交联可调式抗结核药物缓释型纳米人工骨复合体的生物安全性研究

席焱海，薛敏涛，叶晓健，何海龙

目前临床上对于结核病灶清除术后的骨组织缺损理想的治疗策略就是设计具有促进骨缺损组织修复作用并且同时可以长效缓释抗结核药物的人工骨填充缓释材料，这样就可以在促进骨组织再生修复骨缺损的同时维持局部有效的抗结核药物浓度，有助于骨移植物周围骨组织再生的同时抑制局部结核杆菌的繁殖，从而避免局部结核病灶的复发，促进患者的康复［1］。本研究将磷酸三钙生物陶瓷(tricalcium phosphate bioceramics，TPB) 人工骨支架与一定浓度的海藻酸钠(sodium alginate ，SA) 、氯化钙水溶液、抗结核药利福平(rifampicine，RFP) 相混合，利用SA 在钙离子作用下的自组装特性制备成TPB/SA-RFP 抗结核药物微球复合体，并将此复合体分别用聚乳酸(poly lactic acid，PLA) 、PLA 与羟基乙酸共聚物［poly (lactic-co-glycolic acid) ，PLGA］或聚乙内酯［poly (ε-caprolactone) ，PCL］进行表面涂层化处理，从而最终制备出交联可调式抗结核药物缓释型纳米人工骨 TPB/SA-RFP/PLA(PLGA、PCL) 复合体。在对其骨修复活性进行测试之前，分别进行了复MTT 细胞毒性实验、急性全身毒性实验、皮内刺激实验及致敏实验，并与对照组比较，对其生物安全性进行初步测试，以证实其安全可靠。

1 材料与方法

1.1 实验材料

TPB/SA-RFP/PLA(PLGA、PCL) 复合体制备：称取质量百分比浓度为1 mg/mL 的SA 10 g，浓度为0.2%的RFP 5 g，氯化钙10 g，TPB 50 mg(10 mm×5 mm×5 mm) 加入到500 mL PBS(pH 7.4) 溶液中混合静止，48 h 后将该混合物取出晾干，然后加入到500 mL 浓度为5 mg/mL 的氯化钙水溶液中1 min，即可制得TPB/SA-RFP 抗结核药物微球复合体。然后将TPB/SA-RFP 抗结核药物微球复合体和质量百分比浓度为5%的PLA、PLGA 或PCL 浸入500 mL的氯仿溶液中2 h，最后将其取出烘干，挥发除去溶剂，即可得到实验材料。……