分子杂交技术的应用简述

黄凤珍

核酸分子杂交技术是利用DNA变性与复性的原理，在某种理化因素作用下DNA双链分子解链变性后，在DNA复性重新形成双螺旋结构时，把不同的DNA单链分子或者DNA与RNA的混合物放在同一溶液中，只要在DNA或RNA单链分子之间存在一定的碱基互补配对关系，就可以在DNA之间或DNA与RNA之间形成杂化的双链。蛋白质分子杂交是一种借助特异性抗体鉴定抗原的有效方法。分子杂交技术有很多种，下面重点介绍三种常用的分子杂交技术的基本流程和应用。

1Southern杂交——DNA和DNA分子之间的杂交

1.1基本流程

第一步，从组织或细胞中提取出DNA，经过适当的限制酶切后进行琼脂糖凝胶电泳，将不同大小的片段分开；

第二步，将凝胶上的DNA片段转移到硝酸纤维素膜上；

第三步，用标记了放射性同位素(或生物素)的目的基因的DNA片段作为探针与硝酸纤维素膜上的DNA进行杂交；

第四步，将X光底片压在硝酸纤维素膜上，在暗处使底片感光；

第五步，将X光底片冲洗，如果在底片上出现黑色条带，则表明待测样品中含有目的基因。

1.2具体应用

Southern杂交主要用来研究DNA分子中某一基因位置、某一专一序列在待检样品中存在与否及两种核酸分子之间的相似性。具体来说，此项分子杂交的应用有以下几点。

1.2.1用于对基因组中特定基因的定位及检测

如基因工程中用于检测目的基因是否整合到受体生物的染色体DNA中。这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。

1.2.2用于从基因文库中找到所需要的基因