槲皮素对大鼠胸主动脉不同节段的差异性舒张作用研究

侯晓敏，秦小江

槲皮素（Quercetin）是大量饮食黄酮中的一类，每日饮食中黄酮的摄入量大约为23mg，其中槲皮素大概占到60%［1］。槲皮素具有扩张血管、降低血压、保护心肌损伤等作用，但关于槲皮素对不同节段胸主动脉的舒张差异还未见报道。探讨槲皮素对离体大鼠胸主动脉不同节段（远心段、中段和近心段）的差异性舒张作用，并进一步研究其与血管内皮的关系。

1 材料与方法

1.1 实验材料 雄性SD 大鼠24只，体重220g～260g，由山西医科大学实验动物中心提供。槲皮素，苯肾上腺素（PE），乙酰胆碱（Ach），均购自美国Sigma公司。其余试剂均为国产分析纯。Powerlab生物信号采集分析系统和张力换能器为澳大利亚埃德仪器国际贸易有限公司产品。血管平滑肌浴管实验系统为本课题组自制。HSS－1B数字式超级恒温水浴泵为成都仪器厂产品。

1.2 实验方法

1.2.1 不同种属动物胸主动脉血管环制备 断头处死大鼠，立刻取其胸主动脉，置于4℃100%O2饱和的PSS液中。血管环的制备、张力的记录及血管反应性的检测方法同文献［2］。

1.2.2 槲皮素对苯肾上腺素预收缩胸主动脉血管环的舒张作用 把大鼠胸主动脉环按离开心脏的远近分为远心段、中段和近心段三组，每组再分为内皮完整组和去内皮组。先用60 mmol／L KCl检验血管环的活性，收缩张力大于2g的用于实验。反复三次高钾刺激血管，这时血管的收缩活性良好，然后用PE（浴槽终浓度10－5mol／L）预收缩胸主动脉血管环达坪台后，依次加入不同浓度的槲皮素（浴槽终浓度为10－6～10－4mol／L）对血管环进行舒张，以PE 收缩的最大幅度为100%，计算槲皮素的舒张百分数。比较不同节段胸主动脉对槲皮素的差异性反应，以及内皮的存在于否是否影响槲皮素对胸主动脉的舒张效果。

2 结 果

2.1 对KCl（60 mmol／L）预收缩内皮完整组不同节段胸主动脉血管环的舒张效果比较（见表1）

表1 KCl（60mmol／L）预收缩大鼠不同节段胸主动脉

表1 KCl（60mmol／L）预收缩大鼠不同节段胸主动脉

与近心段比较，1）P＜0.05；2）P＜0.01

节段 最大舒张（%） EC50（μM）近心段82.30±6.30 28.65中段 74.30±5.10 41.33远心段 54.87±5.201）2） 81.76

2.2 槲皮素对PE（10－5mmol／L）预收缩不同节段胸主动脉血管环的舒张效果比较（见表2）

表2 PE（10－5 mmol／L）预收缩大鼠不同节段胸主动脉

表2 PE（10－5 mmol／L）预收缩大鼠不同节段胸主动脉

与近心段比较，1）P＜0.05；2）P＜0.01

组别 最大舒张（%） EC50（μM）近心段 68.20±3.7043.47中段 55.03±4.201） 70.94远心段 50.40±2.602） 96.64

2.3 槲皮素对同一节段PE 预收缩有内皮和无内皮胸主动脉血管环的舒张效果比较（见表3）

表3 槲皮素对同一节段PE预收缩有内皮和无内皮胸主动脉血管环的舒张效果比较

表3 槲皮素对同一节段PE预收缩有内皮和无内皮胸主动脉血管环的舒张效果比较

与内皮完整组比较，P＞0.05

组别 近心段 中段 远心段内皮完整组68.2±3.7 55.3±4.2 50.4±2.6去内皮组 67.1±2.3 53.4±4.5 48.2±4.2

3 讨 论

人类每日黄酮摄入量大约为23mg，而这其中槲皮素就占了将近60%［1］。槲皮素有很广泛的药理学作用，如抗炎，抗氧化，抗血小板聚集，心脏保护，舒张血管等作用。槲皮素可以通过抑制外钙内流进而舒张血管［3］。本文从离体大鼠胸主动脉的不同节段，以及同一节段内皮存在与否进行研究，观察槲皮素对不同节段胸主动脉的舒张效果，以及其舒张效果是否受内皮的影响。体外血管环实验作为筛选心血管活性化合物及研究心血管活性物质的作用机制常用的基础实验被广泛应用，但同时由于不同种属动物不同部位的血管作用仍存在差异，并且操作规范因人而异，从而相同化合物可能得到不同结果。本文着重研究了体外血管环实验中容易被忽略的因素，即近心段、中段与远心段的血管环活性差异。

在实验中使用了内皮完整和去除内皮的血管环，虽然槲皮素对二者都存在舒张作用，但二者的舒张强度无统计学意义。在内皮完整的血管环上，使用一氧化氮合酶阻断剂L－NAME预处理后，槲皮素对血管环的舒张强度没有发生明显变化。血管内皮细胞通过一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）催化L－精氨酸与氧结合后释放NO。NO 通过激活鸟苷酸环化酶，使cGMP含量升高，细胞内钙水平降低，促使肌球蛋白轻链脱磷酸化，平滑肌松弛，血管舒张［4］。

本实验结果表明，槲皮素对近心段胸主动脉的舒张作用最强，槲皮素对胸主动脉的作用靶点更接近心脏，离心脏越近的胸主动脉，其靶点存在越多。大鼠胸主动脉去内皮后，槲皮素的舒张血管作用没有发生明显的变化，表明槲皮素的舒张血管效应与内皮无关，进而可以推出，其舒血管效果与NO 无关。在体外血管环试验中，样本的选择会造成结果不同。槲皮素对不同节段胸主动脉的舒张效果不同，且其舒张作用与内皮和NO 无关，这一机制的发现对槲皮素在心血管系统的药理作用的进一步开发有很重要的指导意义。

［1］ Hertog MG，Feskens EJ，Kromhout D，et al.Dietary antioxidant flavonoids and risk of coronary heart disease：The Zutphen Elderly Study［J］.Lancet，1993.342（8878）：1007－1011.

［2］ Xue W，Zhang M，Li J，et al.Effects of taurine on aortic rings isolated from fructose－fed insulin resistance and normal rat aortic rings are different［J］.Cardiovasc Drug Ther，2008，22：461－468.

［3］ Morales MA，Lozoya X.Calcium－antagonist effects of quercetin on aortic smooth muscle［J］.Planta Med，1994，60（4）：313－317.

［4］ Tanaka YK，Koike L，Toro MK.Channel roles in blood vessel relaxations induced by endothelium－derived relaxing factors and their molecular mechanisms［J］.J Smooth Muscle Research，2004，40（4，5）：125－153.