鸡新城疫抗体检测技术在诊断中的实践分析

2019-07-25 04:39谭逢谊
农家科技下旬刊 2019年6期
关键词:实践

谭逢谊

摘 要:我国经济建设进程不断加快,使养殖业有较好的发展,对我国经济发展具有较大的促进作用。其中,在对家禽进行养殖的过程中,易引发不同疾病,尤其在对鸡的养殖过程中,易出现鸡瘟,对人们健康造成一定的影响。其中新城疫疾病,主要症状有神经紊乱、呼吸困难以及浆膜出血等,严重危害鸡的健康生长。新城疫抗体检测技术能够对该病病菌进行有效抑制,在诊断的过程中有较好的实践效果。

关键词:鸡新城疫;抗体检测技术;实践

我国在对鸡饲养的过程中,鸡新城疫疾病对鸡的健康生长造成较大的威胁,在实践过程中存在鸡非典型新城疫及新城疫强毒株感染与免疫问题,是鸡发病的主要因素。若鸡体内新城疫抗体无法达到相应的标准,便会引发新城疫疾病,这就需要采用新城疫抗体检测技术进行有效的诊断,以此在实践过程中有较好的应用效果,具有较高的诊断价值。

一、新城疫病毒概述及结构

1.新城疫病毒概述

新城疫病毒也作为鸡瘟,是新城疫的病原体,该病毒有囊膜的单股负链RNA病毒,属于副粘病毒科,其具有较大的传染性,能够引起家禽呼吸道、消化道病变,有较高的出血量,在较大程度上会对家禽类动物有较大的传染性。

2.新城疫病毒结构

新城疫病毒主要呈现出球状,直径约为300 nm,其结构模式为,两个外模蛋白、基质蛋白以及核壳体。此外,该病毒RNA基因组长度约为15 kb,编码有6个蛋白,外模标案蛋白为融合蛋白,可以有效与靶细胞膜进行有效的融合,以此使病毒大量复制。

二、影响鸡新城HI抗体检测的因素

1.温度的影响

在对新城疫HI抗体进行检测的过程中,若室温较高,会在一定使红细胞解凝时间减少,若室温较低时红细胞解凝时间增加。若室温过高时,应将不同试剂放置在4度的环境中,以便备用。因室温较高时会加快反应速度,因此应使判定结果提前,不能在解凝过程中进行判定,否则会使抗体水平无法相应降低。若温度较低时,需要对HI反应时间实施有效的延长。

2.抗原的影响

抗原也会对HI 抗体检测产生一定的影响,若抗原老旧时,在对红细胞凝聚的过程中,会出现下降的状态,并且使凝集后解凝时间变短,这对检测鸡新城疫抗体不利,因此需要采用新的抗原對鸡新城疫HI抗体实施有效的检测。

3.鸡红细胞浓度的影响

在对鸡新城疫抗体进行检测的过程中,会使用到不同比例的悬浮液,比如采用1%的红细胞悬浮液、0.5的红细胞悬浮液,无论何种悬浮液均需要在配制的过程中保证其准确性。一般情况下,红血球浓度相对较大,其HI值相对较小,反之HI值较大。在此过程中,应当对红细胞离心过程中,离心速度与时间的有效控制,只有这样才能配制出准确的悬浮液,同时悬浮液在使用的过程中需要混合均匀,以此确保浓度的均匀。

三、新城疫发病症状

由于一些因素的影响,我国不同地区鸡的饲养出现了一些问题,发病率较高,甚至一些地区发病率高达90%,死亡率也在逐年上升,对鸡的健康养殖造成较大威胁。其主要症状有:呼吸困难、体温高、排不同颜色稀便以及下痢等,甚至还会出现两腿麻痹、不能站立以及神经等症状,这在较大程度上威胁鸡群的健康生长。

四、剖检变化

气管出血、喉头以及小肠一些部位出现点状、斑块状出血,甚至出现溃疡;腺胃乳头、腺胃与肌胃交界处出血,盲肠扁桃体出血、溃疡、肿胀;脾脏肿大有白色坏死点;肾、肺、肝基本正常,无明显变化。

五、实验室诊断

1.细菌涂片和分离培养

将病鸡脾脏、肝脏以及脑组织取出并作为组织触片,通过革兰氏染色与美兰染色镜检,检测结果显示为发现任何细菌。再将上述病料接种SS琼脂平板、普通琼脂平板,在37度环境中24 h,结果发现无细菌。

2.病毒分离

取出死亡鸡脑、脾脏,研磨后冻融2次,用含有青霉素、链霉素的无菌生理盐水进行稀释,其稀释比例为1:5,再将其4000r/min离心15 min,将上清液取出,放置于4度的冰箱中12 h,以作备用。首先进行鸡胚接种:将病料进行双抗处理,并通过尿囊腔接种30枚11日龄的SPF鸡胚,一般情况下将每胚量控制在0.2 ml,最用量石蜡将其封孔进行孵化,清除死亡鸡胚,4 h照蛋一次,把死亡鸡胚放置在4度的冰箱中进行冷藏。其次进行病毒鉴定:(1)病毒血凝试验:在进行血凝试验的过程中,首先取出鸡胚集中的尿囊液,通过微量法将血凝版进行一定比例的稀释,同时设置生理盐水对照孔,再向每个孔内加入1%的红细胞,需要注意的是需要在鸡的体内获取红细胞,振荡摇匀,并放置于25度的环境中,40 min观察结果。待生理盐水对照孔中的红细胞沉到孔底后对结果实施判定,如果有一定的凝集性,表明鸡在发病的过程中,病原体有较高的血凝性;(2)在判定结果中,前4孔依然存在不同程度的凝集,主要是因ND阳性血清降低所致,且病毒浓度相对较高,从第5孔开始病毒对红细胞的凝集作用被ND阳性血清所抑制,在鸡脑脾分离出的病毒具有对脓细胞凝集的特点,同时还被ND阳性血清抑制,表明分离病毒与NDV有一定的相关性。具体数据由表1所示。

3.抗体检测

在病鸡厂中按照5%采样30只,实施有效的ND抗体检测,检测结果显示,30只病鸡有27只出现抗体表现出异常上升,结合临床症状与剖检变化,表明鸡群感染了ND强度。

六、发生非典型ND的紧急措施

发生非典型ND方法主要从以下几个方面入手:1.通过接种疫苗对未被传染的鸡群畸形疫苗的接种,一般情况下采用倍量Clone-30疫苗进行接种,也可以使用倍量IV疫苗滴鼻点眼的方法提升抗体,还能够通过肌肉注射的方式注射油乳剂灭活苗,此外还能够通过口服的方式V4弱毒疫苗实施有效预防。在对鸡群进行预防的过程中,应根据实际病情针对性选择预防药物与接种方法,不宜使用大剂量的I系疫苗,主要是因此种疫苗会使鸡群产生一定的应急反应,对鸡的下蛋率造成较大的影响,并且会减缓鸡群的恢复时间,在此基础上也增加了死亡率;2.将感染较为严重的病鸡隔离诊治,并对已经死亡病鸡通过焚烧的方式避免病毒的蔓延,同时还需要对饲养环境进行有效的消毒,以此确保饲养环境不被病毒侵害,使鸡群有一个良好的生长环境;3.在进行疫苗的接种时,应只对健康鸡进行接种,患病鸡不能进行接种,能够使用抗血清以及抗ND卵黄液实施有效的治疗,同时还能在饲料与水中添加抗菌类药物,以此可有效防止继发感染细菌病,为鸡身体素质的提升奠定良好的基础。

七、鸡新城疫抗体检测技术在诊断中的应用

根据实际情况进行ND抗体检测为基础的鸡场,以此能够有效提升免疫接种的密度,对质量的提升具有较大的促进作用,以此使鸡体内的不同抗体具有较高的稳定性,比如循环抗体、高滴度的中和抗体,由此可以选择一下免疫程序:10日龄鸡使用NDII系或者IV系滴鼻点眼首免,25日龄采用II系疫苗进行再次滴鼻点眼,并且在此基础上进行肌肉注射ND油乳剂灭活苗,一般情况下注射量保持在0.3 ml/只;60日龄鸡进行联苗注射,还可以进行弱毒注射;120日龄鸡联苗或者油苗注射,种鸡在350日龄实施二次油苗接种。

1.确定雏鸡首免日龄

邹鸡一般在母源抗体消失或者接近消失时实施首免,以此能够得到较为理想的免疫效果。一般情况下对邹鸡在1日龄时进行采血,并对HI效价进行检查。若是大型、高密度的饲养场中,抽样率应大于0.1%,若鸡群越小,抽样率越大,一般抽样率为2%最为理想。通過一定的计算求出HI抗体效价均值,再通过公式进行有效的推算,以此计算出首免日龄,首免日龄一般为4.5(1日龄HI抗体效价均值-4)+5。比如,某地区某批雏鸡1日龄Hl抗体效价均值为6log2,表明其首免日龄=4.5(6-4)+5=14。

2.首免后定期抽检,适时强化免疫

首免后10 d采取血样进行抽样检查,若IH抗体效价均值降至4log2以下,需要进行二免,或以下时进行二免。二免后15 d在进行血样的采取,若抗体效价在5log2以下,应进行二次疫苗的接种,之后需要将IH效价保持在5log2以上,同日龄的种鸡与其他鸡相比应高一个滴度,若在该标准以下,需要及时采取疫苗的接种,直到IH抗体效价均值保持在2log2以上为止,由此可以断定免疫发挥了其应有的作用,如若不需要对其进行补免。

八、结语

综上所述,我国在进行鸡的饲养过程中,由于一些外部因素的影响,使鸡发生的疾病越发增多且复杂,其中鸡新城疫疾病是危害鸡群健康发展的疾病之一,所以需要采用鸡新城疫抗体检测技术对新城疫抗体实施有效的监测,能够保证监测的准确性,再采取有效的措施实施针对性诊断治疗,以此有效提高鸡群的健康生长。

参考文献:

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