自身免疫性肝炎患者外周血OX40/OX40L变化及临床意义

张羽 杨静 田岚

自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis，AIH)多发于女性，属于进行性炎症肝病[1]。AIH患者早期没有明显症状，临床缺乏有效的早期诊断指标[2]。T、B淋巴细胞异常激活及单核巨噬系统的活化与AIH的发生关系密切[3-4]。OX40在激活的 CD4+、CD8+T 淋巴细胞表面表达，OX40L多表达于激活的单核巨噬细胞、B淋巴细胞，OX40/OX40L在自身免疫性疾病的发生中具有关键作用[5-6]。然而，关于AIH患者外周血OX40/OX40L变化及临床意义尚未完全清楚，故本研究开展上述问题的探讨，详情如下。

资料与方法

一、研究对象

选取2019年7月至2020年12月绵阳市中心医院收治的85例AIH患者(研究组)及同时间段体检的62例健康人群(对照组)为研究对象，经医院伦理委员会批准。

纳入标准：①研究组均符合《2019年美国肝病学会实践指引和指南:成人和儿童自身免疫性肝炎的诊断与治疗》[7]中关于成人AIH诊断标准者；研究组患者均为首次确诊者；对照组近3个月未发生疾病；签署研究知情同意书。

排除标准：伴有恶性肿瘤、心肝肾等重要脏器功能障碍、血液系统疾病及免疫缺陷者；近1个月内接受过激素、受体抑制剂等药物治疗者；处于哺乳期、孕期者；其他类型肝脏疾病、药物性肝损伤患者等；参与其他研究者。

二、指标检测方法

研究组治疗前、对照组体检时空腹采血3 mL，乙二胺四乙酸抗凝，抗凝全血分别加入2支试管，之后在1支试管中加入抗人CD4-FITC、抗人OX40-PERCP抗体，另1支试管加入抗人CD19-FITC、抗人OX40L-PERCP，最后避光孵育、离心、弃上清、洗涤，采用用美国贝克曼库尔特公司的FACSCalibur式流式细胞仪检测外周血OX40、OX40L情况。

三、资料收集

收集性别、年龄、吸烟史、饮酒史、合并症、T淋巴细胞亚群、血清C反应蛋白含量、外周血白细胞计数、白细胞介素-6、白细胞介素-4、白细胞介素-21、趋化因子、谷丙转氨酶、外周血OX40、OX40L阳性表达等资料。

四、统计学分析

结 果

一、两组资料

两组性别、年龄、体质量指数、合并症、吸烟史、饮酒史对比差异无统计学意义(P>0.05)，两组趋化因子、T淋巴细胞亚群、谷丙转氨酶、C反应蛋白、白细胞计数、白细胞介素-6、白细胞介素-4、白细胞介素-21、OX40、OX40L对比差异具有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 两组资料(±s)

二、 影响AIH发生的多因素分析

以AIH是否发生为因变量(未发生=0，发生=1)，T淋巴细胞亚群比例、C反应蛋白、趋化因子、谷丙转氨酶、白细胞计数、白细胞介素-6、白细胞介素-4、白细胞介素-21、OX40、OX40L为自变量，将自变量赋值为连续变量行Logistic回归分析，显示OX40、OX40L、白细胞介素-21是AIH发生的影响因素(P<0.05)，见表2。

续表1

表2 AIH的多因素分析

三、OX40/OX40L预测AIH发生的诊断价值

ROC曲线分析结果显示，OX40、OX40L及二者联合对AIH的发生具有一定诊断效能，其AUC分别为0.804、0.789、0.914，OX40联合OX40L的AUC最大，具体见表3与图1。

表3 OX40/OX40L预测AIH发生的诊断价值

图1 OX40、OX40L及二者联合对AIH诊断的ROC曲线

讨 论

AIH患者病情恶化可形成暴发性肝衰竭、肝癌，早期有效诊断对于及时开展医疗措施极其重要[8-9]。AIH早期症状不明显，多数患者确诊时已展为肝炎。故临床急需寻找有效的诊断指标以便早日诊断AIH，及时阻断疾病进展，改善预后。

本研究发现OX40、OX40L水平是AIH发生的影响因素。AIH的发生与机体T淋巴细胞功能亢进、B淋巴细胞抗体分泌异常密切相关[10-11]。OX40在激活的 CD4+、CD8+ T 淋巴细胞表面表达，OX40L多表达于激活的单核巨噬细胞、B淋巴细胞，OX40/OX40L通路活化后，刺激CD4+ T淋巴细胞迁移、分化，CD8+ T淋巴细胞生理功能增强，B淋巴细胞异常增殖、分化，产生自身抗体。OX40 /OX40L可刺激机体OX40+ CD4+ T淋巴细胞过度表达，导致炎症因子过度分泌，加重机体炎症反应，当OX40通路受到有效抑制后，机体促炎反应明显减弱[12-13]。OX40 /OX40L表达高，机体CD4+ T淋巴细胞生理功能则过度强化，自身抗体、炎性细胞因子异常分泌，且CD4+ 、B淋巴细胞表面应答协同刺激分子共同作用，免疫系统功能发生改变，导致机体过度免疫应答、自身抗体分泌过量，增加了自身免疫性疾病的发生风险[14]。ROC曲线分析显示OX40、OX40L联合诊断AIH的AUC最大，提示OX40、OX40L联合诊断AIH的价值高于单独诊断。临床检测外周血OX40/OX40L变化有助于监测自身免疫性疾病的发生、发展情况，二者联合可全面发挥优势，诊断价值较高[15]。

综上，建议临床动态监测外周血OX40/OX40L变化，有助于早期诊断AIH。OX40 /OX40L在AIH中的具体作用机制需后续多中心、大样本量研究。