早孕期血清sFlt-1、PIGF水平及sFlt-1/PIGF比值与子痫前期的相关性研究

陈益明，卢莎，顾琳媛，何佩，褚雪莲，吴兰芬，连结静，张敏，谢真

妊娠期高血压疾病（HDCP）是指怀孕20周以后出现的高血压、蛋白尿及水肿的综合征，是临床上常见的严重危害母婴健康的妊娠合并症，在妊娠中的发生率近10%。发病时，已造成了肾、胎盘等由功能性发展为器质性损害[1-2]。子痫前期（PE）是妊娠期高血压疾病最具有代表性的类型，病因和发病机制至今仍未完全阐明，严重威胁母体及围生儿健康，是继栓塞之后孕产妇死亡的第2大原因[1]。有研究表明妊娠早期和早期妊娠合并临床特征的血管生成标志物可溶性血管内皮生长因子受体-1（sFlt-1）和胎盘生长因子（PIGF）的变化对预测子痫前期有很强的实用性[3-5]。为了解早孕期血清sFlt-1、PIGF水平及sFlt-1/PIGF比值与后期发生子痫前期的相关性，笔者检测了93例妊娠期高血压、子痫前期和同时期41例正常孕妇血清sFlt-1、PIGF水平，并比较了其水平及sFlt-1/PIGF比值情况。现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2014年 7月至2016年8月在杭州市余杭区妇幼保健院和杭州市妇产科医院门诊参加常规产前筛查，并住院分娩的妊娠期高血压和子痫前期孕妇93例。根据病情严重程度[6]将其分为为妊娠期高血压组（n=26）、子痫前期组（n=35）和重度子痫前期组（n=32），随机抽取同时期经随访确认正常分娩孕妇41例作为对照组。所有研究对象均为单胎妊娠。在进行检查前，均知情同意并签字。

1.1.1 纳入标准 病例诊断依据妊娠期高血压疾病诊治指南（2015）的诊断标准[6]进行；其中子痫前期：妊娠20周后出现收缩压≥140 mmHg（1 mmHg≈0.133 kPa）和/或舒张压≥90mmHg，或伴随尿蛋白是否＞2.0g/24 h，或是否伴随严重的肝、肾、脑等器官损伤，子痫前期可被划分为轻度和重度。

1.1.2 排除标准 双胎、多胎妊娠；合并慢性高血压、心脏病、肾病、糖尿病、甲状腺功能亢进、结缔组织病、血液病等慢性病史；吸烟；试管婴儿；随访结果为21-三体、18-三体、13-三体以及其他出生缺陷；无免疫治疗及输血史；孕期无特殊用药史；资料信息不全者；孕妇信息与血清标本不匹配者。

1.2 取材和检测指标 入选的孕妇均接受B超检查和必要的产前检查。妊娠9～13+6周在各定点医院抽取空腹静脉血2～3 m l，静置30 m in后，离心机半径8 cm，以2500 r/min速度离心10 min并分离血清，保存于2～8℃冰箱，于1周内送检。检测产前筛查项目后储存于－80℃冰箱，完成病例积累后统一进行检测，检测指标为sFlt-1和PIGF。

1.3 试剂和仪器 sFlt-1由美国BIM公司生产，批号为20180111EB；PIGF试剂由美国 BIM 公司生产，批号20180105EB。sFlt-1和 PIGF水平检测应用RT-6100酶标仪（美国Rayto公司）和988洗板机（北京Tianshi公司）。检测前将病例组和对照组的信息资料与储存的血清标本进行匹配，并将血清标本进行低温离心混匀和批量检测，采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）分别检测sFlt-1和PIGF浓度。检测步骤按说明书进行。

1.4 统计方法 采用SPSS 21.0统计软件进行统计学处理。计量资料采用均数±标准差表示，多组比较采用单因素方差分析，两两比较采用Dunnett检验。用受试者工作特征（ROC）曲线确定最佳临界值、曲线下面积（AUC）和约登指数，并对sFlt-1、PIGF水平和sFlt-1/PIGF比值的筛查效能进行评价。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 基础指标比较 4组年龄、孕周、体质量、收缩压和舒张压等差异均无统计学意义（均P＞0.05）。见表1。

2.2 4 组孕妇血清 sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值比较 妊娠期高血压组、子痫前期组、重度子痫前期组sFlt-1水平均高于对照组（均P＜0.05），妊娠期高血压组、子痫前期组、重度子痫前期组PIGF水平均低于对照组差异有统计学意义（均P＜0.05），妊娠期高血压组、子痫前期组、重度子痫前期组 sFlt-1/PIGF比值均高于对照组，差异有统计学意义（均P＜0.05）。见表2。

2.3 妊娠期高血压组、子痫前期组、重度子痫前期组早孕血清sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值的效能分析 妊娠期高血压组早孕血清sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值的 AUC分别为 0.743、0.804和0.787，三者对应的灵敏度分别为92.30%、70.70%和96.20%。见表3。子痫前期组早孕血清 sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值的AUC分别为0.696、0.761和0.740，其对应的灵敏度分别为70.60%、65.90%和79.40%。见表4。重度子痫前期组早孕血清sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值的AUC分别为0.703、0.774和 0.762，对应的灵敏度分别为50%、65.90%和84.40%。见表5。

3 讨论

子痫前期是孕20周以后新发高血压伴有新发蛋白尿或者原有蛋白尿加重或者出现其他脏器功能障碍的妊娠期特有疾病[7]。子痫前期在全球范围内的发病率为5%～10%，在围产保健不完善的地区或高寒地区，其发生率可高达15%～ 20%[8]。Anderson 等[2]对 2011—2015年发表的子痫前期相关文献进行了评估，发现在最近几年焦点都出现在怀孕前3个月预测子痫前期上，常见的生物标志物有：妊娠相关血浆蛋白A（PAPPA）、PIGF、sFlt-1，这些生物标志物对早发子痫前期具有很高的预测率，在假阳性率5%时检出率范围在44%～92%。本研究主要是了解早孕期血清 sFlt-1、PIGF水平及sFlt-1/PIGF比值与妊娠后期是否发生妊娠期高血压和子痫前期的相关性进行探讨。

表1 4组一般资料比较

表2 4组早孕期孕妇sFlt-1、PIGF及sFlt-1/PIGF比值比较

表3 早孕期sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值筛查妊娠期高血压孕妇效率

表4 早孕期sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值筛查子痫前期孕妇效率

表5 早孕期sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值筛查重度子痫前期孕妇效率

本研究结果显示，妊娠期高血压组、子痫前期组、重度子痫前期组sFlt-1水平高于对照组；随着子痫前期病情的进一步发展，孕妇血清sFlt-1水平呈上升趋势，sFlt-1在子痫前期的发生、发展中起促进作用。PIGF水平低于对照组，随着子痫前期病情的加重，血清PIGF水平呈下降趋势，PIGF可能与子痫前期的发生有关。sFlt-1/PIGF比值高于对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。本文结果表明低水平的PIGF和高水平的sFlt-1是妊娠期高血压和子痫前期发生的重要原因之一，与文献报道一致[9]。Lynch等[10]结果表明妊娠早期妇女中PIGF水平显著降低（P＜0.05）。PIGF水平降低与妊娠晚期子痫前期的发展有关。Foidart等[11]结果表明妊娠11～13周时，母体因素可溶内皮糖蛋白（sEng）、PlGF和子宫动脉最低脉动指数（L-PI）的组合可以有效筛查早期子痫前期。Nevalainen等[4]结果也表明早发型子痫前期最好的早孕生物标志物是 AFP、PIGF、RBP4和 sTNFR1。但 K leinrouweler等[12]研究表明假阳性率为5%时，PlGF、sFlt-1和sEng发生子痫前期对应的灵敏度分别为32%、26%和18%，对于临床实践中准确预测子痫前期，这些标记物的测试准确性都很差。

本研究结果还显示，妊娠期高血压组早孕血清sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值的AUC分别为0.743、0.804和0.787，三者对应的灵敏度分别为92.30%、70.70%和96.20%；子痫前期组早孕血清sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值的AUC分别为0.696、0.761和0.740，其对应的灵敏度分别为70.60%、65.90%和79.40%；重度子痫前期组早孕血清sFlt-1、PIGF和sFlt-1/PIGF比值的AUC分别为0.703、0.774和 0.762，对应的灵敏度分别为50%、65.90%和84.40%。上述这些结果与何雪仪[9]研究结果相似。Keikkala等[3]研究表明妊娠早期孕妇血清游离人绒毛膜促性腺激素 亚基（free--hCG）与PlGF、PAPP-A和母亲危险因素结合后，倾向于改善早产和早发性子痫前期的预测。Myatt等[13]研究表明sEng、PlGF和sFlt-1具有临床特征的早孕期和中孕期的早期变化的AUC分别为0.88、0.84和0.86，并且对于具有88%的敏感性的早发性子痫前期。在妊娠早期和妊娠早期结合临床特征的血管生成标志物的变化对预测早发性子痫前期具有很强的实用性。

在 sFlt-1/PIGF比值筛查子痫前期方面，目前研究主要集中在对中晚期妊娠孕妇的检查[14-15]。本研究结果显示，妊娠期高血压组、子痫前期组、重度子痫前期组的早孕期血清 sFlt-1/PIGF比值高于对照组（均P＜0.05）。3种标志物对3组疾病的筛查灵敏度以sFlt-1/PIGF比值最高，早孕期孕妇血清sFlt-1/PIGF比值筛查子痫前期也同中孕期相似，明显优于单独sFlt-1、PIGF筛查。因此，早孕期妇女血清高水平sFlt-1、低水平PIGF和高sFlt-1/PIGF比值的是妊娠期高血压和子痫前期的危险因素，采用sFlt-1/PIGF比值筛查妊娠期高血压和子痫前期的效率优于单用sFlt-1、PIGF的筛查效率。志谢 杭州市余杭区妇幼保健院病案室张萍，杭州市妇产科医院病案室陈松鹤，杭州博圣生物技术有限公司技术部吕少磊、汪晓莹等老师对本项目确诊病例收集及数据匹配等方面提供帮助，在此表示感谢！