七才汤对小鼠肠道菌群影响的研究

李巧巧，王 莉，胡永红

1.中山大学肿瘤防治中心放疗科(广东 广州 510060) 2.中山大学肿瘤防治中心研究所(广东 广州 510060)

七才汤是由党参、白术、茯苓、甘草、猴头菇、白芍、陈皮等7味中药组成的经验方。为探讨七才汤对肠道菌群的影响，我们比较了灌胃前后小鼠体内肠道菌群数的变化，以期为七才汤的临床应用提供实验依据。

1 材料和方法

1.1动物清洁级雄性BALB/c小鼠48只，体重(20.0±2.0)g，中山大学实验动物中心提供(合格证号：SCXK(粤)2009-0011)。小鼠于代谢笼内单独饲养，温度(22±2)℃，湿度58%～60%。

1.2药物和试剂七才汤(党参、白术、茯苓、甘草、猴头菇、白芍、陈皮)，常规煎制，浓缩至0.5 g/mL生药量，4℃保存，给药前复温至25～30℃。

1.3细菌和培养基双歧杆菌、乳杆菌、拟杆菌、肠杆菌和肠球菌、产气荚膜梭菌均由卫生部食品卫生检验所提供。BBL、LBs、EMB、Ec、NN、改良GAM培养基均为自制。稀释液(0.05%灭菌酵母粉水溶液)自制。

1.4主要仪器MLS-3780高压蒸汽灭菌器(日本三洋)；SW-CJ-2F洁净工作台(苏州净化)；R-210/215旋转蒸发仪(瑞士Buchi)；AX204电子天平(瑞士梅特勒)；BX51荧光显微镜(日本 OLYMPUS)；YQX-II型厌氧培养箱(上海予腾)。

1.5 方法

1.5.1 动物分组与给药 BALB/c小鼠48只，随机分为对照组、七才汤低、中、高剂量组，每组12只。按七才汤成人日服剂量0.15 g/kg的10倍剂量设定中剂量组(1.5 g/kg)、低剂量组(0.75 g/kg)、高剂量组(3.0 g/kg)。实验组以相应剂量的七才汤灌胃，对照组灌胃给予等量蒸馏水，灌胃量0.2 mL/10 g体重，每日1次，连续14 d。最后一次灌胃后24 h测定肠道菌群的变化。

1.5.2 观察动物形态及体重 每天观察和记录各组小鼠外形、活动、饮食、排便情况，于实验第1 d、第7 d、第14 d记录小鼠体重。

1.5.3 肠道菌群检测 小鼠在给药前及末次给药后24 h，分别用无菌棉签挑取新鲜粪便0.1 g，置于干燥灭菌小试管中，立即加入1.0 mL无菌水，置于振荡器上充分振荡5 min制成均匀悬液。……