雄激素对高尿酸血症大鼠骨代谢的影响

魏云霄 何 龙 张梦娇 凌 丽

(河北大学附属医院，河北 保定 071000)

研究证实高尿酸血症(HUA)与骨质疏松存在相关性〔1～3 〕，高尿酸(UA)状态能引起骨质改变，破坏机体骨质。雄激素在骨代谢中有着非常重要的影响，但其对HUA机体的骨质及骨代谢的作用研究尚少，本研究探讨雄激素对HUA大鼠骨代谢的作用。

1 材料与方法

1.1实验材料 主要试剂：氧嗪酸钾：山东中科泰斗有限公司产品，纯度>98%；腺嘌呤：上海甄准生物有限公司产品，纯度>95%；临用前用0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶解。实验动物：4个月龄雄性健康清洁级Wistar大鼠40只，体重280～320 g，由维通利华有限公司提供，适应性饲养7 d后，按随机数字表平均分为假手术组、HUA组、去势HUA组、去势组，各10只。饲养管理条件：SPF动物实验室，室温(20±2)℃，相对湿度60%～70%，每周称量监测大鼠体重变化，并记录，依据体重给予各组相应药物。

1.2动物模型的制作 ①去势大鼠模型制作：去势组给予切除睾丸及附睾手术处理，假手术组给予切除睾丸附近的脂肪组织。②HUA模型大鼠制作〔4,5〕：上午10点给予HUA组大鼠氧嗪酸钾1.0 g/kg,1次/d持续灌胃，去势HUA组给予氧嗪酸钾1.0 g/kg灌胃+氧嗪酸钾100 mg/kg皮下注射，其余组给予等体积蒸馏水灌胃处理。③HUA模型大鼠的调整〔5〕：待HUA、去势HUA组大鼠UA水平下降后，改变造模方法，HUA组大鼠氧嗪酸钾1.5 g/kg,1次/d持续灌胃+乙胺丁醇200 mg/kg皮下注射，去势HUA组给予氧嗪酸钾1.5 g/kg灌胃+氧嗪酸钾100 mg/kg皮下注射+乙胺丁醇200 mg/kg皮下注射，共持续12 w。根据大鼠体质量相应调整药物剂量，不同组别的大鼠给药时间和给药途径相同。

1.3血清UA、骨代谢指标的测定 大鼠取血前禁食12 h，腹腔注射3%戊巴比妥钠1.5 ml/kg，麻醉后内眦静脉取血2 ml。分别在第0、4、6、8、12 w取内眦静脉血测UA、钙(Ca)、磷(P)、碱性磷酸酶(ALP)指标。

1.4统计学分析 应用SPSS19.0软件行方差分析。

2 结 果

2.1各组一般情况变化 HUA组大鼠体重呈先上升后下降趋势，精神萎靡，毛色干枯发黄，活动减少。假手术组反应机敏，活动正常，体毛有光泽，体重增加。各组大鼠在实验过程中均自由饮水、摄食。造模后第8周，去势HUA组有1只大鼠死亡；第12周HUA组有2只大鼠死亡，去势HUA组有1只大鼠死亡；实验期间总共4只大鼠死亡，存活36只，可能原因与大鼠长期高尿酸状态有关。

2.2各组UA、骨代谢指标水平比较 造模前，各组UA、Ca、P、ALP指标均差异无统计学意义(P>0.05)。造模后第4周，HUA组及去势HUA组血UA水平显著高于假手术组及去势组(P<0.05)，此时HUA造模成功；各组Ca、P、ALP水平均差异无统计学意义(P>0.05)。造模后第6周，HUA组及去势HUA组UA水平均显著高于假手术组及去势组(P<0.05)，但有下降趋势。准备改进造模方法。HUA及去势HUA组Ca显著低于假手术组及去势组(均P<0.05)，说明高UA此时引起骨代谢变化。第8周改进造模方法后，HUA组、HUA去势组UA水平与假手术组及去势组差异性再次显著(P<0.05)，HUA模型再次造模成功；HUA组、去势HUA组及去势组Ca水平显著低于假手术组(P<0.05)；各组P、ALP差异无统计学意义(P>0.05)。造模后第12周，HUA组及去势HUA组UA水平显著高于假手术组，去势组UA水平显著低于假手术组；HUA组、去势HUA组及去势组Ca水平显著低于假手术组；去势HUA组P水平显著低于其他3组；去势HUA组ALP水平显著低于假手术组及HUA组；去势组ALP水平显著低于假手术组(均P<0.05)。见表1～5。

表1 第0周各组UA及骨代谢指标比较

表2 第4周各组UA及骨代谢指标比较

与假手术组比较：1)P<0.05；与去势组比较：2)P<0.05，表3、表4同

表3 第6周各组UA及骨代谢指标比较

表4 第8周各组UA及骨代谢指标比较

表5 第12周各组UA及骨代谢指标比较

与假手术组比较：1)P<0.05；与去势组比较：2)P<0.05；与去势HUA组比较：3)P<0.05

3 讨 论

骨质疏松是以骨量减少、骨代谢异常为特征的代谢性骨病。发病机制除遗传、生活方式、环境因素外，还有其他重要因素的参与。雄激素在骨骼生长、代谢，骨量维持及抗骨量丢失方面起重要作用。同时，血UA水平亦受雄激素影响，雄激素有抑制UA排泄和增加UA生成的作用。而且高UA本身也可以引起骨质改变，机制可能与UA结晶引起肾功能改变和高UA机体的富蛋白饮食，引起Ca吸收减少有关。本研究显示，第4周时HUA和雄激素均未使各组的骨代谢发生变化。第6周时，HUA组大鼠体内UA水平有下降趋势，可能与体内酶类变化与代偿性排泄增多有关。UA状态已经引起了大鼠体内Ca水平的变化，证实高UA可以引起骨代谢变化〔6～9〕。有观点认为〔1〕骨质疏松的发生与骨髓间充质干细胞分化紊乱有关，即骨质疏松患者的骨髓间充质干细胞过度分化为脂肪细胞，同时伴随成骨分化能力减弱、骨量丢失是引起骨质疏松的一个重要原因。研究表明〔10〕，男性HUA患病率明显高于绝经前女性，即雄激素相比雌激素，更能升高UA水平。其机制可能是雄激素中睾酮使UA重吸收，使UA在男性体内水平更易升高。本实验结果表明在HUA大鼠中，雄激素依旧有可能使骨代谢下降。但因本实验为动物实验，大鼠与人的体内环境及调节机制可能不同，需进一步深入研究。

1Kurahashi H，Watanabe M，Sugimoto M，etal.Testosterone replacement elevates the serum uric acid levels in patients with female to male gender identity disorder〔J〕.Endocr J，2013；60(12)：1321-7.

2Hernandez JL，Maeias J. Metabolic syndrome，fractures and gender〔J〕.Maturitas，2011；68(3)：217-23.

3郑 焱，郑芬萍，李 红.Graves 病患者血尿酸水平与腰椎骨密度的关系 〔J〕.中国老年学杂志，2014；34(11)：3017-9.

4程 莹，游志清，艾智华，等.中老年男性 2 型糖尿病患者骨密度与血尿酸等代谢指标关系的研究〔J〕.中国现代医学杂志，2015；25(1)：37-41.

5王 莉，徐柳青，施映枫，等.高尿酸血症肾损害动物模型建立及发生机制研究〔J〕.中华肾脏病杂志，2015；16(31)：203-4.

6杨桂梅，黄胜华，连希艳，等.大鼠高尿酸血症模型的建立〔J〕.实验动物科学，2011；31(3)：25-8.

7金 华，于雪梅.2 型糖尿病患者血尿酸水平与骨密度的相关性研究 〔J〕.临床内科杂志，2013；30(2)：112-4.

8Väänänen SP，Jurvelin JS，Isaksson H.Estimation of 3D shape，internal density and mechanics of proximal femur by combining bone mineral density images with shape and density templates〔J〕.Biomech Model Mechanobiol，2012；11(6)：791-800.

9卢 斌，伊添虹，谢 晖.济南市 230 例 3 个月-2 岁儿童超声骨密度检测结果分析 〔J〕.中国医学创新，2015；12(1)：82-4.

10赵 娜，李素梅，方星星，等.老年糖尿病患者骨密度与血尿酸水平的相关研究〔J〕.中国骨质疏松杂志，2014；16(7)：784-8.