蜂胶软胶囊酸价测定方法改进

李秀梅，杨 堃，许凯羿，兰玉坤

(重庆市食品药品检验所，重庆 401121)

蜂胶具有抗菌、抗病毒、抗氧、清除自由基、提高免疫力、抗溃疡、抗肿瘤等多种功效[1]，近年来受到了越来越多的重视。蜂胶软胶囊常使用大豆油等作为溶剂，酸价是衡量含油脂类保健食品是否酸败的重要指标，通常需加以控制。目前，保健食品企业标准中酸价测定方法基本上采用国家标准《食用植物油卫生标准的分析方法》[2]中的酸价测定法，即用乙醚－乙醇(2∶1)为溶剂，以酚酞作指示剂，以KOH标准溶液作滴定液，进行酸碱中和滴定，测定样品中游离的脂肪酸。该方法适用于颜色较浅的油脂等样品。而蜂胶软胶囊颜色较深，天然蜂胶一般呈棕黄、棕红、棕褐色，部分甚至为近黑色，且因蜂胶中的萜类物质对光较敏感，常加入氧化铁棕作为遮光剂，使得在酸价测定时，很难准确地观察滴定终点。本试验中综合参考文献[3－9]，对国家标准的酸价测定法进行了改良，可以顺利、准确地进行终点观察。现报道如下。

1 材料与方法

1．1 仪器与试药

MSU224S－100－DU型电子天平(德国Startorius公司);320型酸度计(Mettler Toledo公司);PXS－5型数字离子酸度计电位滴定仪(成都仪器厂公司)。KOH滴定液0．100 5 mol/mL(自制);酚酞指示液;饱和氯化钠溶液(自配);乙醚－乙醇溶液(2∶1)，乙醇、乙醚均由重庆川东化工有限公司生产;酸价快速测试盒(厦门斯坦道科学仪器股份有限公司，批号不详)。取编号为T，X，M 3个厂家的蜂胶软胶囊进行试验，T厂样品(批号为20120903，20120902，20120705，20111207)，X 厂样品(批号为 JB1207001)，M厂样品(批号为20120403)，其中X及M厂的样品能较明显地观察滴定终点，T厂样品不便于观察滴定终点，故重点对T厂样品(批号为20120903)进行试验。

1．2 方法

1．2．1 样品前处理方法

直接溶解法(GB/T5009．37方法):取样品适量，经乙醚－乙醇(2∶1)溶液溶解后，滴定。

活性炭吸附法[7]:取样品适量，经乙醚－乙醇(2∶1)溶液溶解后，加入适量活性炭脱色，过滤，得到浅黄色样品溶液。

石油醚提取法[4]:取本品适量，用30 mL石油醚溶解，在40℃水浴挥干石油醚，残留物用50 mL的乙醚－乙醇(2∶1)溶液溶解并转移入锥形瓶中，得到浅黄色供试品溶液，与直接溶解法所得溶液相比，颜色稍浅。

1．2．2 滴定法及终点指示方法比较

采用酚酞指示液，以变为微粉色(或者明显的颜色突跃)作为滴定终点;采用pH计指示法，以空白溶剂发生颜色突变时的pH作终点[5];以电位滴定进行终点判定;滴定时加入饱和氯化钠溶液[8]，以酚酞指示液作终点判定;用快速酸价试剂盒进行滴定。

2 结果

2．1 溶剂及样品溶液pH考察

测得乙醚－乙醇(2∶1)溶液的 pH为9．54。加入酚酞指示剂，用KOH标准溶液滴至微粉色时，测得pH为11．25。不同蜂胶软胶囊经乙醚－乙醇(2∶1)溶解后对比pH(未滴定前)，结果见表1。

表1 各厂家样品溶液的pH比较

2．2 不同方法酸价测定结果

A法:直接用乙醚－乙醇(2∶1)溶液溶解样品后，通过pH指示终点;同法做空白试验，观察颜色变化，计算结果。

B法:样品经乙醚－乙醇(2∶1)溶液溶解后，加入适量活性炭脱色，过滤，滤液中加入酚酞指示剂，滴定。

C法:样品经石油醚提取后，通过pH指示终点，进行测定。

表2 不同方法酸价测定结果

D法:样品用乙醚－乙醇(2∶1)溶液溶解后，加入饱和氯化钠溶液[8]，加入酚酞指示液，进行滴定。

E法:样品经石油醚提取后，加乙醚－乙醇(2∶1)溶液溶解后，加入饱和氯化钠溶液[8]，加入酚酞指示液，进行滴定。

F法:样品直接用乙醚－乙醇(2∶1)溶液溶解后，用酸价快速测试盒测定。取样量约0．4 g，用10 mL乙醚－乙醇(2∶1)溶液溶解、混匀，依法测定结果样品酸价为6．6。

G法:采用电位滴定法测定，同时观察现象并记录pH。不同方法的滴定现象和结果见表2。

2．3 方法确定及验证

上述各测定方法试验结果表明:T厂的样品颜色深，用GB/T5009．37的方法进行酸价测定时，不易观察判定终点;用电位滴定法的电位突跃不明显，不便指示终点;采用pH计指示法，结果的稳定性不佳。比较后认为，采用改良方法进行蜂胶软胶囊的酸价测定最理想，即经石油醚提取后，加乙醚－乙醇(2∶1)溶液溶解后，加入饱和氯化钠溶液，以酚酞作指示剂，进行滴定。

为考察该方法的适用性，进行了验证试验:选取T厂的其他批次样品，用改良方法测定酸价，结果见表3。可见，对于本身颜色深、干扰大的蜂胶软胶囊，直接采用GB/T5009．37的方法测定酸价，不易观察到滴定终点，但改良方法能方便、准确地观察终点。对不同厂家的蜂胶软胶囊，同时用GB/T5009．37的方法以及改良方法同时测定酸价并比较。结果见表4。可见，对于本身颜色无干扰的样品，两种方法测得的酸价无明显差异。

3 讨论

乙醚－乙醇(2∶1)溶液的pH为9．54，但加入酚酞指示液后不显粉红色，使该混合溶液显粉红色时的pH约为11．25，可能是由于乙醚－乙醇混合溶剂的极性小、电离度小、H+的活度小。因此，改良方法若要采用pH计指示法，则必须同法做空白试验进行校正。用活性炭吸附能较好地去除样品本身的颜色，但同时可能会损失一些样品[7]。采用石油醚溶解法，简便可行，制得的供试品溶液颜色更浅，便于滴定终点的观察。

表3 T厂其他样品改良方法酸价测定结果

表4 改良前后两种方法的测定结果比较

在供试品液中加入饱和氯化钠溶液后，形成两相滴定。水相颜色浅，游离脂肪酸在水相中的溶解度更大，利用饱和盐水的破乳作用及对微量碱的竞争优势[8]，滴定时能较好地观察到终点的微粉色。

[1]喻建辉，高荫榆．蜂胶软胶囊调节血脂作用研究[J]．食品科学，2010，31(7):260 －262．

[2]GB/T5009．37—2003，食用植物油的卫生标准分析方法[S]．

[3]GB/T5530—2005，动植物油脂酸值和酸度测定[S]．

[4]GB/T5009．56—2003，糕点卫生标准的分析方法[S]．

[5]GB/T12456—2008，食品中总酸的测定[S]．

[6]王竹天．食用植物油卫生标准的分析方法[M]．北京:中国标准出版社，2008:522－525．

[7]陈慧芬，黄晓唐．活性炭吸附色素测定辣椒油中的酸价[J]．中国卫生检验杂志，2012，22(1):33 －34．

[8]李兰芳，栾玉明，潘 翊，等．辣椒油中酸价测定方法的探讨分析[J]．中国卫生检验杂志，2010，20(4):746 －747．

[9]华红慧，林燕奎，韩瑞阳，等．油脂中酸值测定方法的比较[J]．中国油脂，2006，31(9):56－58．