SATB2在前列腺癌组织中的表达及其临床意义

李璇　马伟雄　陈文璞　汤金荣　俞国锋　陈忠

【摘要】 目的：探討SATB2在前列腺癌组织中的表达水平，并分析其临床意义。方法：收集2015年1月-2019年1月在本院经病理诊断确认为前列腺癌并进行手术切除的40例前列腺癌组织和相应的癌旁组织标本，采用免疫组织化学检测并比较前列腺癌组织和相应的癌旁组织中SATB2的表达水平;比较不同年龄、Gleason评分、生化复发者SATB2表达情况;绘制生存曲线图，比较SATB2不同表达情况者的生存情况。结果：与正常癌旁组织相比，SATB2在前列腺癌组织中呈高表达（P<0.05）。随访时间截止2019年12月。SATB2阴性者中位生存时间为94个月[95%CI（90.49，97.51）]，死亡1例;SATB2阳性者中位生存时间为85个月[95%CI（80.46，89.54）]，死亡17例，SATB2不同表达情况者生存情况比较，差异有统计学意义（P<0.05）。Gleason评分>7分患者中SATB2表达阳性率高于Gleason评分≤7分者（P<0.05）;生化复发患者SATB2表达阳性率高于无生化复发者，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：SATB2在前列腺癌组织中表达上调，且其高表达与前列腺癌患者的预后不良相关。SATB2可能是前列腺癌的治疗靶点和潜在的诊断标志物。

【关键词】 前列腺癌 SATB2 生化复发

[Abstract] Objective： To investigate the expression level of SATB2 in prostate cancer tissues and analyze its clinical significance. Method： A total of 40 cases of prostate cancer and corresponding paracancerous tissue samples were collected from our hospital from January 2015 to January 2019. The expression levels of SATB2 in prostate cancer and corresponding paracancerous tissues were detected by immunohistochemistry and compared. The expression of SATB2 in patients with different ages， Gleason score and biochemical relapse were compared. Survival curves were drawn to compare the survival of people with different expressions of SATB2. Result： SATB2 was highly expressed in prostate cancer tissues compared with normal paracancerous tissues （P<0.05）. The follow-up time was up to December 2019. The median survival time of SATB2-negative patients was 94 months [95%CI （90.49， 97.51）]， and 1 case died. The median survival time of SATB2-positive patients was 85 months [95%CI （80.46， 89.54）]， and 17 patients died. There was statistically significant difference in the survival of patients with different levels of SATB2 expression （P<0.05）. The positive rate of SATB2 expression in patients with Gleason score > 7 was higher than that in Gleason score ≤7 （P<0.05）. The positive rate of SATB2 expression in patients with biochemical recurrence was higher than that in patients without biochemical recurrence， and the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion： SATB2 expression is upregulated in prostate cancer tissues， and its high expression is associated with poor prognosis in prostate cancer patients. SATB2 may be a therapeutic target and a potential diagnostic marker for prostate cancer.

[Key words] Prostate cancer SATB2 Biochemical recurrence

First-authors address： Jinshan Branch of Shanghai Sixth Peoples Hospital， Shanghai 201599， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.19.006

前列腺癌是男性泌尿系统肿瘤常见的恶性肿瘤，在欧美国家特别是美国发病率最高[1-2]。在我国，前列腺癌发病率比较低，但近年来，随着人口老龄化的加剧，生活水平的提高，饮食结构的改变以及环境污染的加重等，前列腺癌在我国发病率有逐年增高的趋势。流行病学调查显示，中国前列腺癌发病率从2005年的7.9人/10万男性人口增加到2015年的32.3人/10万男性人口，而且在以每年10%的速度攀升。对于我国城市男性，前列腺癌的发病率已在所有恶性肿瘤中居前十位[3]。前列腺癌的病因尚未明确，除与年龄，种族和高动物脂肪饮食等因素相关外，还具有遗传易感性[4]。有数据表明前列腺原位癌、局部浸润癌以及远处转移性癌的10年生存率差异明显，分别为75%、55%和15%[5]。因此，对于前列腺癌患者，早期诊断是至关重要的。

特异AT序列结合蛋白2（SATB2）是一种核基质相关蛋白，对动物正常生长发育十分重要[6-7]。自从2003年首次发现SATB2蛋白以来，关于该蛋白在生物体内的生物功能的研究迅速增加[8]。SATB2由11个外显子组成，分布在2号染色体上，全长191 kb，编码733个氨基酸，预测分子量为82.5 kDa。该蛋白有两个剪切结构域（氨基酸352-437）和一个同源结构域（氨基酸614-677）[8]。从斑马鱼到鸡再到高等哺乳动物，SATB2序列在脊椎动物中高度保守[9]。SATB2表达具有组织特异性，参与神经元、干细胞和成骨细胞的分化[10-11]。SATB2最早被发现是在骨发育和成骨细胞分化中发挥关键作用的转录因子，它被认为参与染色质重塑，通过招募组蛋白乙酰转移酶和去乙酰转移酶到染色质来调节基因表达[12-13]。SATB2的异常表达已被发现与各种癌症，包括肺癌、结肠癌、乳腺癌、胃癌和肝癌高度相关[14-16]。随着研究的深入，SATB2有可能会成为新型分子标志物，对许多肿瘤的发生、发展都有较大的提示意义。然而，有关SATB2在前列腺癌中的作用尚未有报道。

1 材料与方法

1.1 临床组织标本 收集2015年1月-2019年1月在本院经病理诊断确认为前列腺癌并进行手术切除的40例前列腺癌组织及相应的癌旁组织标本，所有患者均未接受内分泌和放化疗的治疗，从手术中所获得的组织标本存储于液氮中。患者年龄45～82岁，平均（64.2±4.4）岁。组织学分型：37例根治及穿刺标本组织类型均为经典型前列腺癌，3例组织学类型为前列腺癌伴神经内分泌分化。该研究获得了上海市第六人民医院人体研究伦理委员会的批准。所有患者均获得书面知情同意书。所有标本均按照伦理和法律标准进行匿名处理。

1.2 试剂及免疫组化染色 对临床前列腺癌样本石蜡包埋的组织切片进行免疫组化分析，所有标本均采用10 %中性福尔马林固定，经脱水、石蜡包埋，石蜡包埋，冰冻切片机切成5 mm厚度的切片，并按照标准免疫组织化学进行染色。SATB2为鼠单克隆抗体，购于Abcam公司，ab92446。使用一抗稀释液代替SATB2抗体作为空白对照，采用DAB显色，苏木精对比染色。

1.3 判定标准 免疫组织化学染色结果判定：（1）按照2019版《中国泌尿外科疾病诊断治疗指南》对前列腺癌组织标本进行Gleason分级，①根据腺体分化程度，按5级评分。1级为一致性规则的大腺体，背靠背密集，形成小结节;2级为较不规则的大腺体，背靠背密集，形成小结节，结节内腺体不融合;3级为浸润性生长的小腺体或腺泡，或小型筛状结构腺体;4级为融合腺体，大型筛状腺体，或呈肾透明细胞癌样;5级为实性癌巢（无腺样结构），单个癌细胞浸润，或呈粉刺样癌（癌细胞坏死）;②对于同一肿瘤不同区域腺癌结构的变异，按其主要和次要分化程度分别评分，以该两项评分相加的总分作為判断预后的标准（例如腺癌主要结构评为2分，次要结构评为4分，则积分为2+4=6分;只有1个结构类型，评分为3分，则积分为3+3=6分）。（2）免疫反应性评分（IRS）：通过评估阳性细胞百分比和染色强度综合评估，阳性细胞百分比评分方法如下，0为0～5%，1为6%～25%，2为26%～50%，3为51%～75%，4为>75%;染色强度评分方法如下，0为阴性，1为微弱，2为中等，3为强。通过将阳性细胞百分比和染色强度评分相乘得到最终IRS，0～2分为阴性，3～6分为弱阳性，7～9分为阳性，10～12分为强阳性。生化复发：指前列腺癌根治手术或根治性放疗达到根治效果后，前列腺特异性抗原（prostate specific antigen，PSA）连续两次超过0.2 ng/mL。

1.4 统计学处理 采用SPSS 18.0软件对所得数据进行统计分析，计数资料采用率（%）表示，比较采用字2检验或者Fisher精确检验分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 前列腺癌组织及正常癌旁组织SATB2表达情况 SATB2在正常癌旁组织中染色呈阴性，而在前列腺癌组织中染色呈棕褐色，见图1。前列腺癌组织的SATB2阳性率为92.5%（37/40）明显高于正常癌旁组织的35.0%（14/40），差异有统计学意义（字2=28.614，P<0.05）。40例正常癌旁组织中SATB2阴性有26例（65.0%），弱阳性12例（30.0%），阳性2例（5.0%），强阳性0例;40例前列腺癌组织中SATB2阴性有3例（7.5%），弱阳性7例（17.5%），阳性21例（52.5%），强阳性9例（22.5%）。见表1。

2.2 不同临床特征前列腺癌患者SATB2表达情况 采用电话及门诊或住院复查等方式进行随访，了解患者生存情况，随访时间截止2019年12月。SATB2阴性者中位生存时间为94个月[95%CI（90.49，97.51）]，死亡1例;SATB2阳性者中位生存时间为85个月[95%CI（80.46，89.54）]，死亡17例，SATB2不同表达情况者生存情况比较，差异有统计学意义（P<0.05），见图2。Gleason评分>7分患者中SATB2表达阳性率高于Gleason评分≤7分者（P<0.05）;生化复发患者SATB2表达阳性率高于无生化复发者，差异有统计学意义（P<0.05）。

見表2。

3 讨论

目前，前列腺癌的早期诊断主要是通过直肠指检（digital rectal examination，DRE）筛查结合前列腺特异性抗原（prostate specific antigen，PSA）。确诊主要依靠前列腺穿刺活检或病理。PSA的发现对于前列腺癌的早期诊断具有里程碑的意义。测定血液中的血清PSA可反映出前列腺本身的改变。PSA水平高于4 ng/mL的男性被认为有患前列腺癌的风险。PSA筛查的广泛应用使转移阶段的前列腺癌、早期浸润前列腺癌得到了诊断，并及时进行治疗，降低了疾病的死亡率。但PSA只具有前列腺组织特异性，而不具备前列腺肿瘤特异性。近年来，PSA对前列腺癌诊断的特异性和敏感度受到了越来越多的质疑。因此，寻找更具特异性与敏感度的分子标志物对于前列腺癌的筛查与早期诊断具有非常重要的作用。

本研究探讨了SATB2在前列腺癌中表达及分析其临床意义。SATB2是一种核基质转录因子，参与染色质重塑和基因调控，对生长发育非常重要[17]。SATB2基因的表达具有组织特异性，只有在前列腺的腔细胞表达SATB2[18]。SATB2及其同系物SATB1被认为与各种癌症有关，它们在这种疾病中的作用是特定于这种类型的癌症的。SATB2是良恶性间充质肿瘤成骨细胞分化的标志物，并促进骨肉瘤的迁移和侵袭[19]。SATB2在喉鳞状细胞癌中属于抑癌基因，其表达缺失与复发和肿瘤高分级有关，而在头颈部鳞状细胞癌中，SATB2的表达不能增加化疗患者的益处[20]。SATB1与SATB2的相互拮抗关系究竟如何，需要进一步的分子细胞学实验加以研究证实。在前列腺癌中，SATB2抑制癌症进展的独特能力可能与其组织特异性表达有关，因为表达该蛋白的唯一上皮细胞是位于前列腺腔细胞。有研究表明，SATB2免疫组化染色尤其是血清SATB的ELISA法检测显示出很好的特异性和敏感度[21]。因此，探明SATB2在前列腺上皮细胞中的正常功能可能有助于了解其在前列腺癌中的独特作用机制，还为SATB2作为前列腺癌临床诊断、预后判断和潜在的基因靶向治疗提供理论依据。

本研究结果显示，SATB2在前列腺癌细胞和正常细胞中均主要分布在细胞质和细胞核中，且SATB2在前列腺癌组织中的表达高于正常癌旁组织（P<0.05）。SATB2不同表达情况者生存情况比较，差异有统计学意义（P<0.05）。Gleason评分>7分患者中SATB2表达阳性率高于Gleason评分≤7分者（P<0.05）;生化复发患者SATB2表达阳性率高于无生化复发者（P<0.05）。SATB2在前列腺癌组织中表达上调，且其高表达与前列腺癌患者的预后不良相关。SATB2可能是前列腺癌的治疗靶点和潜在的诊断标志物。如果能将SATB2与PSA筛查联合应用，势必能降低不必要的前列腺穿刺活检数和减少漏诊率，SATB2有可能将成为筛查和诊断前列腺癌新的特异性标记物。

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（收稿日期：2020-09-21） （本文編辑：田婧）