生熟五味子对玉泉丸降糖作用及化学成分影响研究

高 慧，张 爽，高 雁，佟 鑫

(辽宁中医药大学 药学院，辽宁 大连 116600)



生熟五味子对玉泉丸降糖作用及化学成分影响研究

高 慧，张 爽，高 雁，佟 鑫

(辽宁中医药大学 药学院，辽宁 大连 116600)

目的：比较生熟五味子对玉泉丸降血糖作用及化学成分的影响，为五味子“生熟异用”提供实验依据，并分析炮制原理。方法：采用链脲佐菌素(STZ)构建高血糖SPF级大鼠模型，于给药第7天、14天采用血糖仪测定大鼠血糖值；采用HPLC法检测玉泉丸中葛根素、五味子醇甲的含量，比较生熟五味子对玉泉丸降糖作用及指标性成分含量的影响。结果：两种方法配制的玉泉丸降血糖作用无显著性差异：含生五味子玉泉丸中，五味子醇甲、葛根素的含量分别为0.011 7%、0.032%；含醋五味子玉泉丸中，五味子醇甲、葛根素的含量分别为0.006 1%、0.024%。结论：玉泉丸原方选用生五味子较为科学合理。

五味子；醋制；玉泉丸；血糖值；五味子醇甲；葛根素

五味子为木兰科植物五味子(SchisandraChinensis(Turcz.) Baill.)的干燥成熟果实，归肺、心、肾经，收敛固涩、益气生津、补肾宁心[1]。中医学理论[2]认为五味子“入补药熟用，入嗽药生用”，即五味子“生熟异用”，《中国药典》收载的五味子炮制品均为醋五味子，五味子醋制后可增强收敛酸涩的功效[3]。关于五味子炮制前后药效学性能的研究，目前有保肝作用、免疫作用等方面的文献报道[4-5]。本课题组前期对五味子补益、止咳、降血糖等作用进行生熟比较研究，从其临床应用角度来说，复方是中药临床应用的主要形式，因此将五味子纳入复方，将玉泉丸原方中生五味子换为醋五味子，与原方降糖作用进行比较，并选取五味子醇甲、葛根素等成分作为指标，分析玉泉丸化学成分，为五味子“生熟异用”的炮制原理及临床合理应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 雄性SD大鼠，SPF级，体重180～220g，购于辽宁长生生物技术有限公司，SCXK(辽)2010-0001。

1.1.2 试剂 五味子，购自辽宁丹东凤城五味子种植基地；天花粉、地黄、葛根、麦冬、甘草、糯米、大枣等均购自大连开发区保健大药房，均对照2010版《中国药典》自行鉴定。醋五味子自行炮制[4]。

阳性对照药(阿卡波糖)，购自拜耳医药保健有限公司(BJ09769)。链脲佐菌素，购自Sigma公司(05758)。血糖试纸，购自拜安康有限公司(4991-2008)。五味子醇甲对照品(110857-200709)、葛根素对照品(110752-200511)均购自中国食品药品检定研究院。HPLC用水为纯水，甲醇为色谱纯。

1.1.3 仪器 拜安康血糖仪(拜耳医药保健有限公司，型号：1816)。高效液相色谱仪(日本岛津LC-10AP)。医用超声清洗器(昆山超声仪器有限公司)，电子天平(Mettler Toledo AG285)。

1.2 降血糖活性比较

1.2.1 玉泉丸(分别含生五味子、醋五味子)水煎液的制备 取天花粉、地黄、葛根、麦冬、糯米各15g，生五味子(或醋五味子)、甘草各5g，加10倍量水，煎煮3次，每次1h，合并煎液，浓缩，分别制成含生五味子或醋品五味子的玉泉丸水煎液(浓度均为0.84g/mL)。

1.2.2 造模 实验大鼠高脂饲料喂养，同时灌服脂肪乳，每天1次，使大鼠体重达350g左右；采用腹腔注射STZ方式造模，剂量35mg/kg，造模72h后测定大鼠血糖值，将血糖值高于18mmol/L的大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组(阿卡波糖)、玉泉丸生五味子组、玉泉丸醋五味子组，另取未造模大鼠作为空白对照组，每组10只。空白对照组、模型对照组大鼠给予生理盐水(10mL/kg)灌胃，其他各组大鼠给予相应药液(10mL/kg)灌胃，每天1次，连续14天。

1.2.3 血糖值测定 给药后第7天、14天，大鼠断尾采血，采用血糖仪与血糖试纸测大鼠血糖值[6]。

1.3 化学成分比较

1.3.1 色谱条件 色谱柱：ECOSIL120-5-C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；检测波长：254nm；流动相：甲醇(A)-水(B)。梯度洗脱条件：0～20min，65%A；20～30min，75%A。流速：1.0mL·min-1；柱温：室温。

1.3.2 对照品溶液制备 精密称取五味子醇甲、葛根素对照品，用甲醇溶解，制备混合对照品溶液，浓度分别为0.586、0.282mg/mL。

1.3.3 供试品溶液制备 取一定体积的玉泉丸(分别含生品、醋品五味子)水煎液，水浴蒸干后加甲醇溶解，过滤，滤液转移至25mL容量瓶，加甲醇至刻度，摇匀，过0.45μm微孔滤膜，即得。

样品含量测定：取玉泉丸(分别含生品、醋品五味子)水煎液供试品，按上述色谱条件操作，记录色谱峰及峰面积，为计算样品含量。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 降血糖实验结果

灌服脂肪乳1个月后，大鼠体重基本达到350g以上，腹腔注射STZ后，大鼠均表现出典型糖尿病症状，“三多一少”，即多饮、多食、多尿及体重减轻。72h后血糖值表明造模成功，大鼠血糖值明显升高，且大于18mmol/L。连续给药7天后，给药组大鼠血糖值有所降低，含生五味子组与含醋五味子组大鼠血糖下降明显，含醋五味子组大鼠改善程度较含生五味子组无显著性差异。给药14天后，含生五味子、醋五味子玉泉丸组大鼠血糖继续降低，接近正常血糖值水平，差异无统计学意义(P>0.05)。结果见表1。

组别造模后给药7天给药14天玉泉丸(生五味子)20.91±0.997.12±2.46*4.68±0.77*玉泉丸(醋五味子)22.51±1.36.85±0.88*4.03±0.49*空白对照组4.29±0.70*3.26±0.53*△3.14±0.46*模型对照组20.60±1.0720.38±2.62△20.00±2.11△阿卡波糖组20.64±0.958.14±2.40*3.04±0.34*

注：与模型组比较，*P<0.05；与阿卡波糖组比较，△P<0.05。

2.2 含量测定实验结果

玉泉丸样品HPLC色谱见图1。

a：五味子醇甲;b:葛根素。

含生五味子玉泉丸中，五味子醇甲、葛根素的含量分别为0.011 7%、0.032%；含醋五味子玉泉丸中，五味子醇甲、葛根素的含量分别为0.006 1%、0.024%。测定结果见表2。

表2 玉泉丸中五味子醇甲、葛根素含量测定结果 (%)

3 讨论

实验结果表明，含生五味子、醋制五味子成分玉泉丸均可降低糖尿病大鼠的血糖值，使大鼠血糖趋于正常值，差异无统计学意义(P>0.05)。前期五味子生熟饮片降血糖实验结果表明，醋制五味子较生五味子降糖作用起效的时间点不同，但实验终点两者血糖值结果无显著性差异。本实验将五味子不同炮制品纳入复方进行研究，实验结果与生熟饮片结果相近，因五味子在方中非君药，对复方药效的实验结果影响并不明显。

含生五味子玉泉丸中五味子醇甲、葛根素含量均远高于含醋制五味子玉泉丸。生五味子、醋制五味子中五味子醇甲成分含量分别为0.011 7%、0.006 1%，故含醋制五味子玉泉丸的醇甲含量低于含生五味子玉泉丸并非由醋蒸引起，同时葛根素含量增加，说明生五味子加入复方有利于煎煮过程中有效成分(如五味子醇甲、葛根素等)的溶出，其原理有待进一步研究。

实验选择方中君药葛根的指标性成分葛根素及五味子的指标性成分五味子醇甲进行研究，其含量的差异可从化学成分角度解释五味子“生熟异用”的原因。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].一部.北京: 中国医药科技出版社,2010: 61-62.

[2] 张浩.仁术便览[M].海口：海南国际新闻出版社，1995:320.

[3] 贾天柱.中药炮制学[M].上海：上海科学技术出版社，2010: 266.

[4] 陆兔林，毛春芹，吕高虹，等.五味子不同炮制品补益作用的实验研究[J].中国药学杂志，2009,44(15)：1147-1149.

[5] 姚庆，陆兔林，胡芳，等.五味子不同炮制品对小鼠CYP450的诱导作用[J].华西药学杂志，2011，26(3):249-251.

[6] 徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学[M]．第3版.北京：人民卫生出版社，2002.

(责任编辑：李岚春)

2015-04-20

国家发改委中医药行业科研专项项目：19种生熟异用中药饮片临床规范使用研究 (20110700704)

高慧(1974-)，女，辽宁中医药大学副教授，研究方向为中药炮制原理。

R284

A

1673-2197(2015)16-0016-02

10.11954/ytctyy.201516007