自身抗体检测在慢性肝病诊断中的意义

曾东良，莫宝妹，姜焕好，李艳红

(深圳市宝安区人民医院，广东 深圳 518101)

自身免疫性肝病是一组由于自身抗体存在而引起的肝组织持续损伤为特征，而非病毒性感染的一类肝脏疾病，主要包括自身免疫性肝炎(AIH)、原发性胆汁性肝硬化(PBC)和免疫性胆管炎(PSC)，近年来随着对此类疾病的深入研究，自身免疫性肝病的发病率有逐年增加的趋势[1-2]。我国是一个慢性肝病的高发区，以病毒性肝炎特别是乙型和丙型肝炎为主，通过对一些长期的慢性肝病患者进行自身抗体的检测，探讨自身免疫性肝病和病毒性肝病之间自身抗体的相关性。

1 资料与方法

1.1 实验对象 选取2003-2010年间在我院就诊的患者，其中诊断为自身免疫性肝病的患者32例，包括：AIH患者11例，男2例，女9例，平均32岁；PBC患者17例，男6例，女11例，平均53岁；PSC患者4例，男3例，女1例，平均38岁。慢性病毒性肝炎214例，包括：慢性乙型肝炎(CHB)患者131例，男78例，女53例，平均38岁；慢性丙型肝炎(CHC)患者83例，男59例，女24例，平均44岁。自身免疫性肝病诊断参照国际组织自身免疫性肝病小组修订的评分标准[3]；病毒性肝炎诊断标准参照2004年和2005年制定的丙型和乙型病毒性肝炎防治指南中诊断标准[4-5]。

1.2 方法

1.2.1 ANA测定 采用酶联免疫吸附试验，试剂由深圳亚辉龙生物科技有限公司提供，受检者空腹12 h，不饮酒24 h后采集血样，按说明书操作。酶标仪选择双波长450/630 nm，测定吸光度的灵敏度达到0.001ABS以上。

1.2.2 自身抗体检测 自身免疫性抗体线粒体抗体(AMA-M2)、抗肝肾微粒体(LKM-1)、抗可溶性酸性核蛋白抗体(Sp-100)、抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)、抗肝细胞浆Ⅰ型抗原抗体(LC-1)和抗可溶性肝抗原抗体(SCA)测定采用免疫印迹法，试剂由深圳亚辉龙生物科技有限公司提供，受检者需空腹12 h，不饮酒24 h采集血样，使用EDTA-Na2抗凝剂分离血浆，按说明书操作。

1.2.3 统计学处理 资料以例数和百分率描述，应用χ2检验，采用SPSS10.0软件进行统计学分析。

2 结果

214例病毒性肝病患者中ANA检出率为14.4%，其中CHB患者ANA阳性率为13.7%，1例同时检出ANA、LKM-1和LC-1阳性，两例检出ANA和AMA-M2阳性；CHC患者ANA阳性率为15.7%，其中6例检出LKM-1阳性。32例自身免疫性肝病患者的ANA阳性率为81.6%，AIH、PBC和PSC的ANA阳性率分别为81.8%、88.2%、75.0%，与病毒性肝病患者的ANA比较差异有统计学意义(P＜0.01)。AIH的LKM-1、LC-1、SLA 和 PBC 的 AMA-M2、Sp-100、gp210的阳性率明显高于病毒性肝炎患者，差异有统计学意义(P＜0.01)。AIH 患者中，1例 AMA-M2和SLA阳性，1例AMA-M2、LKM-1和LC-1阳性；PBC患者中，有1例同时检出AMA-M2、Sp100、gp210和SLA，见表1。

表1 各种肝病患者血清自身抗体阳性率[例(%)]

3 讨论

自身免疫性肝病是机体自身免疫反应过度造成肝组织损伤，出现肝功能异常及相应症状体征的一组慢性肝脏疾病，包括由肝细胞受累的AIH和主要因肝内、肝外胆管细胞受累的PBC和PSC，三种疾病的特点是在肝脏出现病理性免疫损伤的同时，血液中伴有特征性与肝脏相关的自身抗体，因此，检测自身抗体成为自身免疫性肝病诊断和鉴别诊断的重要手段。病毒性肝炎由多种不同肝炎病毒引起的，主要通过机体对病毒的免疫应答而导致肝细胞损害的一组疾病，病理持续半年以上者转化为慢性病毒性肝炎，主要以乙型肝炎和丙型肝炎为多见。在本文中，自身免疫性肝病ANA总阳性(81.6%)明显高于病毒性肝病(14.4%)，差异有统计学意义(P＜0.01)，自身免疫性肝病中AIH、PBC和PSC的ANA检出率也明显高于病毒性肝病CHB和CHC的检出率，两组间差异有统计学意义(P＜0.01)，身免疫性肝病的AIH的LKM-1、LC-1、SLA和PBC的AMA-M2、Sp-100、gp210自的检出率也明显高于病毒性肝病，与陈作芬等[6]的报道一致。在具有自身免疫性肝病特异性自身抗体AMA-M2、抗SLA、抗LKM-1和LC-1的检出中，慢性乙肝患者中有2例ANA和AMA-M2阳性，1例ANA、LKM-1和LC-1阳性，经过肝穿刺活检检查和其他生化指标检验，2例ANA和AMA-M2阳性者诊断为PBC，1例ANA、LKM-1和LC-1阳性者诊断为AIH，3例患者给予激素等免疫抑制剂治疗，病程都有不同程度好转。在83例CHC患者中，有6例检出LKM-1阳性，HCV患者血清中存在自身抗体，能引起自身免疫紊乱[7]，提示LKM-1抗体和HCV存在交叉免疫现象，对指导临床治疗非常重要。在4例PSC患者中，3例ANA阳性，其他抗体阴性，抗体阳性率低可能与病例少有关。

研究显示AIH患者同时检出AMA-M2和SLA阳性的1例，AMA-M2、LKM-1和LC-1同时阳性的1例，PBC患者1例同时检出AMA-M2、Sp-100、gp210和SLA，而AMA-M2对PBC的诊断具有特异性，M2抗原的表达在肝脏的胆管上皮，而在肝细胞不表达，对PBC诊断特异性非常高；LKM-1是Ⅱ型AIH的血清学指标，而LC-1是Ⅱ型AIH的特异性抗体，Sp-100和gp210是PBC的高度特异性抗体，SLA是Ⅲ型AIH的标志性抗体，这多种标志物的同时出现，表现自身抗体在自身免疫性肝病间的存在并非完全独立，关于自身免疫性肝病重叠综合征，有学者报道[8]，有些病例确实同时具备两种疾病的临床或生物化学和免疫学指标，并有组织学支持，证明存在重叠综合征。

对一些长期肝功能异常患者，其中一部分可能是自身免疫性肝病，目前认为自身免疫性肝病与潜在的激发因素导致天然免疫耐受性被打破，发生对自身抗原的免疫应答及异常自身反应造成免疫系统攻击相应的靶细胞，引起肝脏损伤、炎症反应、靶细胞凋亡和坏死，以及遗传易感性有关，有研究认为，激发因素可能来源于病毒[9]，由于病毒表位与某些肝抗原有交叉反应，说明两者在分子上有相似性，其中最令人关注的是病毒性肝炎。自身抗体检测在自身免疫性肝病中具有重要意义，对一些长期肝功能异常患者，有必要进行自身免疫抗体的检测，以便尽早诊断和治疗。

[1]姚光弼.关注我国自身免疫性肝炎的诊断和治疗[J].中华肝脏病杂志,2005,13(1)：1-2.

[2]柯比努尔,张跃新.自身免疫性肝病的自身抗体的研究进展及临床意义[J].临床肝脏病杂志,2008,24(6)：463-465.

[3]Czaja AJ,Frccsc DK.American association for the study of liver disease.Diagnosis ang treatment of autoimmune hepatitis[J].Hepatology,2002,36：479-497.

[4]中华医学会肝病学分会,中华医学会传染病与寄生虫病学分会.丙型肝炎防治指南[J].中华肝脏病杂志,2004,12(4)：7.

[5]中华医学会肝病学分会,感染病学分会.慢性乙型肝炎防治指南[J].2005,13(7)：881.

[6]陈作芬,万荣珍.不同慢性肝病患者自身抗体的表达差异分析[J].重庆医学,2009,38(19)：2421-2422.

[7]王 蓉,耿秀蓉,覃 沙,等.自身抗体在丙型肝炎和身免疫性肝炎中的特点分析[J].四川医学,2011,32(2)：253-256.

[8]Onji M,Fumkana S.Significance of study on prevalence of AMA in healthy subjects[J].Castroenterod,2004,39：306.

[9]Krawitt EL.Autoimmune hepatitis[J].N Euge J Med,2006,354：54-66.