β-呋喃果糖苷酶在离子液体中的酶学特性研究

■马歌丽 韩甜甜 李全喜 魏 涛 毛多斌

(郑州轻工业学院食品与生物工程学院，河南郑州450001）

β-呋喃果糖苷酶(β-fructofuranosidase，EC3.2.1.26)是一种重要的工具酶，主要用于催化合成功能性低聚糖和糖苷类化合物。国内外有关β-呋喃果糖苷酶的催化反应研究多在水介质中进行。近年来，离子液体作为一种新型溶剂已成为酶催化反应的重要介质，不仅具有不易挥发、对环境友好、可设计等优点，而且其独特的结构还可以增加酶的稳定性[1-2]。离子液体是由有机阳离子和无机或有机阴离子构成的、在100℃以下呈液体状态的盐类。用于酶催化反应的离子液体通常由烷基取代的咪唑阳离子([R1R3IM]+)与非配位性的四氟硼酸根()、六氟磷酸根()、三氟甲磺酸根()等阴离子组成。在离子液体的酶催化反应研究中，文献报道较多的是脂肪酶、蛋白酶和氧化还原酶，而糖苷酶在离子液体中的催化反应报道很少[3-4]，所以将β-呋喃果糖苷酶引入到离子液体介质中进行研究具有重要意义。

主要通过探索离子液体的种类和浓度、反应温度、pH值、底物浓度对酶活性的影响，研究了黑曲霉YA03产β-呋喃果糖苷酶在离子液体中的酶学特性，以期得到离子液体中β-呋喃果糖苷酶的最佳作用条件，了解酶在离子液体中的反应动力学参数，为离子液体中酶催化反应提供指导。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌种

黑曲霉YA03，郑州轻工业学院生物工程实验室诱变选育。

1.1.2 主要试剂

蔗糖，分析纯，广东省化学试剂工程技术研究开发中心；葡萄糖，分析纯，BioBasic公司；……