不同产地、不同种类以及不同部位中的石韦总黄酮含量分析

刘燕芳, 种贝贝，辛晓伟, 高德民

(山东中医药大学 药学院，山东 济南 250355)



不同产地、不同种类以及不同部位中的石韦总黄酮含量分析

刘燕芳, 种贝贝，辛晓伟, 高德民*

(山东中医药大学 药学院，山东 济南 250355)

目的：采用紫外可见分光光度法对不同产地、不同种类以及不同部位的石韦药材中的总黄酮的含量进行分析研究，对药用石韦的质量控制提供一定的依据。 方法： 利用60%乙醇超声提取不同石韦粉末，采用紫外-可见光分光光度法在510 nm波长处测吸光度，分析不同石韦中的总黄酮含量。 结果：不同种类、不同产地以及不同部位的石韦中总黄酮含量存在明显差异。 结论：通过本实验对不同石韦中的总黄酮含量测定的分析，为石韦药材品种的鉴别和质量研究提供了一定的参考。

石韦；紫外-可见分光光度法；总黄酮含量

石韦属于水龙骨科(Polypodiaceae)石韦属(Pyrrosia)植物，性味甘、苦，微寒，归肺、膀胱经[1]，有利尿通淋、清热止血的作用[2-3]，用于热淋，血淋，石淋，小便不通，淋沥涩痛，肺热喘咳等症[4-6]。庐山石韦[Pyrrosiasheareri(Bak.)Ching]、石韦[Pyrrosialingua(Thunb.) Farwell]和有柄石韦[Pyrrosiapetiolosa(Christ)Ching]现已收载于药典，此外，还有毡毛石韦[Pyrrosiadrakeana(Franch.) Ching]、华北石韦[Pyrrosiadavidii(Baker) Ching]等[7]。石韦中主要含有黄酮、绿原酸、芒果苷、木犀草素等多种化学成分[8]。黄酮类化合物具有抗过敏、降血压、抗炎、抗菌、抗突变、抗溃疡、保肝和降血脂等活性[9]，现已制成多种中成药，如排石颗粒、荡涤灵、复方石韦片等。不同种类、产地以及不同部位的石韦药材之间可能存在差异，这会导致不同石韦在药用功效上的不同，本实验针对不同地域的庐山石韦、毡毛石韦、胶东石韦、有柄石韦、石韦及其不同部位的总黄酮含量进行测定[10]，分析其差异，以期对临床用药提供指导。

1　材料与仪器

1.1材料

庐山石韦(四川天顺康、湖北)、有柄石韦(浙江、华北新采、梯子山胶东、长白山、亳州、济南新采，胶东、陕西洋县、河北、四川成都、云南、湖北、四川、江苏)、石韦(广西桂林、安徽、浙江温州、福建宁德、云南昆明)、云乡石韦、中越石韦(广西宜州)、华北石韦(黄巢)以及毡毛石韦(安徽亳州)如表1，芦丁(批号：20130917购置上海金穗生物科技有限公司)纯度≥98%，亚硝酸钠(天津博迪化工股份有限公司)、氯化铝(天津市光复精细化工研究所)、氢氧化钠(天津市登科化学试剂有限公司)均为分析纯。60%乙醇，保鲜膜，蒸馏水。

1.2仪器

上海菁华754PC 紫外-可见分光光度计、KQ-250E型医用超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)、循环水式多用真空泵(菏泽市鑫源仪器有限公司)、微量移液器(上海求精生化试剂仪器有限公司)、电子天平/H27-A100(福州华志科学仪器有限公司)、电子天平/FA2004N(上海菁华仪器有限公司)、DS-T250 型高速多功能粉碎机(上海市顶帅工贸有限公司)、上海树立FXB101-1 加热鼓风干燥箱。

表1　不同产地、品种和提取部位的石韦中黄酮含量

2　实验方法

2.1总黄酮的提取及测定

称取一定量的石韦药材置于锥形瓶中，加入60%乙醇20 mL，超声1.5 h，抽滤，移取滤液1 mL置于试管中，作为供试品药材溶液。用60%的乙醇稀释，依次加入显色剂(5%亚硝酸钠0.3 mL，10%氯化铝0.3 mL、1 mol/L氢氧化钠4 mL)摇匀，显色15 min后，采用紫外-可见分光光度法在510 nm波长处测吸光度。

2.2标准品溶液的制备

精密称取芦丁4.0 mg置于100 mL烧杯中，加入60%乙醇30 mL，经超声溶解，得到0.13 mg/mL的芦丁标准品溶液。

2.3标准曲线的制备

取上述标准品溶液，稀释不同浓度，采用紫外-可见分光光度法在510 nm波长下测吸光度[11]，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，建立回归方程y=13.331x+0.023 5,R2=0.993 1。

2.4样品总黄酮含量的测定

以芦丁作为对照品，采用亚硝酸钠-氯化铝-氢氧化钠显色法、紫外-可见分光光度法进行测定，得各石韦中总黄酮的含量如表1。

3　实验结果

从表1中可见，石韦中不同产地、品种和提取部位的总黄酮含量存在着明显的区别。其中以安徽的石韦总黄酮最高，湖北的庐山石韦含量次之，有柄石韦中总黄酮含量相对较少，但是四川成都的有柄石韦中的总黄酮含量最少，还不足10%。同种石韦中，一般叶中的总黄酮含量较高，叶柄和根茎中含量较少，但是产于湖北的庐山石韦和安徽的石韦根茎中总黄酮含量明显超过其他的药用部位。因此，石韦在药用时要充分考虑到不同药材中有效成分的含量以期达到最好的药用效果。

本实验收集了全国20多种石韦样品，通过对不同提取部位黄酮含量的测定，发现有柄石韦(江苏)、中越石韦(广西宜州)以及毡毛石韦(安徽亳州)根茎中也含有丰富的黄酮类成分。因此，建议《中国药典》增加根茎类入药部分，以最大限度地利用石韦这一珍贵资源，为其临床应用提供了参考依据。

[1]张艺轩，李开通，李秋月，等.不同产地和品种石韦药材的高效液相指纹图谱研究[J].中药材,2011(1):20-26.

[2]陈露，刘布鸣. 中药石韦的研究概况[J]. 广西医学，2011, 33(11): 1486-1489.

[3]中国科学院植物研究所.中国高等植物图鉴：第1册[M].北京：科学出版社，1983.

[4]国家药典委员会.中国药典：一部[S]. 北京: 中国医药科技出版社, 2010:83-84.

[5]薛芳,许占民. 中国药物大全：中药卷[M]. 北京: 人民卫生出版社, 2005.

[6]江苏省植物研究所.新华本草纲目：第3册 [M] .上海:上海科技出版社, 1991: 715 .

[7]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志：第21卷[M].北京：科学出版社, 1979： 18-19.

[8]郑兴，许云龙，徐军. 西南石韦化学成分的研究[J] . 中国中药杂志, 1998, 23( 2) : 98-99.

[9]PARALLADE J ,GUINEA M. Flavonoid inhibitors of trypsin and leucineaminopeptidase :A proposed mathematical model for IC50estimation [J]. J Nat Prod, 1995, 58 (6): 823-829.

[10]朱贲峰,贺肇东,王政峰,等.不同产地青钱柳的总黄酮含量比较[J].海峡药学, 2004, 16(3): 88-8.

[11]李晓丹，肖娅萍. 5种药用石韦总黄酮的提取及测定[J]. 中国野生植物资源, 2009,2(1): 59-61.

Determination of Total Flavone inPyrrosiafrom Different Areas, Species and Extractive Fractions

Liu Yanfang, Zhong Beibei, Xin Xiaowei, Gao Demin*

(School of Pharmacy, Shandong University of TCM, Jinan 250355, China)

Objective : To compare total flavone in different areas, different species and different extractive fractions ofPyrrosia. Methods: To extract with 60% ethyl alcohol then detect by UV-VIS spectrophotometry in 510 nm. Results: There are obvious differences of total flavone content in different species, different areas and different extract fractions ofPyrrosia. Conclusion: According to the analysis of total flavone content in differentPyrrosia, some references were provided for the identification and research ofPyrrosiaspecies.

Pyrrosia; UV-VIS spectrophotometry; total flavone

10.3969/j.issn.1006-9690.2016.04.010

2015-12-21

山东中医药大学2014年SRT资助项目(2014382)。

刘燕芳(1994—)，女，山东中医药大学2012级中药学本科生。

高德民，男，副教授，硕士生导师，研究方向：中药资源与质量控制。E-mail:gdm607@126.com

R284.1

A

1006-9690(2016)04-0037-03