37.5%噻虫嗪·氟虫腈悬浮剂的高效液相色谱分析

王晓玉，李二润，谭头云，杨水苗

(浙江永农生物科学有限公司，浙江 绍兴 312000)

噻虫嗪(thiamethoxam)是一种高效、低毒的第2代烟碱类杀虫剂，具有胃毒、触杀和内吸活性，常用于种子处理及叶片喷雾[1-2]，其对蚜虫、飞虱、叶蝉、蓟马、白粉虱以及马铃薯甲虫的防治效果较好，且稳定性好，持效期长[3]。氟虫腈(fipronil)是一种高效、广谱的新型苯基吡唑类杀虫剂，对蚜虫、飞虱具有较好的杀虫活性，可用于棉花、玉米、水稻、蔬菜及果树等多种作物的害虫防治[4-5]。目前，关于噻虫嗪、氟虫腈单剂或与其他药剂复配的液相分析方法已有报道，但2 者复配制剂产品分析方法未见报道。基于此，本文采用高效液相色谱仪实现了37.5%噻虫嗪·氟虫腈悬浮剂中有效成分的分离与测定，且具有方便、快速、准确的特点。

1 材料与方法

1.1 仪器和试剂

美国Agilent 1260型高效液相色谱仪配DAD检测器、自动进样器及Agilent 1260色谱工作站；KH7200DE型超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司)；SQP型电子天平(赛多利斯公司)。

乙腈(色谱纯，美国阿斯顿技术有限公司)；纯净水(娃哈哈水)；噻虫嗪标准品、氟虫腈标准品(≥98.0%，沈阳国家农药质量检测中心)；37.5%噻虫嗪·氟虫腈悬浮剂(其中噻虫嗪17.5%、氟虫腈20.0%，永农生物科学有限公司)。

1.2 色谱操作条件

Eclipse Plus-C18不锈钢柱色谱柱为250 mm×4.6 mm，粒径5µm；流动相：乙腈∶水＝70∶30(体积比)；检测波长：280 nm；流速：1.0 mL/min；进样体积：5µL；柱温：35 ℃。保留时间：噻虫嗪约为3.1 min，氟虫腈约为7.7 min。

上述色谱操作条件系典型操作条件，检测时可根据仪器特点的不同，对方法中给定的操作参数做适当的调整，以获得最佳效果。典型的标样和试样液相色谱图见图1。

图1 37.5%噻虫嗪·氟虫腈悬浮剂标准品及样品的高效液相色谱图

1.3 溶液配制

1.3.1 标样溶液的配制

称取噻虫嗪标准品0.035 g、氟虫腈标准品0.04 g(精确至0.000 1 g)，置于100 mL容量瓶中，用流动相溶解并定容，超声振荡5 min使样品充分溶解，冷却至刻度，摇匀。

1.3.2 试样溶液的配制

准确称取试样0.2 g(精确至0.000 1 g)，置于100 mL容量瓶中，用流动相溶解并定容，超声波振荡5 min使样品充分溶解，冷却至刻度，摇匀，过0.45µm有机系滤膜，备用。

1.4 测定

在上述色谱操作条件下，待仪器运行基线稳定后，先注入数针标样溶液，直至噻虫嗪(氟虫腈)连续2针进样的峰面积相对偏差不大于1%时，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液顺序进样。

2次平行测定结果之差，噻虫嗪、氟虫腈分别应不大于0.5%，取其算术平均值，作为测定结果。

1.5 计算

将2针试样溶液及试样溶液前后2针标样溶液噻虫嗪和氟虫腈的峰面积分别进行平均，试样中噻虫嗪(氟虫腈)质量分数X1按下式计算：

式中：A1为标样溶液中，噻虫嗪或氟虫腈峰面积的平均值；A2为试样溶液中，噻虫嗪或氟虫腈峰面积的平均值；m1为噻虫嗪或氟虫腈标样的质量(g)；m2为试样的质量(g)；P为标样中噻虫嗪或氟虫腈的质量分数(%)。

2 结果与讨论

2.1 检测波长的选择

通过Agilent 1260高效液相色谱仪DAD检测器的光谱数据采集功能，于190～400 nm的波长范围内扫描，见图2。可见，在280 nm处，噻虫嗪或氟虫腈的峰面积和峰高的差距最小，且无明显杂质和助剂干扰。

图2 噻虫嗪和氟虫腈的DAD扫描图

2.2 流动相的选择

试验选择Eclipse Plus-C18色谱柱，选用不同比例的乙腈+水、甲醇+水、甲醇+乙腈+水作为流动相进行试验，结果发现以乙腈∶水=70∶30(体积比)作为流动相、流速1.0 mL/min时，出峰时间短，分离效果好，峰形尖锐，且无其他杂质的干扰。

2.3 分析方法的线性关系曲线

分别配制5个不同质量浓度的噻虫嗪(或氟虫腈)标准溶液，在上述条件下对噻虫嗪(或氟虫腈)进行分析，取2次测定的峰面积平均值作为测定结果。以噻虫嗪(或氟虫腈)质量浓度(mg/mL)为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，见图3。噻虫嗪(或氟虫腈)质量浓度与其响应值之间呈现出良好的线性关系，其回归方程分别为：噻虫嗪y=5 629.6x+42.829，R2=0.999 4；氟虫腈y=4 792.1x+42.616，R2=0.999 3。

图3 噻虫嗪、氟虫腈质量浓度与其响应值之间的线性关系图

2.4 分析方法的精密度

对同一样品称取10个试样在上述色谱操作条件下进行平行测定，结果见表1。噻虫嗪和氟虫腈的标准偏差分别为0.06和0.05；变异系数分别为0.36%和0.25%，说明此方法的精密度良好。

表1 37.5%噻虫嗪·氟虫腈悬浮剂精密度测定

2.5 分析方法的准确度

在已知含量的试样中加入一定量的噻虫嗪、氟虫腈的标样，按上述色谱操作条件进行测定，计算每个样品的回收率并计算其平均回收率，结果见表2。噻虫嗪的回收率为99.68%～100.35%，平均回收率为99.94%；氟虫腈的回收率为99.65%～100.15%，平均回收率为99.84%，说明该方法具有较高的准确度，满足定量分析要求。

表2 37.5%噻虫嗪·氟虫腈悬浮剂准确度测定

3 结论

本文采用高效液相色谱法建立了37.5%噻虫嗪·氟虫腈悬浮剂有效成分的定性定量分析方法，具有分离效果好、精密度和准确度较高以及省时、简便、准确等特点，可以满足生产企业生产中该产品的质量控制要求。