枸杞多糖对脑缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用

王昕，陈莉芬，谭昌洪，谢代鑫（1.重庆医科大学附属第二医院，重庆 400010；.重庆市第六人民医院，重庆 400060；.重庆市第三人民医院，重庆 400014）

脑缺血再灌注损伤可造成神经元的坏死与凋亡，是脑梗死后遗症产生的主要因素之一，而神经元凋亡会引发机体产生系列病理生理反应，因此减轻神经元凋亡对保护脑功能具有重要意义[1]。半胱氨酸蛋白酶（Caspase）家族与凋亡关系密切，Caspase-12前体位于细胞内质网中，是细胞凋亡的内质网相关性死亡途径[2]。枸杞多糖（Lycium barbarum polysaccharides）是从宁夏特色植物枸杞（Lycium bararum）中分离出的主要多糖之一。现代药理学研究证实，枸杞多糖有多种药理学作用，如抗衰老、抗肿瘤、促免疫等[3-4]，但对脑卒中保护还未见文献报道。本研究拟通过大鼠脑缺血再灌注损伤模型，观察枸杞多糖是否对其具有保护作用，为临床脑缺血、脑卒中的治疗提供理论依据。

1 材料

1.1 仪器

Mini-PROTEAN3型垂直板式电泳仪（美国Bio-Rad公司）；电子天平（上海精科实业有限公司）；HMIAS-2000型高清晰度彩色病理图文分析系统（武汉同济医科大学）。

1.2 药品与试剂

枸杞多糖（上海源叶生物科技有限公司，批号:91087，纯度:＞98%）；兔抗Caspase-12抗体（美国Santa Cruz公司）；辣根过氧化物（HRP）羊抗兔IgG（瑞典Amersham公司）；逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）试剂盒（大连宝生物技术有限公司）。

1.3 动物

SPF级SD大鼠84只，♀♂兼半，体质量220～240 g，由重庆医科大学实验动物中心提供[实验动物使用许可证号:SCXK（渝）2011-0002]。

2 方法

2.1 模型的复制

参照改良的Longa法[5]，采用线栓法复制大鼠脑缺血再灌注损伤模型。ip 10%水合氯醛（350mg/kg）麻醉大鼠，将其仰卧固定，于颈部皮肤……