茶多酚对奶山羊生产性能、血液指标和抗氧化功能的影响

肖红艳 屈金涛,2 凌 浩 张紫阳 何幼宽 刘懿慧 张佩华*

(1.湖南农业大学动物科学技术学院，长沙 410128；2.城步羴牧牧业有限公司，邵阳 422500)

随着抗生素长期使用带来的细菌耐药性和药物残留等问题，国家农业农村部发出公告，自2020年1月1日起，退出除中草药外的所有促生长类药物饲料添加剂品种[1]。因此，寻找更为安全的绿色饲料添加剂已成为目前的研究热点。茶多酚是从茶叶及茶叶副产品中提取的多酚类物质，是一种天然的抗氧化剂，主要成分包括儿茶素、黄酮类和酚酸类等有机化合物[2]。茶多酚具有抗菌、抗氧化、改善肉品质、提高动物的生产性能及机体免疫力等功能[3-6]。Wang等[5]研究表明，饲粮中添加200 mg/kg的茶多酚可提高蛋鸡产蛋性能，改善料蛋比、蛋品质以及内脏形态。Zou等[7]研究发现，饲粮中添加0.06 g/kg BW的茶多酚可以改善黄羽肉鸡的肉品质，促进肠道有益菌的生长，对生产性能没有影响。Ahmed等[8]研究发现，饲粮中添加绿茶提取物能够提高山羊的日增重，改善其肉品质和营养成分，改变羊肉脂肪酸的组成，提高肉的氧化稳定性。目前国内外关于茶多酚在畜禽上的研究主要集中在猪、家禽等方面，而在反刍动物特别是奶山羊方面研究鲜见报道。因此，本试验旨在研究茶多酚对奶山羊生产性能、血液指标和抗氧化能力的影响，探讨其在奶山羊上的应用效果，为茶多酚在奶山羊养殖中的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验地址和试验材料

试验于2020年6—7月在湖南省邵阳市城步苗族自治县某牧场进行，试验动物为西农萨能奶山羊。茶多酚为湖南某公司生产，提取原料为绿茶叶，主要成分及含量为：茶多酚50%，水分5%，咖啡碱6.84%，茶多糖3.5%。

1.2 试验设计

选择24只体重[(55.04±8.22)kg]、泌乳天数[(180±4)d]、产奶量[(1.50±0.16)kg]、胎次(2～3胎)相近的健康西农萨能奶山羊作为试验动物，随机分成2组，每组4个重复，每个重复3只羊。对照组饲喂全混合日粮(TMR)，试验组在TMR中添加5.71 g/kg茶多酚(参考张培军[9]、洪兴华等[10]、陈明等[11]、Ma等[12]的研究结果确定茶多酚添加量)。试验期52 d，其中预试期10 d，正试期42 d。

1.3 基础饲粮与饲养管理

基础饲粮参照NRC(2007)奶山羊的营养需要配制，其组成及营养水平见表1。奶山羊采用小栏饲养，每天08:00和16:00各饲喂1次TMR，保证每栏有5%的剩料。自由采食、自由饮水。每天07:00和18:00进行挤奶。其他饲养管理按照羊场的原有规定进行。

表1 基础饲粮组成及营养水平(干物质基础)

1.4 样品采集与指标测定

1.4.1 生产性能的测定

正试期每天记录每只羊的产奶量；每天准确记录饲喂量和剩料量，测定饲粮中的干物质含量，以栏为单位计算每只羊的干物质采食量。

1.4.2 奶样的采集与测定

在正试期第21天和第42天每头羊按早、晚产奶量=6∶4(体积比)的比例采集奶样100 mL，添加防腐剂，混匀后分装至50 mL离心管，用于乳成分测定。乳糖率、乳脂率、乳蛋白率以及乳中非乳脂固体和尿素氮含量使用FOSS乳成分分析仪(Milko canTMFT6000)测定，乳中体细胞数使用利拉伐DCC体细胞计数仪测定。

1.4.3 血样的采集与测定

在正试期第21天和第42天晨饲前从颈部静脉采集血液，使用不含抗凝剂的5 mL真空采血管收集血液，633×g离心15 min后，吸取血清分装于1.5 mL离心管中，-80 ℃保存备用。使用科华卓越450全自动生化分析仪检测血清中总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)含量和谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性。使用试剂盒测定血清抗氧化指标，包括总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和丙二醛(MDA)含量，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.4.4 血细胞指标的测定

在正试期第21天和第42天晨饲前使用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管从颈部静脉采集血液5 mL，于采血后2 h内采用全自动五分类血细胞分析仪(光电MEK-7222K)测定血细胞指标。包括白细胞(white blood cell，WBC)、中性粒细胞(neutrophils，NEUT)、淋巴细胞(lymphocyte，LYM)、单核细胞(monocyte，MONO)、嗜酸性粒细胞(eosinophils，EO)、嗜碱性粒细胞(basophils，BASO)、红细胞(red blood cell，RBC)数量。

1.4.5 饲粮营养水平的测定

正试期每周采用四分法收集饲粮样500 g，称重后在65 ℃烘箱中烘48 h，计算初水分含量后粉碎，过40目筛用于饲粮营养水平的测定。饲粮中的干物质含量根据GB/T 6435—2006测定，粗蛋白质含量根据GB/T 6432—2018测定，粗脂肪含量根据GB/T 6433—2006测定，粗灰分含量根据GB/T 6438—2007测定，钙含量根据GB/T 6436—2018测定，磷含量根据GB/T 6437—2018测定，中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量根据GB/T 6434—2006测定。

1.5 数据统计分析

试验数据先用Excel 2010进行初步统计整理，然后用SPSS 24.0软件进行数据分析，先对数据进行正态性检验，然后采用独立样本t检验方法进行数据分析，结果以平均值±标准差表示。P<0.05为差异显著，0.05≤P<0.10为有差异趋势。

2 结 果

2.1 茶多酚对奶山羊生产性能的影响

由表2可知，对照组和茶多酚组之间奶山羊的干物质采食量和产奶量无显著差异(P>0.05)。

表2 茶多酚对奶山羊生产性能的影响

2.2 茶多酚对奶山羊乳成分的影响

由表3可知，第21天，茶多酚组的乳中尿素氮含量显著高于对照组(P<0.05)，乳中体细胞数显著低于对照组(P<0.05)；第42天，茶多酚组的乳中体细胞数显著低于对照组(P<0.05)，乳中尿素氮含量与对照组相比无显著差异(P>0.05)。对照组和茶多酚组之间乳脂率、乳蛋白率、乳糖率和乳中非乳脂固体含量在第21天和第42天均差异不显著(P>0.05)。

表3 茶多酚对奶山羊乳成分的影响

2.3 茶多酚对奶山羊血清抗氧化指标的影响

由表4可知，第21天，茶多酚组的血清MDA含量显著低于对照组(P<0.05)，茶多酚组的血清T-SOD和GSH-Px活性显著高于对照组(P<0.05)，对照组和茶多酚组之间血清T-AOC无显著差异(P>0.05)。第42天，与对照组相比，茶多酚组的血清GSH-Px活性有提高的趋势(P=0.065)，对照组和茶多酚组之间血清T-SOD、T-AOC活性和MDA含量无显著差异(P>0.05)。

表4 茶多酚对奶山羊血清抗氧化指标的影响

2.4 茶多酚对奶山羊血清生化指标的影响

由表5可知，第21天，对照组和茶多酚组之间血清TP、ALB含量及AST、ALP活性无显著差异(P>0.05)。第42天，与对照组相比，茶多酚组的血清AST活性有提高的趋势(P=0.067)，对照组和茶多酚组之间血清TP、ALB含量及ALP活性无显著差异(P>0.05)。

表5 茶多酚对奶山羊血清生化指标的影响

2.5 茶多酚对奶山羊血细胞指标的影响

由表6可知，对照组和茶多酚组之间血液白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜碱性粒细胞和红细胞数量在第21天和第42天均无显著差异(P>0.05)。第42天，茶多酚组的血液中嗜酸性粒细胞数量显著低于对照组(P<0.05)。

表6 茶多酚对奶山羊血细胞指标的影响

3 讨 论

3.1 茶多酚对奶山羊生产性能的影响

茶多酚作为一种绿色饲料添加剂，在畜禽饲粮中适量添加可改善动物的生产性能，提高产品品质[13]。Wang等[5]研究报道，饲粮中添加茶多酚对蛋鸡的平均日采食量无显著影响。Gessner等[14]在奶牛上的研究发现，饲粮中添加绿茶提取物不会影响奶牛的干物质采食量。本试验中，饲粮中添加茶多酚对奶山羊干物质采食量无显著影响，造成这种结果的原因可能是由于茶多酚具有苦涩味，并且含有单宁、咖啡碱、鞣酸等物质，影响了饲粮的适口性[13,15]，进而影响了奶山羊的采食量。产奶量是反映奶山羊生产性能的重要指标。Winkler等[16]研究结果显示，饲粮中添加绿茶和姜黄素提取物有提高奶牛产奶量的趋势，并能显著提高奶牛的能量校正乳。Ma等[12]研究报道，饲粮中添加茶多酚可以改善高酮血症奶牛的产奶量和健康状况。本试验中，饲粮中添加茶多酚对奶山羊产奶量无显著影响，可能原因是试验动物不同，具体原因还有待进一步研究。

3.2 茶多酚对奶山羊乳成分的影响

乳中体细胞数可以反映奶山羊乳房的健康状况和生鲜乳的质量。本试验中，饲粮中添加茶多酚显著降低了乳中体细胞数，说明茶多酚对奶山羊乳房健康有积极作用。Ma等[17]研究表明，茶多酚能够抑制活性氧(ROS)和MDA产生，提高抗氧化酶的活性，保护牛乳腺上皮细胞免受氧化损伤。同时，茶多酚具有较强的抗炎、抗菌和免疫调节作用[13]。因此，推测茶多酚可能是通过提高机体的抗氧化能力和免疫力，降低乳中体细胞数。乳中尿素氮含量可以反映出动物对蛋白质的利用效率。本试验中，饲粮中添加茶多酚提高了乳中尿素氮含量，推测茶多酚可能促进了瘤胃微生物对饲粮粗蛋白质的降解。

3.3 茶多酚对奶山羊血清抗氧化指标的影响

体内ROS的生成与抗氧化酶的产生是一种动态平衡关系，当平衡被打破时，就会产生大量的自由基，造成氧化应激，从而引起多种疾病的发生[13]。T-AOC是评定机体抗氧化能力的综合指标，超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和GSH-Px等抗氧化酶在保护机体免受氧化损伤方面起着重要作用，在一定范围内活性越高表明机体的抗氧化能力越强[18]。MDA是脂质氧化的终产物，血清中MDA含量越低，机体受到的氧化损伤就越小。张培军[9]研究表明，饲粮中添加茶多酚能显著提高奶牛血清T-AOC和GSH-Px活性，显著降低血清MDA含量。Shah等[6]研究报道，饲喂4%茶树的枝叶(BLTT)能显著提高南江黄山羊血清SOD和GSH-Px活性，降低血清MDA含量。本试验中，饲粮中添加茶多酚可显著提高血清中GSH-Px和T-SOD活性，降低血清MDA含量，与前人的研究结果基本一致。其原因可能是饲粮中添加茶多酚后，提高了血清中抗氧化酶的活性，降低机体的脂质过氧化水平，进而提高了奶山羊的抗氧化功能[2]。

3.4 茶多酚对奶山羊血清生化指标的影响

血清生化指标的变化能够评估机体的健康水平及营养物质的代谢情况。血清AST活性是反映机体肝脏功能的重要指标[19]。AST能够调节机体内蛋白质的代谢，当蛋白质代谢水平提高或肝脏功能受损时，血清AST活性升高[19]。本试验中，茶多酚组奶山羊血清AST活性有提高的趋势，但处于正常范围内[20]，推测茶多酚组血清AST活性的升高并不是肝功能受到损伤，而是促进了机体内蛋白质的代谢。李桦等[21]研究表明，茶多酚具有调节机体蛋白质代谢的作用。血清ALP也是检测肝脏功能的一个重要指标，当肝脏受到损伤时，肝细胞膜通透性加大，从而导致血清ALP活性升高[22]。本试验中，饲粮中添加茶多酚对奶山羊血清AST和ALP活性无显著影响，说明饲粮中添加茶多酚不会对奶山羊的肝功能产生负面影响。

3.5 茶多酚对奶山羊血细胞指标的影响

血细胞作为血液中最基本的检查指标，可通过血液中细胞的增多或减少来反映机体的健康状况和预测疾病的发生[23]。血细胞中的白细胞是体内重要的免疫细胞，主要包括单核细胞、中性粒细胞、嗜酸性和嗜碱性粒细胞、淋巴细胞，在抵抗异物入侵机体、产生抗体、介导免疫应答方面发挥重要作用[24]。嗜酸性粒细胞在白细胞中的比例较小，通常存在于呼吸道和消化道内，在介导变态反应、寄生虫感染和免疫调节等方面发挥重要作用[25]。研究表明，当机体感染寄生虫时，体内嗜酸性粒细胞数量增多[26]。Zhong等[27]研究表明，茶多酚能够抑制捻转血矛线虫的感染，提高宿主的抵抗力。本试验中，饲粮中添加茶多酚降低了血液中嗜酸性粒细胞的数量，对其他血细胞指标无显著影响，说明茶多酚对动物的健康无负面影响。目前，茶多酚对血细胞指标影响的研究较少，具体机制还有待进一步研究。

4 结 论

在本试验条件下，饲粮中添加茶多酚能提高奶山羊的抗氧化功能，降低乳中体细胞数。