HDAC2对豚鼠急性听力损失治疗中糖皮质激素抵抗的影响*

周琼琼　佘万东



·实验研究·

HDAC2对豚鼠急性听力损失治疗中糖皮质激素抵抗的影响*

周琼琼1佘万东1

【摘要】目的观察地塞米松(dexamethasone，DEX)加氨茶碱(amionophylline,AMI)治疗脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)诱导的豚鼠急性听力损失的疗效及耳蜗组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2，HDAC2)的表达，探讨治疗中HDAC2对糖皮质激素(glucocorticoid，GC)抵抗的影响。方法选取50只健康白色豚鼠，其中10只为对照组，仅双耳鼓阶注入5 μl 人工外淋巴液(artificial perilymph，AP)(AP组)；其余40只鼓阶注入5 μl(5 mg/ml)的LPS后再随机分为4组，每组10只：模型组(LPS组)，无其他处理；LPS+DEX组：术前30 min及术后24小时腹腔注射DEX 1 mg/kg；LPS+AMI组：术前30 min及术后24小时腹腔注射AMI 20 mg/kg;LPS+DEX+AMI组：术前30 min及术后24小时腹腔注射AMI 20 mg/kg及DEX 1 mg/kg。所有动物给药前及鼓阶注射术后48小时行ABR检测后取耳蜗，采用免疫荧光法，观察耳蜗基底膜铺片及耳蜗组织冰冻切片中HDAC2的分布及空间定位，用ELISA法测定耳蜗组织中HDAC2的含量。 结果LPS组鼓阶注射LPS后48小时全频听力损失，由低频向高频逐渐加重；LPS+DEX组及LPS+AMI组16、32 kHz ABR阈移较LPS组改善明显(<0.05)，LPS+DEX+AMI组各频率ABR阈移均低于LPS+DEX组(P<0.05)，以16 kHz处最显著(P<0.01)。耳蜗基底膜铺片及耳蜗冰冻切片免疫染色结果表明HDAC2广泛分布于耳蜗中，且主要存在于胞核内。8、16、32 kHz ABR阈移与耳蜗内HDAC2的含量呈负相关(P<0.05)。结论AMI可提高豚鼠耳蜗HDAC2的表达，HDAC2可改善治疗中GC抵抗，对提高GC治疗LPS导致的急性听力损失的敏感性有一定的作用。

【关键词】组蛋白去乙酰化酶2；糖皮质激素抵抗;听力损失；氨茶碱;豚鼠

糖皮质激素(glucocorticoid，GC)已被广泛用于治疗突发性聋、自身免疫性内耳疾病、梅尼埃病等内耳疾病及细菌性中耳炎造成的感音神经性聋[1]。临床研究提示部分患者使用GC治疗后效果不明显，存在对GC不敏感或抵抗[2，3]。目前认为GC抵抗的可能原因与遗传因素、核转运障碍、竞争性糖皮质激素受体β(glucocorticoid receptor-β，GRβ)表达增加及促炎相关因子，如：活化蛋白1(activator protein 1，AP1)、核转录因子-κB(Nuclear factor κB，NF-κB)过多激活等有关[4～6]。最近研究表明组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2，HDAC2)的表达及活性下降是GC抵抗的重要机理[7，8]。

HDAC2通过调控组蛋白的乙酰化水平，影响染色体重塑，抑制抗炎基因转录，在GC介导的抗炎过程中通过募集HDAC2抑制炎症相关因子的表达。……