饲料中安定的残留分析技术研究

陈建新

（石家庄曙光制药有限公司，河北 石家庄 050030）

饲料中安定的残留分析技术研究

陈建新

（石家庄曙光制药有限公司，河北 石家庄 050030）

本文主要对安定做了简要介绍，指出将其应用到饲料中所存在的危害，然后从所使用的设备及溶液和实验要点及方法两个方面对分析技术做出了详细介绍，为有效地测定安定的残留打下基础。

饲料；安定残留；分析技术

1 分析技术所使用的设备及溶液

分析饲料中安定的残留一般采用液质联用法，这种方法具有灵敏度高、回收率高、稳定性好等特点。因此，液质联用法分析技术经常被人们应用分析饲料中安定的残留。

1.1仪器。液质联用分析技术所采用的仪器是液质联用仪，包括配有电喷雾电离源的ZQ4000质谱检测器、Waters 2695液相色谱仪、每分钟四千转的离心机、电子分析天平、旋转蒸发器、旋涡混合仪等器械。

1.2 药品和试剂。检测饲料中安定的残留要用到很多的药品和试剂，其中包括由Sigma公司生产的、纯度大于百分之九十九的安定标准品，MERCK公司生产的色谱纯甲醇和乙腈，重蒸馏的水。除此之外，其他试剂采用的均是分析纯。

1.3 标准溶液的配置。首先，要准确地称取一定量的安定标准品，然后加入适量的甲醇将其配成标准贮备液，之后再向标准贮备液中加入相应量的甲醇，将其稀释成相应浓度的标准工作液留做备用。

2 实验要点及方法

2.1 色谱条件。检测饲料中所含的安定残留时，需要严格地控制色谱条件。首先，色谱柱需要达到相应的标准。其次，柱温应维持在三十度，乙腈和甲酸的使用量和配比要进行严格的控制。最后，对流速和进样量进行控制。流速应控制为0.2毫升每分钟，进样量则应为十微升。只有这样进行严格的控制，才有可能使色谱条件达到所需要的标准。色谱条件的确定是非常复杂、繁琐的，最为重要的环节就是流动相。流动相作为色谱分离中极为重要的一个环节，直接关系到饲料中安定的残留分析的检出限和灵敏度，对能否将样品的组分一一洗脱分离起着决定性的作用。在过去常用的有关安定的液相检测方法中，大多采用缓冲盐溶液作为流动相。虽然把缓冲盐溶液作为流动相可以优化安定的色谱峰型，但是也存在着很多不利因素。比如：使用缓冲盐溶液会对色谱柱造成损害，尤其是在质谱检测器中，盐类物质特别是无机盐类物质，非常容易对仪器造成污染。而现行的检测方法就很好地避免了这一问题。根据饲料中安定的化学性质和一些流动相的pH条件，进行参考、对比，最后选择了甲酸和乙腈作为现行分析技术的流动相，从而避免了无机盐类的使用，为碎片离子的形成创造了非常有利的条件。

2.2 质谱条件。与色谱条件相似的是，质谱条件也需要进行严格的控制和把关。电离方式应采用电喷雾离子源的方式进行电离；离子源的温度应该达到140摄氏度；脱溶剂温度则要达到280度；气体速度设定为300升每小时。除此之外还要对各种电压进行调节，锥孔电压为45伏，毛细管电压为3 500伏，萃取锥孔电压为5伏，RF六级杆透镜电压为0.5伏，离子能量为1V。这些条件虽然复杂、繁琐，但是要想准确无误地分析饲料中安定的残留就必须对其进行严格的控制。

2.3 标准曲线绘制。众所周知，仪器所测量出来的结果不一定是十分精确的，总存在着或多或少的误差。要想使所测结果更为标准，那么就有必要绘制标准的曲线，根据曲线的走势情况进行相应的判定。首先将配制好的标准工作液按照浓度的大小进行排序。然后，按照浓度由小到大的顺序依次进样。再根据上述的色谱条件和质谱条件进行分析，将所得结果绘制成标准的曲线，从而得出所选离子的保留时间和峰面积。除此之外，在选定各浓度的安定标准液时要在色谱条件下测定，这样才有可能得到标准的曲线和回归方程，才有利于进行下一步操作。

2.4 样品预处理。对饲料中安定的残留进行分析时，不能直接拿饲料进行分析，需要取少量的饲料作为样品，然后对其进行预处理。首先，取20克的饲料作为样品，将其倒入20毫升的水内进行溶解，加入碳酸钠溶液进行调节，直到将pH调成10为止。然后，加入两克氯化钠和20毫升的正己烷与二氯甲烷，进行两分钟的漩涡混合，再以4 000转每分钟的离心速度进行离心，时间大约为10分钟。最后，吸取上层的有机相，将其存放于梨形瓶内。把剩下的液体重复操作再提取一次，将两次所得的有机相进行合并，放在50摄氏度的水浴上旋转蒸发直至干燥。之后，取2毫升的甲醇将剩余的残余物进行溶解，取1毫升将其倒在制定的过滤膜上进行过滤，供LC/MS技术分析时使用。所制样品中安定的提取方法有很多种，常见的方法包括固相微萃取、固相萃取以及液液萃取等。值得一提的是，此处提取溶液选择的是液液萃取。萃取时考察了二氯甲烷和正己烷的干扰情况和不同配比提取率，以体积比为7:3的比例进行提取。这样的操作不仅提取率高，还有助于水相和有机相实现很好的分离。

2.5 样品回收率及精密度测定。取两克的空白饲料，定量加入安定标准品，制成三个不同浓度的液体，然后按照样品预处理的方法对其进行处理，最后进行检测。

综上，安定是一种国家控制的精神药品，具有镇静、抗焦虑、催眠等药理活性。在饲养和运输过程中使用含有安定的饲料，可以降低动物维持的需要，减少失重和死亡率。因此，某些不法商贩受利益的驱使经常会在饲料中添加，使其在牲畜体内残留，从而导致牲畜产品不安全，所以我国命令禁止在饲料中添加、使用安定。

[1]贾瑜，张德红，冯才茂.安定残留危害及其检测技术研究进展[J].农产品质量与安全，2012，（2）.

S816

A

1671-0037（2014）07-94-1

陈建新（1974.5-），女，本科，研究方向：生物制剂及菌体蛋白饲料研发。