不同淋巴结转移潜能口腔鳞癌细胞株snail基因及蛋白表达的研究

申叶春 李立恒 蔡艳霞 张凡

·论著·

不同淋巴结转移潜能口腔鳞癌细胞株snail基因及蛋白表达的研究

申叶春 李立恒 蔡艳霞 张凡

目的探讨口腔鳞癌细胞株snail基因及蛋白表达与淋巴结转移关系。方法复苏传代口腔鳞癌高、低淋巴结转移潜能细胞株，流式细胞术和RT-PCR检测培养12、24、36、48、60、72 h时间节点snail基因及蛋白表达差异。结果流式细胞术检测结果显示：高淋巴结转移细胞株snail蛋白的阳性表达率为(48±4)%，低淋巴结转移株为(20±4)%，高转移细胞株明显低于低转移细胞株，差别有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR扩增结果显示：snail mRNA在高淋巴结转移口腔鳞癌细胞株中6个不同培养时间节点均存在高表达，而在低转移组细胞株中呈低表达，差异有统计学意义(P<0.05)。结论snailmRNA及蛋白的表达在不同淋巴结转移潜能的口腔鳞癌细胞株间存在明显的差别，高表达该基因及其蛋白可能是口腔鳞癌淋巴结转移的分子基础。

口腔鳞癌； snail； RT-PCR；流式细胞术；淋巴结转移潜能

口腔鳞癌的细胞形态学改变是其脱离原发灶，间质浸润和远处淋巴结转移的基础，而上皮间质转换在其中发挥重要作用。上皮细胞来源的恶性肿瘤在其外形改变的同时细胞表面的表型也发生变化，上皮表型表达减弱，间质细胞表型增加，snail是上皮间质转换的调节因子，下调E-cadherin表达的同时上调间质表型表达，同时因此本实验利用细胞培养、流式细胞术和RT-PCR检测口腔鳞癌不同淋巴结转移潜能细胞株snail基因及蛋白的差异，从形态和分子机制对口腔鳞癌淋巴结转移机制进行研究。

1 材料与方法

1.1 实验材料及设备 口腔鳞癌淋巴结高转移细胞株(SCC-LH)、低转移细胞株(SCC-LL)由北京大学医学部口腔医学院惠赠。RPMI-1640细胞培养基(lnvin’ogen公司)；新生小牛血清(杭州四季青生物工程有限公司)；胰蛋白酶A、青霉素、链霉素(华北制药股份有限公司)；二甲基亚砜(DMSO)(美国Sigma公司)；snail-FITC检测试剂盒(南京凯基生物)；……