乳酸环丙沙星注射液细菌内毒素检验方法分析

陈万胜

(河南省许昌市食品药品检验所 河南许昌 461000)

乳酸环丙沙星注射液细菌内毒素检验方法分析

陈万胜

(河南省许昌市食品药品检验所 河南许昌 461000)

目的 探讨研究乳酸环丙沙星注射液细菌内毒素检验方法。方法 采用鲎试剂细菌内毒素检查法进行乳酸环丙沙星注射液细菌内毒素检验。结果 0.1%乳酸环丙沙星注射液对细菌内毒素检查无干扰;5批样品家兔热原检查结果均为阴性,与细菌内毒素检查法检查结果相同。结论 乳酸环丙沙星注射液采用细菌内毒素检查法(BET)进行热原检查,该方法简便快速,可以取代家兔法检查热原。鲎试剂检验方法更简便、快速、灵敏、准确。

乳酸环丙沙星注射液 细菌内毒素 检验方法 分析

乳酸环丙沙星注射液是临床常用的广谱抗生素,已得到临床广泛应用。根据鲎试剂能与细菌内毒素发生非常灵敏的特异性反应机理[1],我们对0.1%乳酸环丙沙星注射液的细菌内毒素检测方法进行了研究。

1 临床材料

1.1 一般材料

鲎试剂(动态浊度法专用),福建省福州东方鲎试剂厂生产的批号:990820,灵敏度:0.5EU/mL,装量:0．5mL/支。细菌内毒素检查用水,批号:000313,装量:2mL/支,湛江海洋生物制品厂生产。细菌内毒素国家标准品,批号:981,装量:9000EU/支,中检所制。乳酸环丙沙星注射液:广西裕源药业有限公司国药准字H20033501,批号:201012856 201035846 201052321 201003656 201045741,每瓶100mL。

1.2 实验材料

器皿自动旋涡混合器:天津药典标准仪器厂;DC-3型干式恒温器:南京三爱斯技术有限开发公司;试管、吸管等所需器皿均经250℃lh除去外源性内毒素。

2 方法与结果

2.1 细菌内毒素限值的确定

乳酸环丙沙星注射液热源检查剂量按家兔体重每1kg注射3mL。静脉给药时无任何不良反应的内毒素阈剂量K=5Eu/Kg,依据2000年版药典规定本品热原检查注射液剂量M=12mL/kg[2],本品细菌内毒素理论限值L=0.417Eu/mL。

2.2 最大有效稀释倍数

L值确定后,根据所用鲎试剂的λ b值确定样品的稀释倍数。最大有效稀释倍数MVD=L/λ b[3],本实验采用λ b为0.5Eu/mL的鲎试剂,0.1%乳酸环丙沙星注射液MVD=1.2。

2.3 抑制增强试验

我们采用λ=0.5.5Eu/mL的鲎试剂做抑制增强试验[4]。用细菌内毒素检查用水将乳酸环丙沙星注射液稀释3.2倍;将内毒素工作标准品用乳酸环丙沙星注射液稀释液样品溶液溶解,在旋涡混合器上进行混合15min,然后制备成合适的稀释浓度,1.0Eu/mL, 0.5Eu/mL,0.25Eu/mL,0.125Eu/mL;进行抑制增强试验,乳酸环丙沙星注射液稀释液样品溶液代替水为阴性对照,测的了批样品的反应结果一致;说明0.1%乳酸环丙沙星注射液对细菌内毒素检查无干扰,具体见表1。

表1 抑制增强试验结果

2.4 样品的细菌内毒素检测

将5批样品与0.5Eu/mL鲎试剂混合后,按细菌内毒素检查法检查,均为阴性。5批样品家兔热原检查结果(按照中国药典1995年版操作)均为阴性,与细菌内毒素检查法检查结果相同。

3 结语

中国药典200年版规定,乳酸环丙沙星注射的热原检查采用家兔检查法[5];通过我们对本次实验结果表明,0.1%乳酸环丙沙星注射液采用细菌内毒素检查法(BET)进行热原检查,该方法简便快速,可以取代家兔法检查热原。鲎试剂检验方法更简便、快速、灵敏、准确[6]。

[1]曲道杰．20%、25%、50%葡萄糖注射液细菌内毒索检验方法的试验研究[J]．药物分析杂志,2006,15(3):305～308．

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M]．北京:化学工业出版社,2005:附录86,204．

[3]中国药品生物制品检定所．中国药品检验标准操作规范[M]．北京:中国医药科技出版社,2001:389．

[4]黄俊.乳酸环丙沙星注射液细菌内毒素检查法的建立［J］.广西医学,2009,31(5):875.

[5]陈铭军.鲎实验法检查乳酸环丙沙星注射液的细菌内毒素限量［J］.广西中医学院学报,2000,17(1):53.

[6]黄清泉,夏振民.药品细菌内毒素检查的实验设计［J］．中国药学杂志,2007,32(2):72.

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1674-0742(2011)05(a)-0129-01

2010-11-30