细菌性阴道炎对阴道免疫环境的影响

姚锋

南通大学附属医院妇产科，江苏南通 226001

细菌性阴道炎对阴道免疫环境的影响

姚锋

南通大学附属医院妇产科，江苏南通 226001

目的 探讨细菌性阴道炎对阴道内免疫环境的影响。方法2015年1—7月整群收集该院诊治的80例细菌性阴道炎患者和80例正常妇女阴道灌洗液和白带，ELISA检测阴道灌洗液中IL-1β，IL-6,IL-8及HBD-2。白带涂片革兰氏染色镜检阴道杆菌和其他杂菌的数目。结果 细菌性阴道炎组较正常妇女组阴道内IL-1β水平升高 （P＜0.001），HBD-2水平降低（P＜0.001），IL-6，IL-8差异无统计学意义（P=0.631，P=0.764）。细菌性阴道炎组较正常妇女组阴道内杂菌数量增多（P＜0.001），阴道杆菌数量减少（P＜0.001）。结论 阴道杆菌对阴道内环境有免疫调节作用，细菌性阴道炎杂菌生长会破坏阴道内免疫环境。

细菌性阴道炎；阴道杆菌；免疫环境；细胞因子

细菌性阴道炎(Bacterial vaginosis,BV)是由加德纳杆菌类、拟杆菌类、弯曲弧菌类以及生殖道支原体等混合感染,而导致阴道乳酸杆菌数量减少,甚至消失的一种育龄妇女最常见的下生殖道感染性疾病。

该研究通过整群收集2015年1—7月诊治的80例细菌性阴道炎患者和80例正常妇女,检测BV患者的阴道灌洗液中细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-8(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)以及人β-防御素-2(HBD-2)水平,了解BV患者阴道局部免疫环境的变化。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

整群选取2015年1—7月南通大学附属医院的来自妇产科门诊的80例BV患者标本，以及来自体检中心的80例正常妇女标本。标本为阴道灌洗液和白带。在筛选病例时，均已排除了具有其他相关阴道疾病的患者，且在1个月内，160例患者均未服用过其他相关的治疗药物，在2个月内，未对阴道进行用药。

1.2 方法

1.2.1 BV诊断标准①涂片镜检结果显示，患者的线索

细胞＞20%；②胺试验中，对分泌物添加 1～2滴浓度为10%的氢氧化钾，分泌物具有鱼腥味，则表明胺试验结果为阳性；③通过pH试纸对分泌物进行检测，发现pH值＞4.5；④阴道分泌物有增多的情况，且分泌物较为稀薄，呈奶状，并存在异味；对患者进行诊断时，若患者具有上述标准中的3个以上指标，则可确诊为BV。

1.2.2 标本采集 采集前24 h内禁止性交、盆浴、阴道灌洗和局部上药等。白带标本用消毒棉拭子自阴道深部或阴道穹隆后部、宫颈管口等处取材。阴道灌洗用3 mL无菌0.9%氯化钠溶液反复冲洗阴道壁后收集阴道灌洗液。阴道灌洗液标本最初存放在4℃环境中长达4 h,然后置于-80℃待查。

1.2.3 检测方法 (1)IL-1β，IL-6,IL-8及HBD-2的测定采用双抗体夹心ELISA方法检测阴道冲洗液中IL-1β，IL-6,IL-8及HBD-2的质量浓度;ELISA检测试剂盒分别购自深圳晶美生物工程有限公司及深圳达科为生物技术有限公司。（2）应用阴道革兰染色涂片检查阴道杆菌和其它杂菌的数量，每个白带涂片经革兰染色镜检计数10个油镜视野，以平均数作为每个患者显微镜下阴道杆菌和其它杂菌的数量。对细菌数量给予赋值：油镜视野下细菌数0，赋值0；油镜视野下细菌数小于1，赋值；油镜视野下细菌数1～5，赋值2；油镜视野下细菌数6～30，赋值3；油镜视野细菌数大于，赋值4。

1.3 统计方法

所有数据均采用 SPSS17软件包进行处理，计量资料用均数±标准差（）表示，并采用 t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

正常妇女组平均（29.24±5.90）岁，BV组平均（29.1± 6.89）岁，两组年龄差异无统计学意义（P=0.48）。由表1可见，BV组较正常妇女组阴道内IL-1β水平升高 （P＜0.001），HBD-2水平降低 （P＜0.001），IL-6，IL-8差异无统计学意义（P=0.631，P=0.764）。BV组较正常妇女组阴道内杂菌数量增多（P＜0.001），阴道杆菌数量减少（P＜0.001）。

3 讨论

BV是育龄妇女最常见的阴道感染性疾病[1]，患病年龄多在15～44岁，是由多种致病性厌氧菌引起的感染性疾病，感染率在15%～30%，在阴道感染性疾病中，发病率远高于阴道滴虫和霉菌感染，且易复发。

该研究通过检测BV患者的阴道灌洗液中细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8及HBD-2水平,了解BV患者阴道局部免疫环境的变化。

细胞因子和免疫反应具有相关性。其中IL-1β，IL-6,IL-8是重要的炎症介质，是前炎症网链中的一级细胞因子，在炎症反应中起核心作用，其持续升高会导致系列生理病理改变，众多的细胞因子构成了炎症反应和免疫反应网络。我们的研究结果显示BV组较正常妇女组阴道内IL-1β水平升高（P＜0.001），可见阴道杆菌对阴道内免疫环境有免疫调节作用，尤其对IL-1β有作用，而BV对阴道粘膜有免疫刺激作用。但是，一些研究结果显示阴道杆菌对阴道粘膜的免疫调节作用是有限的。Anderson等[2]检测了47个正常育龄期妇女的IL-1β，IL-6和分泌性白细胞蛋白酶抑制剂，并未发现阴道杆菌数量对这些因子有什么影响。我们的研究结果显示IL-6，IL-8差异无统计学意义（P=0.631，P=0.764），即阴道杆菌对阴道内IL-6,IL-8表达无影响，但是却引起阴道内IL-1β表达降低。

HBD-2是人体中第一个被发现的可诱导性表达的防御素，主要来源于皮肤角质细胞、黏膜上皮细胞。

HBD-2在泌尿生殖道感染中起着重要的作用[3]。更年期妇女由于缺乏雌激素，抑制阴道上皮细胞HBD-2的表达，从而增加了细胞性阴道炎和复发性尿路感染的易感性。我们的研究显示 HBD-2水平降低 （P＜0.001），即HBD-2的表达在BV患者阴道内受到抑制。BV的发病机制与阴道优势菌群的变化，相关菌群及其代谢产物增加，局部黏膜免疫因素及性活动有关。阴道正常菌群中主要的微生物是乳酸杆菌，乳酸杆菌分解阴道黏膜上皮细胞内的糖原产生乳酸、过氧化氢[4]，阴道内的不同微生物之间相互制约、相互依存，使阴道保持酸性环境[5]，保持着阴道生态平衡。抗生素的广泛使

用、阴道灌洗不当、频繁性交、避孕药具的使用[6]、全身性疾病、性激素的变化等引起阴道内微环境紊乱，菌群间拮抗作用消失而导致疾病的发生。BV妇女的阴道分泌物有很强的溶解阴道保护性黏液层的作用，并且破坏宫颈黏液和其他宿主的防御机制。BV相关致病性厌氧菌氨基酸代谢产生的三甲胺、尸胺、腐胺导致 BV患者阴道分泌物产生腥臭味和pH值升高。BV还伴有阴道分泌物中丙酸盐、丁酸盐、醋酸盐几种短链脂肪酸的升高。已经有相关用于临床产品的二期试验，这个试验使用阴道杆菌菌株L.crispatus CTV-05作为有益菌接种于临床病人阴道内进而观察临床效果[7]，研究证明这个方案是可行的。还有研究表明，仅含有阴道杆菌的阴道分泌物可以体外抑制大肠杆菌的生长[8]。我们的研究发现，BV患者阴道内阴道杆菌的数量明显较少，甚至缺失。正常妇女阴道内阴道杆菌较多，杂菌较少。这说明阴道杆菌抑制杂菌的生长。杂菌反过来也会抑制了阴道杆菌的生长从而导致BV。

表1 两组细胞因子和细菌计数结果比较（）

表1 两组细胞因子和细菌计数结果比较（）

组别正常妇女组（n=80）BV组（n=80）t值P值降钙素原含量（ng/mL）IL-1β IL-6 IL-8 HBD-2 1.51±0.19 2.29±0.41 15.470＜0.001 0.97±0.15 0.98±0.06 0.482 0.631 2.61±0.38 2.63±0.18 0.301 0.764 3.48±0.22 3.25±0.20 6.851＜0.001细菌计数杂菌 阴道杆菌0.5±0.62 3.33±0.67 27.739＜0.001 3.21±0.63 0.48±0.55 29.112＜0.001

综上，该研究表明阴道杆菌具有免疫调节的作用，调节一些细胞因子的表达。BV实际上是杂菌与阴道杆菌的菌群失调导致的炎症反应。

[1]周银娣,温和.阴道炎诊断的研究进展[J].检验医学与临床,2014,11(18):2620-2622.

[2]Anderson BL,Cu-Uvin S,Raker CA,etal.Subtle perturbations of genital microflora alter mucosal immunity among low-risk pregnant women[J].Acta Obstet Gynecol Scand，2011，90: 510-515.

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[4]王聪,白丽.阴道微生态研究进展[J].新医学,2011,42(9): 628-630.

[5]洪永富,杨书容.五联检试剂检测阴道分泌物与传统检测方法比较[J].浙江预防医学，2011,23(11):90-94.

[6]阚翠芳,沈琼,张秀军,等.合肥市农村已婚妇女生殖道感染及相关因素分析[J].中国妇幼保健,2010(25):3544-3546.

[7]Ngugi BM,Hemmerling A,Bukusi EA,et al.Effects of bacterial vaginosis -associatedbacteria and sexual intercourse on vaginal colonization with the probiotic Lactobacillus crispatus CTV-05[J].Sex Transm Dis,2011, 38:1020-1027.

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Effect of Bacterial Vaginitis on the Immune Environment of Vagina

YAO Feng
Department of gynaecology and obstetrics,Affiliated hospital to Nantong university,Nantong,Jiangsu Province,226001 China

Objective To study the effect of bacterial vaginitis on the immune environment of vagina.Methods From January 2015 to July 2015,vaginal lavage fluid and leucorrhea of 80 cases of bacterial vaginitis patients and 80 cases of normal women were collected,IL-1β，IL-6,IL-8 and HBD-2 in vaginal lavage fluid were detected by ELISA,the number of vagina bacillus and other miscellaneous bacteria was examined by leucorrhea smear gram staining microscopic.Results Compared with the normal women group,IL-1βlevel of vaginal internal in the bacterial vaginitis group increased（P＜0.001）and HBD-2 decreased（P＜0.001）,the difference of IL-6 and IL-8 was notstatistically significant（P=0.631，P=0.764）.Compared with the normal women group,the number of miscellaneous bacteria in the bacterial vaginitis group increased（P＜0.001）but the number of vagina bacillus decreased（P＜0.001）.Conclusion Vagina bacillus has an immune and adjustment effect on vaginal internalenvironment and the growth of bacterial vaginitis bacteria can destroy vaginal internal immune environment.

Bacterial vaginitis;Vagina Bacillus;Immune environment;Cell factor

R711.31

A

1674-0742（2015）12（a）－0080-03

10.16662/j.cnki.1674-0742.2015.34.080

2015-09-05）

姚锋（1984-），男，江苏南通人，硕士，实习研究员，技师，主要从事妇产科相关临床检验和科研工作。