五味子药材中苹果酸、柠檬酸的测定方法研究

张 韵， 傅 颖， 吴霞红

（1.上海市中药质量监督检验室，上海 200336；2.上海体育科学研究所，上海 200030）

五味子是木兰科植物五味子Schisandra chinensis的干燥成熟果实，其功效收敛固涩、益气生津、补肾宁心［1］，兼有药用与营养作用两种属性。近年来，对五味子的研究表明，其具有增强免疫、提高抗氧化机能以及改善肠道菌群等作用［2-3］。五味子中有机酸含有量的高低代表着药材的成熟度，与五味子的有机酸如苹果酸、柠檬酸具有一定的关联，本实验以研究有机酸为目的，开发新产品，为保证产品质量，把好原药材质量关，有必要建立五味子中苹果酸、柠檬酸的高效液相检测方法。

1 仪器、试药与样品

1.1 仪器 Agilent 1100高效液相色谱仪；G1322A自动进样器；G1316A柱温箱；DAD G1315B检测器；超声波清洗机SK7200LH，功率350 W，59 kHZ，上海科导超声仪有限公司。

1.2 试药、试剂 柠檬酸对照品(中国药品生物制品检定所，批号111679-200401，供定量测定用)；L-苹果酸对照品SIGMA公司，批号 01011AE，供定量测定用)；甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。五味子药材产自辽宁，6个批次(批号见样品检验结果)均按照2010版中国人民共和国药典一部检验结果符合规定。

2 色谱条件

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以0.1%磷酸水溶液为流动相B，按2010年版中国药典一部梯度洗脱方法(按表1进行梯度洗脱)，检测波长为209 nm；柱温15℃；进样量10 μL；色谱柱理论塔板数按苹果酸、柠檬酸色谱峰计算应不低于3000。

表1 苹果酸、柠檬酸梯度洗脱顺序

3 方法与结果

3.1 对照品溶液的制备

苹果酸对照品溶液的制备 精密称取苹果酸对照品11.62 mg，置25 mL量瓶中，加0.1%磷酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。……