白莲参胶囊质量标准研究

曲 墨,柳 艺,隋殿军

(长春中医药大学,长春130117)

肺癌发生于支气管黏膜上皮,亦称支气管癌。目前,治疗肺癌的主要方法有手术治疗、放射治疗、化学治疗、介入治疗、生物治疗、冷冻治疗、电化学治疗、热疗及中医药治疗等[1]。中医药治疗肺癌有病灶稳定率高、生存期长、抗复发转移等优势。白莲参胶囊由白花蛇舌草、半枝莲、参灵菌质3味药组成的,具有清热解毒,固本益气的功效[2-3]。本品组方独特,配伍新颖,治则明确[4]。处方以清热解毒药为君,以理气化瘀药为臣,从根本上达到治疗非小细胞肺癌的目的[5]。笔者以高效液相色谱法建立白莲参胶囊的质量控制方法,控制产品质量,保证临床疗效。

1 设备与材料

1.1 实验设备 安捷伦1200液相色谱仪,安捷伦ZORBAX SB 色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μ m),TP-150超声波清洗机,BP211D电子分析天平。

1.2 实验材料 野黄芩苷由中国药品生物制品检定所提供,甲醇为色谱纯(美国Fisher公司),水为超纯水,其他试剂均为分析纯。

2 处方与制备

白莲参胶囊由白花蛇舌草、半枝莲和参灵菌质组成。处方中只有半枝莲被《中国药典》2010年版一部收载,所以选择半枝莲中野黄芩苷的含量为质量控制的指标。白花蛇舌草加10倍量水煎煮2次,1 h/次,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对质量浓度1.08～1.10(40～45℃)的清膏,以8 000 r/min离心20 min后,上清液浓缩,干燥,粉碎成细粉;半枝莲加10倍量水煎煮3次,1.5 h/次,合并煎液,滤过,滤液用陶瓷膜(50 nm)过滤,渗透液浓缩,干燥,粉碎成细粉;参灵菌质粉成细粉与上述粉末混匀,制粒,装入胶囊,制成1 000粒 ,即得 。

2.1 系统适应性试验 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-0.2%磷酸溶液(33∶67)为流动相;检测波长为335 nm;柱温为30℃;流速为 1.0 mL/min;进样量为10 μ L;理论板数按野黄芩苷峰计算应不低于1 500。

2.2 药液制备

2.2.1 对照品溶液的制备 取野黄芩苷对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 mL 含40 μ g的溶液,即得。

2.2.2 供试品溶液的制备 取本品内容物3 g,研细,精密称定,加甲醇90 mL,置于100 mL量瓶中,超声处理(功率 250 W,频率25 kHz)30 min,放冷,加甲醇稀释至刻度,摇匀,精密量取25 mL,蒸干,残渣用20%甲醇溶解,并转移至10 mL量瓶中,稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

2.2.3 阴性对照品溶液的制备 将缺少半枝莲的阴性样品制成阴性对照品溶液。结果显示,在野黄芩苷相同保留时间处无任何色谱峰,表明阴性对照无干扰。

2.3 方法学考察

2.3.1 标准曲线的制备 以野黄芩苷为对照品,以野黄芩苷进样量为横坐标,峰面积值为纵坐标,绘制标准曲线,Y=224.84X+21.61,r=0.999 9,结果表明,野黄芩苷进样量在 0.0808～ 0.404 μ g范围内,进样量与峰面积呈良好的线性关系。

2.3.2 精密度考察 取野黄芩苷对照品溶液,重复进样6次,并计算峰面积RSD值,RSD=0.153 9%(n=6),符合要求。

2.3.3 稳定性的考察 取野黄芩苷对照品溶液和白莲参胶囊供试品溶液,依法测定,结果表明,2者在24 h内稳定性良好。

2.3.4 重现性的考察 取样品6份,精密称定,制成供试品溶液,依法测定,计算野黄芩苷含量,RSD=0.38%(n=6),符合要求。

2.3.5 加样回收率试验 取样品6份,精密称定,分别精密加入等量的野黄芩苷对照品,依法测定,计算回收率,结果表明,平均回收率为97.64%,RSD=0.79%(n=6),符合要求。

2.4 样品含量测定 测定3批样品中野黄芩苷的含量,平均含量为0.194 3 mg/g,将平均含量下浮20%作为制剂的含量测定限度,即每粒含半枝莲以野黄芩苷(C21H18O12)计 ,不得少于 78 μ g 。

3 结语

白莲参胶囊为中药六类新药,现代药理学研究表明,处方中白花蛇舌草和参灵菌质具有抗肿瘤和增强机体免疫力的作用,半枝莲的水提取物有明显的抗肺癌活性,本产品用于肺癌的辅助治疗,本试验对其质量标准进行了研究。实验用高效液相色谱法对君药半枝莲中的主要成分野黄芩苷含量进行了测定。测定结果表明,该方法操作较为简单,色谱峰分离度好,精密度与回收率符合要求,重现性好,便于对白莲参胶囊的质量进行控制。试验测定的三批样品系不同批次药材制成,测量结果比较稳定,建立的质量标准为本制剂提供含量测定的依据。规定本品含半枝莲以野黄芩苷(C21H18O12)计,每粒不得少于78 μ g。

[1]尤杰.刘嘉湘教授辨治肺癌经验[J].长春中医药大学学报,2011,27(2):185-186.

[2]张秀娟,杨姗姗.半枝莲化学成分及提取物抗肿瘤作用的研究现状[J].亚太传统医药,2008,4(8):75-77.

[3]席荣英,李聪辉,王翠红.半枝莲微量元素含量测定[J].微量元素与健康研究,2002(2):37-38.

[4]YinX,ZhouJ;JieC.Anticancer activity and mechanism of Scutellaria barbata extract on human lung cancer cell line A549[J].Life Sci,2004,75(18):2233-2244.

[5]肖海涛,李铣.半枝莲化学成分和药理活性研究进展[J].中药研究与信息,2005,7(4):21-25.