吡诺克辛钠液对H2O2诱导的人晶状体上皮细胞凋亡的抑制作用

王新 李宝华 张明昌 张向东

已知白内障是由于人眼接受外源性紫外线照射和内源性体内产生的氧自由基等导致的晶状体上皮细胞DNA的损伤超越修复能力，以致细胞凋亡所引起的[1]。尤其是老年人晶状体上皮细胞DNA的损伤常年积累导致晶状体上皮细胞凋亡的几率更高；因此，白内障为老年人最常见的眼病，全球致盲人数可达1800万之多[2]。本研究探讨吡诺克辛钠液对H2O2诱导的晶状体上皮SRA01/04细胞凋亡的抑制作用。分析应用氧化应激抑制药对白内障的预防作用。

1 材料与方法

1.1培养的细胞来源细胞SRA01/04购自中国医学科学院肿瘤医院生物检测中心细胞库。SRA01/04细胞用含体积分数为10%FBS(TBD公司，天津)的低糖DMEM(Sigma公司，美国)培养基常规培养；培养条件为37 ℃、体积分数5%CO2、饱和湿度。细胞记数后稀释成30×106L-1的细胞悬液，用吸管吸出单细胞悬液接种于新的培养瓶里。当细胞铺满瓶底达80%以上处于对数生长期时，进行传代培养，当细胞达到一定数量时即可进行实验。

1.2主要试剂及仪器吡诺克辛钠液(武汉五景药业有限公司)、低糖DMEM培养基(Sigma公司，美国)、Bcl-2鼠单抗(SantaCruz公司，美国)、Bax鼠单抗(SantaCruz公司，美国)、Caspase-3的兔多抗(Zymed，美国)；图像分析仪(上海山富科技仪器厂)。

1.3实验分组将培养的人晶状体上皮细胞SRA01/04使用一次性六孔无菌培养皿培养(30×106L-1的细胞悬液，每孔2 mL)。随机分为3组，每组2个复孔，分别为：先加药组，即先在细胞培养液内加入吡诺克辛钠液300 μL培养23.5 h后，再加0.5 μmol·L-1H2O2培养30 min；后加药组，即在细胞培养液内先加入0.5 μmol·L-1H2O2，30 min后再加吡诺克辛钠液300 μL培养23.5 h；……