p53 基因和FHIT 基因联合检测在肺癌早期诊断中的意义

王盛超，王红岩，阎慧娟，马 芸

肺癌是威胁人类健康最主要的恶性肿瘤，绝大多数患者出现症状就诊时已属晚期，预后很差，改善肺癌预后的关键在于早期诊断。近几年来随着光学技术、计算机技术、分子生物学技术的迅猛发展，AFB 检查及基因检测应用于肺癌的早期诊断从理论上已成为可能。p53 基因和脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad，FHIT)基因是两种常见的抑癌基因，且目前未发现两者在调控细胞功能上无相关性。本研究对317 例利用自荧光支气管镜活检的各类标本进行p53 基因和FHIT 基因检测，拟为肺癌的早期诊断提供依据。

1 材料与方法

1.1 临床资料 收集2009 年2 月～2010 年12 月在河南省人民医院气管镜室进行自荧光支气管镜检查的患者和体检者的活检标本，入组条件为所有标本常规组织病理学检查结果明确，新鲜标本基因组DNA 及RNA 抽提可靠，检查前均未行分子靶向治疗、化疗及放疗。完全符合入组条件的患者共317例，男261 例，女56 例，年龄((53.7 ±9.5)岁。支气管正常黏膜27 例、非典型增生74 例、原位癌23 例、浸润癌161 例(其中鳞癌94 例、小细胞癌54 例、腺癌13 例)、良性病变32 例。

1.2 新鲜标本获取及保存方法 采用日本OLYMPUS EVIS LUCERA BF－260 自荧光支气管镜(AFB)，按支气管镜检查常规先后在白光成像模式(WLI)和自体荧光成像模式(AFI)检查并照相记录，对可疑病变区进行活检及刷检。取活检组织10 ～15 mg 立即经－196℃液氮速冻15 min 后置0℃冰柜存放。其余组织标本及刷检标本分别送组织病理学检查及细胞学检查。

1.3 p53 基因检测 取约5 mg 组织标本，应用上海莱枫生物科技有限公司生产的动物组织基因组DNA小量提取试剂盒提取基因组DNA。……