山羊上颌窦及额窦黏膜厚度对比观察

李岩峰, 韩奕诗, 任 桓, 陆云龙, 董欣明, 刘 乐, 胡 品, 王 宁(. 解放军总医院第一附属医院口腔科 解放军总医院口腔医学中心, 北京 00048;. 78086部队50分队卫生所, 成都 6007; . 解放军总医院第一附属医院病理科, 北京 00048)



山羊上颌窦及额窦黏膜厚度对比观察

李岩峰1, 韩奕诗1, 任 桓2, 陆云龙3, 董欣明1, 刘 乐1, 胡 品1, 王 宁1
(1. 解放军总医院第一附属医院口腔科 解放军总医院口腔医学中心, 北京 100048;
2. 78086部队50分队卫生所, 成都 610017; 3. 解放军总医院第一附属医院病理科, 北京 100048)

[摘要]目的 探讨山羊鼻窦(上颌窦及额窦)黏膜的厚度差异并分析其原因，为上颌窦提升术中涉及黏膜问题时提供理论依据和指导。方法 从获取的每块鼻窦黏膜(上颌窦顶、上颌窦底及额窦黏膜)上切取适当大小黏膜置于固定液中, 24 h后制成组织切片, 在带有刻度目镜的光学显微镜下观察, 镜下随机选取三处读数并记录。结果 山羊上颌窦顶黏膜厚度为410.03±65.97 mm, 窦底黏膜为461.33±91.37 mm，额窦黏膜为216.90±46.47 mm，上颌窦顶与额窦、上颌窦底与额窦、窦顶与窦底黏膜厚度均值之间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 上颌窦顶、底黏膜较额窦黏膜厚，上颌窦底黏膜较窦顶黏膜稍偏厚。

[关键词]山羊; 上颌窦底提升; 窦黏膜; 黏膜厚度

上颌窦底提升术的提出与发展，为临床剩余牙槽骨高度(residual bone height)不足的上颌后牙缺失病例创造了条件。无论侧壁开窗式上颌窦提升术或是经牙槽嵴顶的上颌窦提升术，均与上颌窦黏膜息息相关，因此本实验针对其黏膜厚度进行相关研究和探讨。

1 材料与方法

1.1 动物、材料及设备

18月龄山羊5只，由解放军总医院第一附属医院动物实验中心提供，雌雄不限，体态身形大小接近，身体健康，口腔、上颌窦无异常。动物实验于解放军总医院第一附属医院动物实验中心[SYXK(军)2012-0013]进行。

骨锯(宇通，天津)，剪刀、弯止血钳、无齿镊、手术刀片(伟荣，上海)、刻度尺(得力，宁波)、CT设备( Philips，荷兰)、光学显微镜(Olympus，日本)、生理盐水、体积分数10%中性甲醛溶液、自制黏膜剥离器。

1.2 方法

1.2.1 实验前期工作 山羊头颈部备皮后侧卧位固定，采用颈动脉空气栓塞处死，将头颅离断，立即行螺旋CT扫描，CT拍摄前在双侧颊面部表面放置牙胶条作为显影指示，扫描后即刻进行三维重建和分析(图1)。结合影像在羊颌面部画截骨线，锯开上颌骨，每侧上颌窦均分为顶、底两部分(图2),最终每只山羊鼻窦均可分为左右两个上颌窦顶、左右两个上颌窦底、左右两个额窦。

1.2.2 实验过程 按文献[1]剥离鼻窦黏膜(左、右),每只山羊均切取5 mm×10 mm黏膜置于体积分数10%中性甲醛标本瓶中，固定24 h后制成组织切片。选择带有刻度目镜的光学显微镜，镜下观测黏膜组织学特征，并选取黏膜层次分明部分作为测量区, 调整黏膜与目镜刻度垂直后随机选取三个位点进行读数并记录，取其平均值作为测量值。

1.2.3 数据及统计分析 应用SPSS17.0软件包软件，数据以x-± s表示, 选择配对t检验, 所有P值均为双边, P<0.05为差异有统计学意义。

图1 山羊颅骨三维重建

图2 山羊上颌窦的顶、底

2 结果

2.1 鼻窦黏膜厚度

山羊上颌窦顶、上颌窦底、额窦黏膜厚度间均有显著差异(P<0.01, P<0.05)(表1)。

2.2 鼻窦黏膜组织学观察

镜下可见(图3、图4)，鼻窦黏膜分为假复层柱状纤毛上皮层、固有层、粘膜下层。假复层纤

图3 山羊上颌窦黏膜(HE×100)

图4 山羊额窦黏膜(HE×100)

3 讨论

根据实验动物的选择原则和动物生物学特性，山羊上颌窦位置、大小形态和骨结构与人类相似，外侧壁骨板较薄，外科钻钻孔开窗以及黏膜的剥离和提升都较容易[2,3]; 尤其山羊窦腔黏膜厚度、组织毛柱状上皮由纤毛细胞、杯状细胞以及少量基细胞组成; 固有层由位于上皮深处的基底细胞组成，具有一定的增值和分化能力; 黏膜下层为疏松结缔组织，包含有血管、淋巴管、神经以及部分腺体。可见上颌窦黏膜较额窦黏膜偏厚。

表1 山羊黏膜厚度测定 mm

结构也近似于人类[4,5]。因此，本实验选择山羊作为动物模型。

临床上侧壁开窗式上颌窦底提升术与冲顶式上颌窦底提升术均需剥离和抬高上颌窦底黏膜，故本实验首先考虑将上颌窦底黏膜纳入实验对象中; 侧壁开窗术式需对上颌窦前外侧壁黏膜进行剥离，为将上颌窦其它位置黏膜与窦底黏膜进行比对，本实验亦将距离窦底相对较远而易区分清楚的窦顶黏膜纳入。选择额窦黏膜与上颌窦黏膜进行对比研究，探讨上颌窦黏膜生物学特性并分析其差异形成的可能因素，为上颌窦提升术提供直接参考。

为保证实验不受其他因素的干扰，山羊头部离断后立即进行头颅CT扫描和后续实验，颌骨锯开后窦腔暴露于空气中，为防止黏膜干燥引起性状改变，立即开始剥离黏膜，并将暂未开始行黏膜剥离的窦腔浸泡于室温生理盐水中，黏膜剥离过程中使用生理盐水不断润湿黏膜及窦腔。为降低实验结果的偶然误差、保证实验结果和最终数据的准确性，窦黏膜的剥离由1人完成。制作黏膜组织切片时切片机垂直于黏膜，制作完成后未达标准者(本实验出现5例)重新制作。

在剥离和切取上颌窦黏膜时，不同位置黏膜之间的颜色、质地、通透性以及剥离者操作感受等均有不同: 黏膜透明、纤薄，剥离时易发生卷曲、破裂，黏膜发白、厚重时剥离相对容易且完整。额窦黏膜厚度较上颌窦偏薄已在本实验中得到证实，但越薄的黏膜是否在压迫和撕拉时越容易破裂，具体将在后续实验中进行测量分析和讨论。

组织固定导致细胞收缩, 在黏膜厚度测量时造成误差。为使固定组织的收缩率尽量降低，本实验参考文献[6,7]，选用体积分数10%中性甲醛溶液(即含磷酸盐的缓冲液)作为黏膜固定液。最终测得山羊上颌窦黏膜平均厚度，与以往文献数据差异不大[4]。相对黏膜本身厚度而言，黏膜厚度值受标本制作过程中切片方向垂直与否的影响更值得考虑。固定液的选择对窦黏膜厚度的影响程度还有待进一步探讨。

实验前行CT扫描和重建分析，旨在了解上颌窦和额窦的大小、上颌窦外侧壁骨板厚度等，确定双侧上颌窦与参照物(牙胶条)间的位置关系指导截骨; 并在出现上颌窦分嵴、黏膜转折和变移时，在黏膜剥离等操作前给予提示和指导。CT测量黏膜厚度，精确值较光学显微镜低。2011年Janner 等[8]曾运用CBCT在上颌窦不同位置测量黏膜厚度，黏膜厚度个体差异较大。故本实验仅将CT测量结果作为组织学测量黏膜厚度值的辅助参考。

山羊上颌窦顶、上颌窦底、额窦黏膜厚度均值大小不同，从解剖方面分析: ①上颌窦与额窦黏膜厚度差别的可能原因是窦腔开口位置不同[9]或神经支配不同。②上颌窦底与上颌窦顶、额窦黏膜厚度差别可能原因: 咀嚼力传导致不同位置窦黏膜受刺激大小不同。以上问题有待进一步验证。山羊鼻窦不同位置黏膜厚度均值的两两比较之间均有差异。其中上颌窦顶、底间差异虽有统计学意义，但不排除实验中出现的随机误差导致差异的扩大，该问题有待于今后增加样本量后进一步论证。

参考文献：

[1] 樊佳东. 新型剥离器的优化和对羊上颌窦底黏膜剥离的对比研究[D].锦州: 辽宁医学院研究生学院, 2014.

[2] Derong Z, Lian G, Jiayu L, et al. Anatomic and histological analysis in a goat model used for maxillary sinus floor augmentation with simultaneous implant placement[J]. Clin Oral Implants Res, 2010, 21(1):65-70.

[3] Grageda E, Lozada JL, Boyne PJ, et al. Bone formation in the maxillary sinus by using platelet-rich plasma: an experimental study in sheep[J]. J Oral Implantol, 2005, 31(1):2-17.

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[6] Jonmarker S, Valdman A, Lindberg A, et al. Tissue shrinkage after fixation with formalin injection of prostatectomy specimens[J]. Virchows Arch, 2006, 449(3):297-301.

[7] 顾挺, 张春叶, 王丽珍. 固定时间对口腔黏膜鳞状细胞癌组织染色的影响[J]. 中国当代医药, 2013, 10:7-8,11.

[8] Janner SF, Caversaccio MD, Dubach P, et al. Characteristics and dimensions of the Schneiderian membrane: a radiographicanalysis using cone beam computed tomography in patients referred for dental implant surgery in the posterior maxilla[J]. Clin Oral Implants Res, 2011, 22(12): 1446-1453.

[9] 汪运坤, 林清霞, 张开文. 上颌窦窦口的应用解剖学观测[J]. 耳鼻咽喉头颈外科, 1999, 6(3):169-172.

Comparative Study on Mucosal Thickness of Maxillary Sinus and Frontal Sinus in Goats

LI Yan-feng1, HAN Yi-shi1, REN Huan2, LU Yun-long3, DONG Xin-ming1, LIU Le1, HU Pin1, WANG Ning1
(1. Department of Stomatology, The First Hospital Affiliated to the PLA General Hospital, Beijing100048, China; 2. Clinic, Squadron 50 of Unit 78086, Chengdu 610017, China 3. Department of Pathology, The First Hospital Affiliated to The PLA General Hospital, Beijing 100048, China)

[Abstract]Objective To explore the differences of mucosal thickness in goat paranasal sinus, and analyse the underlying reasons. The discussion can provide theoretical basis and guidance for issues related to mucosa in the practice of maxillary sinus floor augmentation. Methods The mucosa was cut into desired size from every sinus mucosa and fixed in formalin to get the tissue specimens, and observed under optical microscope with scaled eyepiece. Randomly selected three fields under the microscope from the samples and then measured and recorded. Paired t-test was used to determine the difference between the parameters, P<0.05 was regarded as statistically significant. Results Goat maxillary sinus mucosal thickness of the top was 410.03±65.97 mm, the bottom was 461.33±91.37 mm, the frontal sinus mucosa was 216.90±46.47 mm. The mean differences of mucosal thickness between the top of the maxillary sinus and the frontal sinus, the bottom and the frontal, the top and the bottom were statistically significant (P<0.05). Conclusions The top and bottom mucosal thickness of maxillary sinus was thicker than the frontal sinus mucosa, and the bottom mucosal thickness was slightly thicker than the top.

[Key words]Goat; Maxillary sinus floor elevation; Sinus mucosa; Mucosal thickness

[中图分类号]R782.05 Q95-33

[文献标识码]A

[文章编号]1674-5817(2016)03-0200-04

doi:10.3969/j.issn.1674-5817.2016.03.008

[收稿日期]2015-08-31

[基金项目]解放军总医院临床扶植基金(2014FC-SXYY-1003);首都卫生发展科研专项(首发2014-4-5022)

[作者简介]李岩峰(1975-), 男, 博士, 副主任医师, 副教授。E-mail: m.god@yeah.net共同第一作者: 韩奕诗(1989-), 硕士, 住院医师。E-mail: hanyishi@yeah.net

[通讯作者]王 宁, E-mail: 22247490@qq.com共同通讯作者: 任桓, E-mail: 814658302@qq.com