河南南阳信阳地区部分规模化猪场猪伪狂犬野毒感染的血清学调查

潘 文 ， 乔 磊 ， 邵 葳 ， 李 洁 ， 苏小齐 ， 于 雷 ， 黄书林

(1.中牧实业股份有限公司 ， 北京丰台100070 ； 2.农业部兽用生物制品与化学药品重点实验室 ， 北京海淀100095)

河南南阳信阳地区部分规模化猪场猪伪狂犬野毒感染的血清学调查

潘 文1，2， 乔 磊1， 邵 葳1，2， 李 洁1， 苏小齐1， 于 雷1，2， 黄书林1，2

(1.中牧实业股份有限公司 ， 北京丰台100070 ； 2.农业部兽用生物制品与化学药品重点实验室 ， 北京海淀100095)

伪狂犬病(Pseudorabies，PR)是由伪狂犬病病毒(Pseudorabiesvirus，PRV)引起的一种急性传染病，国际动物卫生组织(OIE)将其列为二类传染病。猪是伪狂犬病病毒的最主要宿主，猪感染PRV后的临床症状随着年龄不同差异很大。新生仔猪及15日龄以内的仔猪表现明显的神经症状，死亡率达100%。育肥猪常呈隐性感染，成年猪感染后多耐过，但长期排毒，妊娠母猪表现为流产、死胎、木乃伊胎等。

目前，国内外普遍采用猪伪狂犬病病毒gE基因缺失活疫苗对该病进行免疫预防，配套使用PRV gE抗体ELISA诊断试剂盒对PRV野毒抗体进行检测，能有效检测猪群中PRV野毒感染情况。自2011年猪伪狂犬病(PR)疫情率先在华北暴发以来，目前呈持续蔓延态势[1-2]。为了解近期河南南阳、信阳地区部分规模化猪场猪伪狂犬野毒感染情况，本文采用美国IDEXX公司猪伪狂犬病病毒gE抗体检测试剂盒对使用了PRV Bartha-k61株gE基因缺失活疫苗的23个规模化猪场进行调查，共采集733份血清进行了PRV-gE抗体检测，该调查对河南南阳、信阳地区部分规模化猪场的伪狂犬病的防控措施提供了有效理论依据。

1 材料与方法

1.1 血清 2015年6月采自河南南阳、信阳地区共23家规模化猪场，共计733份血液样品，采血后自然凝固，分离血清，置4 ℃冰箱保存。

1.2 诊断试剂盒 猪伪狂犬病病毒gE抗体检测试剂盒，购自美国IDEXX公司。

1.3 检测方法与结果判定 血清样品的检测按照试剂盒说明书进行操作，计算S/N比值，S=样品孔OD650nm值，N=阴性对照孔平均OD650nm值。若S/N≤0.6，样品判定为gE抗体阳性；0.60.7判为gE抗体阴性。

2 结果与分析

2.1 河南南阳、信阳地区PRV gE抗体检测结果

南阳、信阳地区参加此次PRV gE抗体检测的猪场共计23家，300头以上猪场7家，100～300头猪场16家，样品共计733份。无伪狂犬野毒感染的猪群共计5家，分别是F猪场、H猪场、K猪场、N猪场、W猪场，占南阳、信阳两地区的21.7%，伪狂犬野毒呈现阳性的猪场18家，占整个南阳、信阳两地区78.3%，血清样品抗体阳性率为44.2%。见表1。

2.1.1 南阳、信阳地区PRV gE阴性猪场的抗体分析 5家猪场伪狂犬野毒检测S/N平均值大于 0.9，离散度均小于25%，结果判定阴性，说明猪场生物安全防控工作执行到位。建议上述5家猪场继续使用现有疫苗，同时，重点关注后备母猪引种注意事项，在引种前对每头母猪进行伪狂犬野毒抗体检测，引种后做好隔离、驯化、免疫等工作，以防伪狂犬野毒随母猪带入猪场。

2.1.2 南阳、信阳地区PRV gE阳性猪场抗体分析

3家猪场伪狂犬野毒检测S/N平均值小于0.6，结果判定阳性。阳性率均在20%以下，建议上述3家猪场重点关注猪群的伪狂犬抗体变化及健康情况，以进一步评判当前使用的伪狂犬疫苗对伪狂犬野毒是否具备良好的交叉免疫保护作用。

15家猪场伪狂犬野毒检测S/N平均值小于 0.6，结果判定阳性，但离散度在60%以上，且阳性率均在20%以上，说明上述猪场当前所使用伪狂犬疫苗对伪狂犬野毒交叉免疫保护性较差，建议及时科学的更换疫苗厂家、调整免疫程序，同时有计划的做好猪群伪狂犬野毒抗体检测。

表1 河南南阳、信阳地区23个规模化猪场PRV gE抗体情况

注：A～G猪场为300头以上猪场；H～W猪场为100～300头猪场

2.2 河南南阳、信阳地区部分典型猪场PRV gE抗体检测结果分析

2.2.1 A猪场(300头以上)PRV gE抗体检测情况

A猪场当前使用国内α公司伪狂犬K61毒株疫苗，猪群伪狂犬抗体检测结果大部分呈阴性，但在育肥后期阳性率突然猛增达到75%(见中插彩版图1)，这有可能是由于现有免疫程序存在漏洞，伪狂犬野毒入侵，导致所使用的疫苗不能提供免疫交叉保护，建议该场增加对育肥猪伪狂犬的免疫次数，并进一步做好伪狂犬野毒的抗体检测工作，同时做好生物安全等综合防控措施。

2.2.2 F猪场(300头以上)PRV gE抗体检测情况

F猪场当前所使用的国内β公司伪狂犬K61毒株，各阶段猪群伪狂犬野毒均呈现阴性。说明F猪场免疫程序科学合理，现有疫苗能够对伪狂犬野毒起到交叉免疫保护性的作用，另外，通过抗体检测结果可以看出，仔猪能通过母源抗体保护的方式免受伪狂犬野毒的侵袭(见中插彩版图2)。追溯该厂的免疫程序，该场严格执行公母猪每年4次免疫，小猪30日龄免疫1次，60～70日龄再免疫1次的免疫程序。建议继续保留疫苗厂家、使用现有免疫程序，同时，加强猪群伪狂犬野毒的抗体检测并做好生物安全等综合防控措施。

2.2.3 R猪场(100～300头)PRV gE抗体检测情况及分析 R猪场当前所使用的国内γ公司伪狂犬K61毒株疫苗，母猪群免疫该公司疫苗后其伪狂犬野毒抗体阳性仍在50%以上，达不到通过母源抗体保护仔猪免受伪狂犬野毒侵袭的目的。另外，在育肥后期其伪狂犬阳性率快速上升，说明该场育肥猪在育肥后期伪狂犬野毒扩散现象严重(见中插彩版图2)。建议及时调整现有免疫程序或更换疫苗厂家、制定科学有效的免疫程序同时，做好生物安全等综合防控措施。

2.2.4 U猪场(100～300头)PRVg-I抗体检测情况 U猪场属于伪狂犬野毒阳性不稳定场，现使用的进口δ公司伪狂犬K61毒株，可能由于母猪群每年伪狂犬的免疫次数偏少，导致保育猪不能得到良好的母源抗体抵御伪狂犬野毒的入侵；但从该场育肥猪育肥后期阳性率的变化可以看出，进口伪狂犬K61毒株确实在对伪狂犬野毒发挥着良好的交叉免疫保护作用。因此，建议该场继续使用该疫苗，母猪群每年免疫3次，在产前4周跟胎免疫，保育育肥猪免疫程序不再做调整。

3 讨论

通过此次对河南南阳、信阳两地区伪狂犬野毒抗体的检测与分析，了解了河南南阳、信阳两地区伪狂犬野毒的流行情况。当前河南南阳、信阳两地区78.3%猪场均存在伪狂犬野毒情况，这与2014年中国农业大学杨汉春教授对全国23个地区266个猪场15 029份血清伪狂犬gE抗体监测，数据显示gE抗体阳性猪场为80.08%的数据[3]相当，说明河南南阳、信阳两地区2015年伪狂犬野毒防控形势仍十分严峻。

目前所使用的伪狂犬K61毒株，对伪狂犬野毒确实能够在一定程度上起到交叉免疫保护作用，但伪狂犬K61毒株所发挥交叉免疫保护作用的好坏主要取决于各批次疫苗间抗原含量的稳定性、母猪群的免疫次数、育肥猪的免疫程序等几个要素，其中注重育肥猪免疫的猪场野毒交叉感染率较低。梅里亚公司猪事业部技术经理袁冲在《猪伪狂犬病流行势态、发病原因分析及预防措施》一文中也提到的“在大多数猪场中，肥育猪是免疫的薄弱环节。仔猪免疫的程序的不合理，免疫剂量不足，均可造成感染，使肥育期猪群不足以抵御强毒攻击而感染，临床出现咳嗽并大量排毒，同时血清gE抗体转阳，大量强毒的扩散，使母猪群处于病毒高压下，当病毒高压突破母猪抗力，则出现流产，继而仔猪发病死亡[4]。”

另外母猪群较高的PRV野毒阳性率也是整个猪场持续阳性的根本原因，由于母猪饲养时间较长，一旦感染PRV野毒，可长期带毒排毒，引起持续性感染[5]。制定合理的免疫程序，能够有效的降低感染的发生，母猪群每年普免3次，然后于产前4周进行跟胎免疫(上产床后2～3 d采血进行抗体检测)，保育育肥猪的免疫程序需要根据母猪群的抗体情况、母源抗体的消长情况进行制定。同时，还应加强对后备母猪引种工作的监管，加强猪群伪狂犬野毒的抗体检测、猪群通风、日常消毒、清除场内犬猫等宠物。

[1] 胡睿铭，汤细彪，刘峰.2011-2013年猪伪狂犬病在我国部分地区的流行病学调查与分析[C].第十四届全国规模化猪场主要疫病监控与净化专题研讨会论文集，武汉：2014：83-88.

[2] 彭金美，安同庆，赵鸿远.猪伪狂犬病病毒新流行株的分离鉴定及抗原差异性分析[J].中国预防兽医学报，2013，35(1)：1-4.

[3] 杨汉春.2014年猪病流行情况与2015年流行趋势及防控对策[J].猪业科学，2015(2)：38-40.

[4] 袁冲.猪伪狂犬病流行势态发病原因分析及预防措施[J].国外畜牧学(猪与禽)，2015(5)：33-37.

[5] 常洪涛，刘慧敏，郭占达.河南省及周边省份猪群中大面积感染猪伪狂犬病毒的病因分析[J].病毒学报，2014(4)：441-449.

2015-09-28

潘文(1985-)，女，硕士，主要从事动物疫苗研发工作，E-mail：Pstone1985@163.com

黄书林，E-mail：Hslcau@163.com

S852.65+1

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0529-6005(2016)11-0055-02