金荞麦片溶出度测定方法研究

虢红梅，王中彦，孙 煌，白政忠

(1．陕西新药技术开发中心，陕西 西安 710075; 2．沈阳药科大学，辽宁 沈阳 110016; 3．黑龙江省食品药品检验检测所，黑龙江 哈尔滨 150001)

2010年版《中国药典(一部)》收载有1 096个中成药品种，仅275种测定了制剂的溶出度，因此进行中药固体制剂溶出度测定研究，已成当务之急。笔者参考文献[1－2]，以金荞麦片为模型药物，进行了中药固体制剂溶出度测定方法研究，旨在供金荞麦片的质量控制评价、指导工业化生产以及其固体口服制剂的进一步研发时参考。

1 仪器与试药

天大天发溶出度测定仪;岛津2550型紫外可见分光光度仪;AE163型电子天平。试剂磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、盐酸、冰醋酸、醋酸铵、异丙醇、十二烷基硫酸钠均为分析纯。金荞麦片(样品A，批号为 110803，110807，110815，100713，100608;样品 B，批号为20101205，20101212，20111009，20111016，20111124);聚合原矢车菊苷元B2对照品(日本Nakahara科技有限公司);表儿茶素对照品(批号为 878－200102)，儿茶素(批号 110877－2001)，均由中国药品生物制品检定所提供。

2 方法与结果

2．1 溶出度试验条件选择

溶出方法与转速:取金荞麦片6片，以水作为溶出介质，选用转篮法和桨法，分别测定在100 r/min及75 r/min转速条件下的药物溶出度，并测定两种方法1 h和2 h所取溶液在280 nm波长处的吸光度[3]。结果显示，桨法的溶出效果明显好于转篮法，75 r/min转速条件下溶出过程的分辨率好，因此选定桨法、75 r/min。

溶出介质:分别以水、pH=3．8醋酸盐缓冲液、pH=6．8磷酸盐缓冲液(PBS)及 pH=7．2 ～7．4 PBS、5%异丙醇溶液、0．25%十二烷基硫酸钠溶液(SDS)、0．1%SDS 溶液、0．25 SDS+0．1 mol/L盐酸(HCl)溶液、0．25%吐温－80溶液、0．1%吐温－80溶液作为溶出介质，在转速为75 r/min、温度为(37．0±0．5)℃条件下对样品进行溶出，取溶出液，以0．45 μm微孔滤膜过滤，取续滤液，依法测定，按方程分别计算出每片在不同时间的累积溶出率。结果见图1及图2。可见，0．25%SDS能满足单剂量为0．4 g及以下金荞麦片的漏槽条件，可获得很好的释放曲线。

图1 金荞麦片pH－时间－溶出度三维图

图2 金荞麦片溶出介质的选择(批号为110803)

含量测定方法:金荞麦提取物的活性成分是聚合原矢车菊苷元B2，故金荞麦片的含量多控制表儿茶素或芦丁[4－5]。进行高效液相色谱(HPLC)、紫外显色法、紫外分光光度自身对照法比较试验，结果表明，紫外分光光度自身对照法较满意，可用于溶出度测定。

测定波长:取金荞麦片，研成细粉，称取0．16 g，精密称定，用溶剂超声提取，并定容至100 mL，滤过，精密量取滤液2 mL，置25 mL容量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，在230～800 nm波长范围内扫描测定，以溶剂作空白。结果不同批次的样品均在277～280 nm波长处有最大吸收(见图3)，扫描图谱基本一致。由于275～295 nm波长处的吸收峰与其主要成分黄烷酮和双氢黄酮醇类的特征吸收峰基本相符[6]，故选定280 nm为检测波长。

图3 金荞麦片提取液用0．25%SDS稀释后的紫外吸收光谱

自身对照法提取溶剂:考察了水、乙腈－水(1∶9)、乙醇－水(50∶50)作为溶剂提取金荞麦片，而投料的金荞麦提取物就是以乙醇－水系统提取。试验结果表明，乙醇－水(50∶50)的提取率最好，相当于提取物0．2 g的样品在100 mL乙醇－水(50∶50)中即能完全溶解，故选择其作为提取溶剂。

提取方式:取金荞麦片，研为细粉，取约0．16 g，精密称定，置100 mL容量瓶中，加乙醇－水(50∶50)90 mL，充分振摇使分散，超声提取30 min，放冷至室温，用乙醇－水(50∶50)稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2 mL，置25 mL容量瓶中，用溶出介质稀释至刻度，摇匀。

2．2 方法学考察

溶出液稳定性试验:取金荞麦片120 min的溶出液，分别在室温下放置 0，15，30，60，90，120，150，180 min 后依法测定。结果见表1，表明溶出液在3 h内测定结果稳定，RSD为1．0%(n=8)。

表1 溶出液稳定性试验结果

线性关系考察:称取样品细粉0．174 8 g，精密称定，置100 mL容量瓶中，加乙醇－水(50∶50)溶液90 mL，超声提取 30 min，放冷至室温，加乙醇－水(50∶50)溶液至刻度，摇匀，滤过，精密量取 0．75，1．00，1．25，2．00，2．50 mL，分别置 25 mL 量瓶中，加0．25%SDS溶液至刻度，摇匀，制成质量浓度分别为 0．052 4，0．069 9，0．087 4，0．139 8，0．174 8 g/L 的溶液，于 280 nm 波长处测定吸光度，结果吸光度分别为 0．222，0．300，0．385，0．613，0．761。以质量浓度对吸光度进行线性回归，回归方程为 A=4．461C －0．011，r=0．999 5(n=5)。结果表明，溶液质量浓度在0．017 5～0．350 g/L范围内与吸光度呈良好的线性关系。

溶出均匀性试验:试验结果表明，金荞麦片在0．25%SDS溶液中的溶出均匀性较好。

2．3 样品溶出度测定方法确定

取样品适量，照2010年版《中国药典(二部)》附录ⅩC溶出度测定第二法，加以脱气水制成的0．25%SDS溶液1 000 mL，转速为75 r/min，依法操作。经60 min时取样，滤过，取续滤液，于280 nm 波长处测定吸光度，计算溶出量。溶出 10，20，40，60，90，120 min时各取样5 mL，同时补充溶出介质5 mL，滤过，取续滤液，于280 nm波长处测定吸光度，计算不同时间点的溶出度，绘制溶出曲线。

2．4 样品溶出度测定结果与分析

对2个厂家的10批样品进行了考察，结果见表2。初步试验结果显示，同一厂家同年生产的样品批间溶出曲线差别很大，不同厂家不同批号样品的溶出曲线差异更大，表明金荞麦片在制剂方面存在一定问题。建议相关企业对此进行深入研究，以进一步提高产品的质量水平和临床效果。

3 讨论

溶出度测定结果表明，各厂家采用的制剂工艺生产的产品均能达到企业现行质量标准要求，但溶出曲线显示出制剂工艺的不稳定性，且产品久置后溶出度明显下降。这说明现有的产品质量标准不能有效控制产品质量，尚待进一步完善。

表2 不同厂家不同批次样品溶出度测定结果

金荞麦原用药方式为汤剂，经过现代制剂工艺制备的片剂应为速释药物，因此必须控制其溶出度。金荞麦片主药为金荞麦乙醇水提取物，其主要成分以聚合原矢车菊苷元单体及多聚体为主，在醇水混合溶剂中溶解性好。因此，在设计溶出度试验时，应该考虑到是否能够达到漏槽条件。

目前，中药固体制剂溶出度测定方法的建立还面临着很多难题，西药制剂经典的溶出度测定方法具有很高的参考价值，但要科学地认识中药制剂固有的特点。中药固体制剂的溶出度测定方法的建立，将丰富其产品质量标准整体专属性的内涵。

笔者认为，从制剂用料的方式可将中药固体制剂分成原粉、原粉加提取物、提取物3类，再根据3类制剂的特点来拟订溶出度测定方法。对于中药固体制剂溶出度测定的设立，起点不要期望太高，可定位于配方的优化、产品的一致性和货架期的稳定性这3个方面，应回避体内外溶出度相关的问题。

产品自身的性质也影响着药物的溶出度。本试验中对金荞麦提取物的酸性多糖进行分析[6]，不能排除金荞麦提取物中的酸性多糖对片剂溶出度的不利影响，此影响还需进一步的试验证实。

[1]秦春怡．复方黄连素片的溶出度试验[J]．中国药业，2014，23(7):35．

[2]杜 亮．克拉霉素颗粒溶出度测定[J]．中国药业，2014，23(5):27．

[3]胡 静．玫瑰花总原花青素的分离、纯化以及分析[D]．杭州:浙江大学，2006．

[4]WS－305(Z－045)－96，金荞麦片[S]．

[5]WS3－B－3612－98，卫生部颁药品标准·中药成方制剂(第十九册)·金荞麦片[S]．

[6]石 碧，狄 莹．植物多酚[M]．北京:科学出版社，2000:134－138．