高效液相色谱法测定知柏地黄丸中3种成分含量

毛爱丽

(河南省鹤壁市食品药品检验所，河南 鹤壁 458030)

知柏地黄丸由熟地黄、山茱萸、山药、牡丹皮、泽泻、茯苓、知母、黄柏8味药材组方[1]，具有滋阴降火之功效，临床用于治疗阴虚火旺、潮热盗汗、口干咽痛、耳鸣遗精、小便短赤等证。其成分复杂，质量较难控制，且质量标准中只有马钱苷、丹皮酚的含量测定，而无君药黄柏中盐酸小檗碱的含量测定。为保证药品质量，本研究中建立了同时测定知柏地黄丸中马钱苷、盐酸小檗碱、丹皮酚3种成分含量的高效液相色谱法，现报道如下。

1 仪器与试药

UltiMate 3000型高效液相色谱仪(美国戴安公司);UV－240型分光光度计(日本岛津公司);pHS－3C型精密酸度计(上海电光器件厂);AE 240型电子分析天平(瑞士Mettler Toledo公司)。知柏地黄丸(市售，用粉碎机粉碎处理);盐酸小檗碱对照品(批号为110713－200911，按 C20H18ClNO4计，含量为 86.8%，使用前不需处理)，丹皮酚对照品(批号为110708－200506，使用前不需处理)，马钱苷对照品(批号为 111640－201005，含量为 99.2%，置五氧化二磷减压干燥器中干燥12 h)，均购自中国食品药品检定研究院;乙腈、甲醇、三乙胺均为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:DiamonsilTM(钻石)C18柱(150 mm ×4.6 mm，5 μm);流动相A为乙腈，B为磷酸盐缓冲液[0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液和 0.05 mol/L庚烷磺酸钠溶液(1∶1)，含 0.2%三乙胺，并用磷酸调 pH 至 3.0][2]，梯度洗脱(0～10 min，A 为 12% ，B 为88%;10～11 min，12%A→40%A，88%B→60%B;11～25 min，A为 40%，B 为 60%;25～26 min，40%A→12%A，60%B→88%B;26～29 min，A 为 12%，B 为 88%);流速:1.000 mL/min;检测波长:230 nm;柱温:30 ℃;进样量:10 μL。

2.2 溶液制备

精密称取对照品盐酸小檗碱25.58 mg、丹皮酚49.96 mg、马钱苷25.36 mg，置同一50 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密称取知柏地黄丸1.000 g，精密加入甲醇50 mL，加热回流15 min，置室温，补足减失的质量，摇匀，经微孔滤膜过滤，取续滤液，即得供试品溶液。……