痰湿体质高血压病患者瘦素RS1137101基因与心血管功能的相关研究1）

钱岳晟，王 彦，杨 龑，高平进，朱鼎良

高血压病是一种多基因遗传性疾病，以心血管的易损性生物标志结合相关基因的多态性进行分型寻找遗传特征是当前的研究热点。中医的体质分类综合先天和后天因素为遗传学研究提供了一条很好的途径。以高血压病为切入点，用中医学的体质论，研究痰湿质的病理生理特征已经有较多的报道。有研究从人体的糖、脂代谢，胰岛素抵抗、脂联素水平以及心脏血管结构功能方面研究，发现一些与其相关的遗传标记［1－3］。本研究以瘦素受体基因（leptin receptors，Lepr）RS1137101基因的多态性探讨心脏血管的结构功能与瘦素受体基因之间的关系，寻找在遗传方面的生物标志。

1 资料与方法

1.1 标准

1.1.1 诊断标准 高血压诊断标准为病史中有不同日3次以上偶测收缩压和（或）舒张压≥140／90mmHg（1mmHg＝0.133 kPa）［4］。参照王琦等制定的中医痰湿体质的判定［5］和匡调元的体质分类［6］，根据高血压的特点痰湿体质判断标准：体形肥胖，中脘痞满，口甜黏，身重如裹，大便不实，口干不饮，胸满昏眩，脉濡或滑，舌苔腻。不符合此标准的为非痰湿体质患者，作为对照组。

1.1.2 纳入标准 2001年—2004年在瑞金医院高血压科住院的上海籍原发性高血压患者，年龄18岁～80岁，性别不限，并签署知情同意书。

1.1.3 排除标准 经询问病史、体格检查和实验室检查排除继发性高血压和糖尿病。

1.2 方法

1.2.1 一般检查及生化检测 受试者在停用对糖代谢可能影响的降压药（β－受体阻滞剂、噻嗪类利尿剂）2周后，由专人测量坐位血压，每次测压3遍，取3遍读数的均值作为血压值；测量身高、体重，以体重／身高获得体重指数（BMI）。

1.2.2 左室肥厚和颈动脉内膜检测 采用荷兰飞利浦公司生产的IE33 彩色多普勒超声诊断仪。探头频率（3～11）MHz。取胸骨旁左室长轴切面，应用M 型超声及二维超声技术，测量舒张末期室间隔厚度（IVST）、左室后壁厚度（PWT）及左室腔内径（LVEDD），根据Devereux公式计算左室重量（LVM）及左室重量指数（LVMI）。分别检测双侧颈总动脉、颈内动脉及颈外动脉，测量各血管内径及颈总动脉内膜－中膜厚度（IMT），左右各测量3次，取平均值。IMT 的检测方法是选取颈总动脉距离分叉处近心端15mm 处的远侧血管壁。放大图像直到能清晰显示血管壁的结构，测量从血管内膜的内表面到中膜的外表面的垂直距离，以QLab软件自动测量。

1.2.3 基因测定 对Lepr基因RS1137101进行多态性分型。每个受试者检测前都签署知情同意书，取外周静脉血4mL，抽提 DNA，采 用 MALDI－TOF 质 谱 检 测 技 术 进 行ADD 1Gly 4 6 0Trp分型。应用MassARRAYTM Assay Design 2.0软 件 设 计PCR 引 物。经 多 重PCR 扩 增、PCR 产 物SAP 纯化、延伸反应、树脂纯化后，将纯化产物点样Spectro CHIP 芯片。MassARRAYTM Analyzer质谱检测，运行MassARRAYTM Typer 3.0.1软件进行数据分析，并输出基因类型［7］。

1.3 统计学处理 采用SPSS 12.0统计。计量资料用t检验，以均数±标准差表示，计数资料用χ2检验，组间比较采用以性别、年龄、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）和BMI进行校正的方差分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组患者一般情况 508例原发性高血压患者，经中医体质分类，符合痰湿质体质判断标准（痰湿质组）264例，非痰湿体质（非痰湿质组）244例。两组病程和IMT 差异有统计学意义（P＝0.038，0.01）。

经校正性别、年龄、病程、SBP、DBP和BMII后，LVMI两组间分别为172.97±6.21和157.32±0.65，差异无统计学意义（P＝0.085），但与病程和BMI相关（P＝0.001，0.025）；IMT 值分别为（0.65±0.01）mm 和（0.62±0.01）mm，差异有统计学意义（P＝0.019），与性别、年龄、SBP和DBP相关（P＝0.02，0.006，0.001，0.022）。详见表1。

表1 两组患者一般情况比较

表3 两组患者Lepr基因的RS1137101多态性与LVM 和IMT 的相关性分析

表3 两组患者Lepr基因的RS1137101多态性与LVM 和IMT 的相关性分析

与非痰湿质组比较，1）P＜0.05

项目 痰 湿 质 组 AA非痰湿质组 痰湿质组AG非痰湿质组 痰湿质组GG非痰湿质组LVM（g／m2） 265.769±102.797 165.608±59.470 162.699±17.053 148.658±16.739 172.950±6.51 157.872±6.990 IMT（mm） 0.768±0.0351） 0.626±0.020 0.689±0.030 0.640±0.030 0.647±0.0121） 0.611±0.013

2.2 两组患者Lepr基因的RS1137101多态性比较 痰湿质组高血压患者Lepr基因RS1137101的AA、AG 和GG 的分布分别占1.5%、12.5%和80.6%，非痰湿质组高血压患者分别占4.9%、13.9%和81.1%，两组差异无统计学意义。A 等位基因和G 等位基因两组分别占8.0%、92.0%和11.9%、88.1%，差异无统计学意义。详见表2。

表2 两组患者Lepr基因RS1137101多态性分布比较 例（%）

2.3 两组患者Lepr基因的RS1137101多态性与LVM 和IMT的相关性分析 痰湿质组高血压患者的Lepr 基因的RS1137101的AA 型和GG 型在LVM 和IMT 值比非痰湿质组患者明显升高，IMT 值有统计学意义（P＝0.017、0.039），而LVM 值差别无统计学意义。详见表3。

3 讨 论

痰湿质是原发性高血压患者中最常见的体质类型之一［8］，痰湿质高血压病患者存在血脂、血糖、胰岛素抵抗、脂联素水平等代谢方面的异常，且比其他体质患者更为明显，存在更容易发生靶器官损害的倾向［9－11］。左心室肥厚程度和颈动脉内膜厚度是评估高血压靶器官损害的指标之一［4］，本研究以LVMI和IMT 为指标，探讨不同体质高血压患者在心血管的结构和功能方面差异，发现痰湿体质的高血压病患者LVM 和IMT 均比非痰湿体质高血压病患者高，在校正了性别、年龄、病程、SBP、DBP和BMI后，这种差异仍然存在，痰湿质组与非痰湿质组高血压病患者LVMI分别为1 7 2.9 7±6.2 1和1 5 7.3 2±0.65，差异无统计学意义（P＝0.085），但与病程和BMI呈正相关（P＝0.001，0.0 2 5）；而IMT值差异有统计学意义（P＝0.019），差异还与性别、年龄、SBP和DBP相关（P＝0.0 2，0.006，0.001，0.022）。说明高血压病程和患者BMI导致了心脏重塑，血压升高将会增加血管内膜厚度的变化，再次证明痰湿体质高血压病患者将增加心血管病风险。

中医体质分类综合先天和后天因素为遗传学研究提供了一条很好的途径。以痰湿体质作为病理特征，在高血压病患者中，结合亚临床的靶器官损害指标寻找心血管的易损性生物标志，可以为早期预防和早期治疗提供有效信息。Lepr基因的多态性早期认为与能量代谢有关［12］，Lepr基因RS1137101的变异Salopuro在芬兰人中发现与糖尿病密切相关［13］，Guízar在墨西哥人群中GG 和GA 型中心脏交感神经活性，体脂含量和瘦素水平明显升高［14］。也有报道与高血压相关［15－17］，但基因的多态性尚未有一致的结论［18］。本研究的结果显示痰湿体质和非湿体质高血压病患者在Lepr基因RS1137101的分布没有显著的差异，AA 型和GG 型的痰湿质高血压患者LVM 和IMT 值均比非痰湿质组患者升高，两组间IMT 差值有统计学意义，而LVM 差异无统计学意义。有报道认为Lepr基因的RS1137101的A 等位基因与原发性高血压患者动脉粥样硬化相关［19］，GG型基因高血压患者左心室功能、肾血流动力学各项指标变化更明显［20］。由于Lepr基因RS1137101的AA 型在人群中所占的比例较低，其结果是否有普遍的临床意义，还有待扩大样本做进一步验证。

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