不同断奶模式对仔猪免疫器官指数和免疫球蛋白含量的影响

石志芳，王天武，康静静，柳高冉，李 阳，席 磊

(1 河南牧业经济学院 a动物科技学院，b动物医药学院,河南 郑州 450046；2 云南农业大学 动物科学技术学院，云南 昆明 650201)

断奶是仔猪生产过程中的重要阶段，较为常见的断奶方式为一次性断奶，这种方式极易导致母猪患乳房炎，仔猪遭受严重断奶应激[1]。断奶应激主要是由断奶、分群及饲料和猪舍环境的改变等对仔猪生产性能和健康水平产生影响的综合性应激反应过程[2]。断奶对于仔猪生理和心理健康影响极大，从而影响仔猪的健康水平[1]和生猪生产效益[3]。因此，根据实际生产情况改进仔猪断奶模式，对于缓解断奶应激，减少经济损失具有重要意义[4]。目前，关于减缓营养应激对仔猪影响的研究较多[5-6]，而有关减缓环境应激对仔猪影响的研究鲜有报道，仅见马墉等[7]对缓解断奶仔猪的环控模式进行了研究。本试验研究了喷洒气味剂、先混群后断奶及常规断奶3种方式对仔猪免疫器官指数及肠黏膜和血清中免疫球蛋白A(IgA)、IgG、IgM和白介素2(IL-2)含量的影响，旨在寻求能够有效缓解仔猪断奶应激的断奶模式。

1 材料与方法

1.1 试验设计

试验在河南省鹤壁市淇县某猪场进行。将27窝“杜×长×大”三元杂交仔猪随机分为3组，分别为常规断奶组(C组)、喷洒气味剂组(S组)和先混群后断奶组(M组)，每组3个重复，每个重复3窝仔猪。C组在仔猪28日龄时断奶，同时进行混群；S组仔猪28日龄断奶、混群，同时每天向仔猪身上喷洒体积分数2%的戊二醛，持续喷洒7 d后停止；M组仔猪在21日龄时，将相邻3个产床中间的隔板打通，仔猪留在原栏中进行混群，28日龄时断奶。试验周期内所有猪只均自由采食和饮水。基础饲粮参照NRC(2012)猪的营养需要配制，其组成及营养水平见表1。

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of basal diet (air-dry basis)

1.2 样品采集

断奶后第8天，每组随机选取3头仔猪，称体质量。采用活体前腔静脉采血法，每头仔猪采血5 mL，静置2 h，3 000 r/min条件下离心10 min，移液枪吸取上清液存贮于5 mL离心管中，放置于-20 ℃冰箱中保存待测。解剖供试仔猪(解剖前禁食不禁水8 h)，采集扁桃体、脾脏、胸腺、下颌淋巴结、腹股淋巴结，分别称取质量；分离出小肠，刮取回肠和空肠黏膜，分别贮存于5 mL样品管内，-80 ℃液氮内保存待检。

1.3 测定指标

免疫器官指数的计算公式为：免疫器官指数=免疫器官质量/活体质量×100%。

肠黏膜和血清中IgA、IgG、IgM和IL-2的含量均采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定，ELISA试剂盒购自武汉华美生物工程有限公司，具体操作方法见试剂盒说明书。

1.4 数据统计分析

试验数据采用SPSS 24.0统计学软件进行统计分析，各组间差异采用单因素方差分析检验(LSD)；所得结果用“平均数±标准误”(Mean±SE)表示，P>0.05表示差异不显著，P<0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 不同断奶模式对仔猪免疫器官指数的影响

由表2可知，S组胸腺指数、腹股淋巴结指数和扁桃体指数均显著高于C组(P<0.05)，脾脏指数和下颌淋巴结指数与C组无显著差异(P>0.05)；M组各免疫器官指数均显著高于C组和S组(P<0.05)。

表2 不同断奶模式中仔猪免疫器官指数Table 2 Immune organ indexes of piglets with different weaning modes

2.2 不同断奶模式对仔猪肠黏膜和血清中IgA、IgG、IgM含量的影响

2.2.1 肠黏膜中IgA、IgG和IgM的含量 由表3可知，S组回肠黏膜、M组空肠和回肠黏膜中IgA、IgG和IgM含量均较C组显著提高(P<0.05)，S组空肠黏膜中IgA、IgG和IgM含量与C组无显著差异(P>0.05)。M组空肠黏膜中IgG、IgM和回肠黏膜中IgM含量均较S组显著提高(P<0.05)。

表3 不同断奶模式仔猪肠黏膜中IgA、IgG和IgM的含量Table 3 IgA,IgG and IgM contents in intestinal mucosa of piglets with different weaning modes μg/mL

2.2.2 血清中IgA、IgG和IgM的含量 由表4可知，S组血清中的IgA、IgM含量均显著高于C组(P<0.05)，而IgG含量差异不显著(P>0.05)；M组血清中的IgA、IgG、IgM含量均显著高于C组(P<0.05)；M组IgG含量显著高于S组(P<0.05)。

表4 不同断奶模式仔猪血清中IgA、IgG和IgM的含量Table 4 IgA,IgG and IgM contents in serum of piglets with different weaning modes mg/mL

2.3 不同断奶模式对仔猪肠黏膜和血清中IL-2含量的影响

由表5可知，S组回肠黏膜中IL-2含量显著高于C组(P<0.05)，空肠和血清中的IL-2含量与C组无显著差异(P>0.05)；M组空肠和回肠黏膜及血清中IL-2含量均显著高于C组和S组(P<0.05)。

表5 不同断奶模式仔猪肠黏膜和血清中IL-2的含量Table 5 IL-2 contents in intestinal mucosa and serum of piglets with different weaning modes pg/mL

3 讨 论

3.1 不同断奶模式对仔猪免疫器官指数的影响

研究表明，健康的幼龄动物由于自身细胞分裂和生长发育，其免疫器官质量增加，免疫器官指数增大，机体免疫机能和免疫水平提高[8-11]。本研究结果显示，与常规断奶组相比，喷洒气味剂可使仔猪除脾脏和下颌淋巴结指数外的其他免疫器官指数均显著提高,而先混群后断奶仔猪的各免疫器官指数均显著提高，与周盟等[12]的研究结果基本一致。结果说明，在仔猪体表喷洒体积分数2%戊二醛溶液和先混群后断奶都能起到减缓仔猪断奶应激而提高免疫器官指数的作用，且先混群后断奶组的效果优于喷洒气味剂组。猪只可凭借灵敏的嗅觉识别群内的个体，从而保持圈舍内群体之间的密切联系，对混入本群的其他仔猪能很快识别并加以驱赶，甚至咬伤或咬死[13]。本试验S组在仔猪体表喷洒体积分数2%戊二醛气味剂后所有的仔猪气味相近，减少了混群时仔猪因重新确立群体位次而造成的撕咬打斗等行为，降低了仔猪混群应激；M组在21日龄时将3个相邻圈舍隔断打通，在形式上完成了混群，仔猪可以在母猪的带领下和同伴交流，减少了打斗撕咬等混群应激行为，在28日龄再进行断奶，减轻了混群与断奶带来的应激叠加造成的影响。

3.2 不同断奶模式对仔猪IgA、IgG、IgM含量的影响

动物免疫系统通过免疫细胞和免疫活性分子的相互作用实现对外界抗原的识别和应答[14-16]。机体免疫器官质量的增加代表着器官内淋巴细胞增殖，免疫活性分子含量的高低则体现了机体免疫应答水平的强弱[17]，其中免疫球蛋白是机体免疫系统的重要成分之一，也是体液免疫的重要基础[18]。IgA对局部黏膜可起保护作用，在消化道和呼吸道的保护中也担当着重要角色，是机体黏膜免疫的重要屏障[18]。IgG是机体抵抗病原体感染时的主要力量[19]，在动物体内分布极为广泛，是血液中含量最高的免疫球蛋白。IgM是机体第1次发生免疫应答时最早出现的抗体；而当机体发生第2次免疫应答时，免疫球蛋白IgG是最主要的抗体[20]。本研究结果显示，与常规断奶组相比，喷洒气味剂组仔猪回肠黏膜、先混群后断奶组仔猪的空肠和回肠黏膜中IgA、IgG、IgM含量均显著提高(P<0.05)，而喷洒气味剂组仔猪的空肠黏膜中IgA、IgG、IgM含量则无显著差异(P>0.05)；与喷洒气味剂组相比，先混群后断奶组仔猪的空肠和回肠黏膜中IgM含量均显著提高(P<0.05)。与常规断奶组相比，喷洒气味剂组仔猪血清中IgA、IgM含量均显著提高(P<0.05)，先混群后断奶组仔猪血清中IgA、IgM、IgG含量均显著提高(P<0.05)；与喷洒气味剂组相比，先混群后断奶组仔猪血清中IgG含量也显著提高(P<0.05)。产生上述结果的原因可能与喷洒气味剂和先混群后断奶的模式能够有效缓解因应激引发的肠道黏膜生长发育减慢、体液免疫力下降有关[21]。

3.3 不同断奶模式对仔猪IL-2含量的影响

IL-2是辅助性T细胞在有丝分裂素刺激下所产生的一种免疫活性物质，也称T细胞生长因子，对机体的免疫应答起着重要的作用[22]。IL-2不仅可以增强T淋巴细胞和NK细胞的活性，还具有调节和增强仔猪免疫功能及抗病毒能力的作用，IL-2还在信息传递、免疫细胞激活与调节以及T、B淋巴细胞的活化、增殖与分化中发挥着重要作用[23]。本研究结果显示，与常规断奶组相比，喷洒气味剂组仔猪回肠黏膜中IL-2含量、先混群后断奶组仔猪肠黏膜和血清中IL-2含量均显著提高(P<0.05)；与喷洒气味剂组相比，先混群后断奶组仔猪的肠黏膜和血清中IL-2含量均显著提高(P<0.05)。这可能与喷洒气味剂和先混群后断奶的模式能够有效缓解因应激引发的机体免疫力下降，从而提高仔猪免疫功能有关[24-25]。本研究结果表明，先混群后断奶的模式能够显著提高仔猪肠道黏膜和血清中IL-2的水平，从而增强仔猪机体免疫应答水平，有效减缓仔猪断奶应激。

4 结 论

仔猪断奶后体表喷洒体积分数2%戊二醛气味剂能在一定程度上减缓仔猪断奶应激，提高免疫器官指数及肠黏膜、血清中IgA、IgG、IgM含量，增强机体免疫应答水平；先混群后断奶能有效减缓断奶应激，提高免疫器官指数，提高肠黏膜、血清中IgA、IgG、IgM的含量，增强机体免疫应答水平。先混群后断奶的模式效果更优。