合肥地区丙型肝炎病毒基因分型分布特征

徐鹤翔 郑吉顺 解俊侠 李明远 章媛媛 梁利民

据估计，全球有超过1.85亿人口感染丙型肝炎病毒(HCV)[1]。而我国HCV感染率约为1%，感染人群约1 400万[2]。丙型肝炎病毒属黄病毒科肝炎病毒属，为单股正链RNA病毒，基因组全长9.6 kb。由于HCV基因组具有高度异质性，根据HCV基因组核苷酸序列的差异性，目前将HCV分为7种基因型(1～7)和67种基因亚型[3]。国内HCV的抗病毒治疗仍以干扰素联合利巴韦林为主，不过近年来我国逐渐批准多个直接抗病毒药物(direct-acting antivirals, DAAs)在临床使用，研究表明，HCV基因型与干扰素联合利巴韦林的方案，以及DAAs的治疗应答、疗程均有相关性[4,5]。本研究对合肥地区HCV感染患者进行基因型分布特征的研究，为HCV的科学化防治提供指导。

资料和方法

一、病例选择

收集2012年1月至2017年12月合肥市第一人民医院、合肥市滨湖医院、安徽中医药大学第一附属医院及安徽中医药大学第三附属医院门诊及住院HCV患者共251例，诊断均符合我国《慢性丙型肝炎防治指南》(2015年版)的诊断标准，并排除合并甲、乙、戊型肝炎病毒感染的患者。

二、HCV基因分型：

采用PCR-sanger测序法检测，HCV基因分型试剂盒购自中山达安基因公司，实验步骤严格按照操作说明进行，采用ABI 3100 自动测序仪对PCR扩增产物直接测序，与NCBI上参考序列比对确定HCV基因型。

三、统计学分析

结 果

一、患者一般情况

共纳入251例患者，其中男性117例，女性占46.61%，女性134例，占53.39%。中位年龄为52(19～77)岁。其中慢性丙型病毒性肝炎患者183例(72.91%)，68例为丙肝肝硬化患者。

二、HCV基因型及基因亚型总体分布情况

251例患者中，共检出4种基因型，8种基因亚型。基因1型171例，全部为1b型(占68.12%)，基因2型58例(占23.11%)， 2a、2i型分别为32例(12.75%)、26例(10.36%)，基因3型16例(占6.37%)，3a、3b型分别为11例(4.38%)、5例(1.99%)，基因6型6例(占2.40%)，6a、6n、6v型分别为3例(占1.2%)、1例(占0.40%)、2例(占0.80%)。

三、HCV基因型与性别的相关性

251例患者基因型在性别中的分布，见表1。各亚型在不同性别中的比较差异无统计学意义(χ2=10.848，P=0.145)。

表1 HCV 基因型在不同性别患者中的分布

四、HCV基因型与年龄的相关性

HCV基因型在不同年龄段分布情况，见表2。各年龄段基因型相比较，差异有统计学意义(χ2=38.895，P=0.007)。各年龄段基因1b型与其他基因型相比较，差异有统计学意义(χ2=18.384，P<0.01)。年龄≤30岁和年龄>60岁患者基因型主要以1b、2a、2i型为主，而31～60年龄段患者可见3a、3b、6a、6n、6v等基因型分布。

五、HCV基因型不同时间分布：

2012年至2017年的HCV基因型构成比见图1。2014年以前基因型较为单一，主要以1b、2a型为主，2014年以后，1b型逐渐减少，2i、3a、3b型逐渐增多，近年来6a、6n、6v型也开始逐渐出现，总的类型逐渐增多。

六、HCV基因型与感染途径的关系

不同HCV基因型感染途径分布情况见表3。经输血、血液透析、母婴传播感染基因型分布较单一，主要以基因1b型为主，部分为2a、2i型，其他途径(拔牙、纹身、纹眉、穿耳、职业暴露等)传播以基因1b型为主，2a、2i、3a、3b型均有分布，而静脉吸毒、性转播基因型分布较为广泛，1b、2a、2i、3a、3b、6a均有分布。

图1 HCV基因型不同时间分布比例

讨 论

HCV基因型有明显的地域差别，不同国家和地区HCV基因型分布明显差异，其中基因1a型多分布于欧洲和美国，基因1b型呈全球分布，是目前主要流行的基因型，在欧美及我国的比例达50%～70%[3,6]。基因2型主要分布北美洲、欧洲、日本及中国等，占HCV基因型的10%～30%。基因3型主要分布于印度半岛、东南亚。基因4型在北非及中东地区常见，基因5型多分布于南非，基因6型主要分布于泰国、老挝等东南亚国家，而基因7型分部于少数中非移民[6]。我国HCV基因型主要为1b型，其次为2a型，由于国内外交流增多及人口流动，我国HCV基因型分布情况呈现逐渐变化的趋势[7]。2017年Chen等[8]对中国大陆29个省及直辖市的流行病学调查研究显示基因1型是我国丙肝最主要的基因型，在江苏、安徽、陕西、江西、湖北和天津的比例分别达87.91%、77.7%、71.76%、72.88%、71.08%和70.27%。基因2型主要流行于我国北方，其分布由北向南逐渐减少。基因3型在我国西南地区的比例达38.7%，南方地区为13.69%，西北地区为11.11%，而北方地区仅为2.9%，呈现由西南地区到东北地区逐渐减少的趋势。基因6型在我国北方地区的分布不足1%，而在南方地区的分布高达28.0%，其分布由南向北逐渐减少。

表2 HCV基因型在不同年龄段分布情况[例(%)]

表3 HCV基因型与感染途径的关系[例(%)]

本研究发现，合肥地区的HCV基因型仍主要以1b型为主，其次为2a、2i型，同时存在3a、3b、6a、6n、6v基因型。本研究的结果与以往的研究略有不同[9]。1b型感染者比例降低，且基因型分布呈现多样化趋势。在性别分布上差异无统计学意义，但在年龄分布上，差异有统计学意义，不同年龄段均以1b型为主，其中31～60年龄段患者HCV基因型分布最为广泛，可能与该群体人员人口流行大有关。在时间分布上，随着时间的推移，基因1b型逐渐减少，2i、3a、3b型逐渐增多，近年来6a、6n、6v型也开始逐渐出现，总的类型逐渐增多，这与苏迎盈等[10]研究结果一致。经输血、血液透析、母婴传播感染基因型分布较单一，主要以基因1b型为主，部分为2a、2i型，其他途径(拔牙、纹身、纹眉、穿耳、职业暴露等)传播以基因1b型为主，2a、2i、3a、3b型均有分布，而静脉吸毒、性转播基因型分布较为广泛，1b、2a、2i、3a、3b、6a均有分布。

合肥地区HCV基因型分布呈现多样化的特征，其原因可能为：1.合肥地区位于我国华东地区，交通便捷，人口流动大；2.HCV基因型检测方法和手段的广泛使用；3.输血、献血、透析的严格筛查管理，输血相关传播途径逐渐减少；4.静脉注射毒品、性传播、拔牙、纹身、纹眉、穿耳等其他途径传播逐渐增多。近年来我国静脉吸毒人员已成为HCV感染的重要的传播途径，且基因型分布最为广泛。

总之，本项研究通过对合肥地区的HCV基因型分布特征进行初步分析，说明本地区HCV基因型复杂多样，为本地区HCV诊疗与防控策略提供相关的依据，同时由于我们的研究对象主要来源于医院病例，而慢性丙型肝炎存在长期的无症状期，可能存在病例选择偏倚，并不能完全真实的反应本地区的HCV基因型分布状况，因此有必要在今后的研究工作中设计更严谨的流行性病学调查方法，掌握重点人群、普通人群的HCV感染特点，为本地区HCV的防治提供科学化的指导。