超高效及高效液相色谱法测定华法林钠片含量的结果比对

丁大中，宋梓瑜，于 毓

(山东省青岛市食品药品检验检测中心，山东 青岛 266071)

华法林钠为双香豆素的衍生物，临床应用广泛，其优点是作用强且稳定、可口服给药、应用方便、价廉且作用持久[1－2]。目前，进口华法林钠片采用《国家食品药品监督管理局进口药品注册标准》[3]检验，含量测定采用高效液相色谱(HPLC)法。超高效液相色谱(UPLC)法比HPLC法具有高效、快速、灵敏度和分辨率高、微量、经济及环境友好等优点[4－8]，但将其用于华法林钠含量测定还未见报道。本研究参考文献[9－12]，成功建立了测定华法林钠片含量的UPLC法，该方法操作灵敏、准确，且能实现高通量的分析样品。

1 仪器与试药

Agilent 1200型高效液相色谱仪(美国Agilent公司);Waters Acquity UPLC超高效液相色谱仪(包含Empower色谱工作站，美国Waters公司);AG285型十万分之一天平(瑞士 Mettler Toledo公司);超纯水仪(美国Millipore公司)。华法林钠对照品(中国食品药品检定研究院，批号为101163－201001，含量为92.3%);磷酸(天津市科密欧化学试剂有限公司，批号为20120104)、甲醇(德国Merch公司)、乙腈(德国Merch公司)均为色谱纯;超纯水(Millipore超纯水仪公司);华法林钠片(芬兰Orion Corparation公司，规格为每片 3 mg，批号分别为 1555638，1555639，1556716，1556720，1556722)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

HPLC色谱条件:色谱柱为Agilent Zorbax SB－C18柱(250 mm×4.6 mm，5μm);以水(磷酸调 pH 至 3.0)为流动相 A、乙腈为流动相B，进行梯度洗脱;流速1.5 mL/min;柱温30℃;检测波长280 nm;进样量 20 μL。

UPLC色谱条件:色谱柱为Thermo Syncronis C18柱(100 mm×2.1 mm，1.7μm);以水(磷酸调 pH 至 3.0)为流动相 A、乙腈为流动相B，进行梯度洗脱;流速0.5 mL/min;柱温30℃;检测波长280 nm;进样量5 μL。梯度洗脱方法见表1。

2.2 溶液制备

精密称取华法林钠对照品10 mg，置100 mL容量瓶中，加溶剂A(水∶乙腈=2∶8)振摇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液(100 μg/mL)。……