破血化瘀、填精补髓法对脑出血大鼠血肿周围组织神经生长因子表达的影响

任吉祥 任洪亮 林 雪 赵建军

(长春中医药大学，吉林 长春 130021)

挽救出血灶血肿周围组织内的神经元是脑出血治疗的关键。神经生长因子(NGF)与神经元的再生和分化密切相关，在中枢神经系统修复中具有促进神经元存活和诱导神经突起生长的作用。本研究观察破血化瘀，填精补髓法中药汤剂对实验性脑出血大鼠神经系统体征及神经功能缺损评分的影响，同时检测血肿周围组织NGF蛋白表达变化，探索破血化瘀、填精补髓法对实验性脑出血大鼠血肿周围组织损伤修复的机制。

1 材料与方法

1.1 材料 清洁级Wistar大鼠，雌雄各半，体重250～300 g，由吉林大学药学院提供，大鼠许可证号:SCXK-(吉)2007-0003。破血化瘀，填精补髓法实验方剂:水蛭8 g、生大黄10 g、生蒲黄15 g、虻虫5 g、瓜蒌20 g、三七10 g、石菖蒲15 g、龟板胶10 g，采用传统煎药方法，去渣后取药液进行浓缩，使1 ml药液中含生药1 g，4℃保存备用。醒脑健神胶囊(批号:921116，吉林省中医院制剂室)。脑源性神经营养因子(BDNF)及酪氨酸激酶受体(TrkB)免疫组化试剂盒采用中杉金桥通用型二步法检测试剂盒(Pv6000)。大鼠脑立体定位仪(美国STOELTING公司);手持式牙科钻(上海齿科器械厂);光学显微镜(日本OLYMPUS公司);BMJ-1型生物组织包埋机(天津航空机电有限公司);RM2235型组织切片机(德国LEICA公司)。

1.2 方法

1.2.1 分组 150只Wistar大鼠随机分成7组:正常对照组6只;假手术组，模型组，受试药高、中、低剂量组，阳性药对照组，每组24只，除正常对照组外，其余6组又分为1、3、7、14 d四个时间点，每个时间点6只。

1.2.2 模型制备 参照文献〔1〕制造实验性脑出血模型。实验动物用10%水合氯醛(350 mg/kg体重)腹腔麻醉，于大鼠腹侧尾根部1.5 cm处纵行切开，游离尾动脉，微量进样器抽取非肝素化尾动脉血50μl。……