血管神经的作用，延缓或阻止该病变的进展。

本研究说明在α-硫辛酸基础上联合应用牛痘疫苗接种家兔炎症皮肤提取物具有明显的抗氧化及抗感染作用，二者联合应用具有一定的协同效应。试验组联合用药可增加NO水平，进一步改善局部血流量，外周神经血管的循环改善，局部组织营养供给增加，并进一步减少神经纤维的凋亡和细胞损伤，改善神经电生理及临床症状。

1翁霞玲，李志浩，黄翠英，等.2型糖尿病患者糖尿病足相关危险因素分析〔J〕.护士进修杂志，2014；(6)：522-5.

2高 赟，冉兴无.糖尿病足病治疗进展〔J〕.实用医院临床杂志，2014；11(1)：10-3.

3李小红.牛痘疫苗接种家兔炎症皮肤提取物治疗老年带状疱疹神经痛临床疗效观察〔J〕.中华全科医师杂志，2013；12(1)：71-2.

4徐松明，许晓华，孙云鹰，等.硫辛酸对早期糖尿病足患者氧化应激与炎症反应的影响〔J〕.中国临床药理学杂志，2015；21(11)：909-11，915.

5姚伟峰，黄雌友，吴卫国，等.α-硫辛酸对早期糖尿病肾病患者氧化应激和血管内皮功能的影响〔J〕.中国老年学杂志，2014；34(2)：359-60.

6王锦支，程姗姗，冯琳琳，等.52例2型糖尿病患者氧化应激状况分析〔J〕.重庆医学，2012；41(18)：1850-1.

7胡晓莉.氧化应激与糖尿病神经病变相关性研究〔J〕.中华实用诊断与治疗杂志，2011；25(4)：318-20.

8卢 燕，任晓英，王晶璞，等.血浆颗粒蛋白前体与糖尿病视网膜病变的相关性研究〔J〕.医学临床研究，2015；25(10)：1968-70.

9Youn BS，Bang SI，Kloting N，etal.Serum progranulin concentrations may be associated with macrophage infiltration into omental adipose tissue〔J〕.Diabetes，2009；58：627-36.

10瞿 华，邓华聪，胡振平，等.2型糖尿病及肥胖患者血浆颗粒蛋白前体水平及其与胰岛素抵抗的关系〔J〕.中华内分泌代谢杂志，2013；29(7)：570-4.