miRNA181a在肝细胞癌中的表达及其临床意义

夏永欣，张金平

1.南阳市中心医院消化内科二病区，河南南阳473009;2.郑州大学第一附属医院消化内科

在世界范围内，肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)的发病率位于肿瘤发病率第5位，其死亡率在消化系统恶性肿瘤中占第3位［1-3］。HCC死亡率已占我国恶性肝病死因的第2位，在农村中则为第1位。miRNA是近年来发现于真核细胞中的一类内源性非编码小分子RNA，长约21～22个核苷酸，可通过与靶mRNA的3'UTRs(untranslated regions)或5'UTRs近乎完全互补结合在转录后水平使其降解，或者与之不完全互补结合在翻译水平抑制蛋白合成，从而在基因表达中发挥重要的调节作用［4-5］。

我们新近研究发现恶性程度较低的Hep3B细胞与侵袭力更强的HepG2细胞相比较:miRNA181a表达明显上调。本研究检测肝细胞癌、癌旁组织和正常肝组织中miRNA181a的表达水平，探索分析miRNA181a表达异常与肝细胞癌病理学特征如肿瘤大小、肿瘤分化程度、临床分期、是否合并肝硬化、血AFP浓度等的关系。

1 材料与方法

1.1 临床资料 收集南阳市中心医院及郑州大学第一附属医院普外科2010年5月－2011年5月手术切除HCC标本30例，癌旁组织取自距离癌组织2 cm的肝脏组织，所有病例均经病理证实。其中男22例、女8例，平均年龄(50±10.60)岁。术中、术前均未经放、化疗及免疫治疗。另取来源于肝血管瘤患者的正常肝组织10例作为对照。

1.2 方法

1.2.1 总RNA的提取及质量检测:按照TRIzol®试剂(Invitrogen life technologies)说明书的步骤，逐步提取出组织标本中的总RNA。应用紫外分光光度计测定总RNA的吸光度A260值和A280值，用A260值计算其浓度，并计算A260/A280值检测其纯度。

1.2.2 实时定量PCR检测目的miRNA表达量:取……