RNAi沉默Arl4c对结肠癌细胞株HCT116增殖能力的影响

訾永宏,李小宝,陈红梅

(1延安大学附属医院普外科,延安 716000;2延安职业技术学院医学系;*通讯作者,E-mail:ziyonghong2016@163.com)

RNAi沉默Arl4c对结肠癌细胞株HCT116增殖能力的影响

訾永宏1*,李小宝1,陈红梅2

(1延安大学附属医院普外科,延安 716000;2延安职业技术学院医学系;*通讯作者,E-mail:ziyonghong2016@163.com)

目的 探讨利用RNA干扰技术沉默Arl4c基因对结肠癌HCT116细胞株增殖的影响。 方法 将Arl4c基因的si-RNA稳定转染至HCT116细胞,采用RT-PCR、Western blot鉴定干扰效果,以HCT116细胞沉默Arl4c基因组为实验组,以转染空质粒的HCT116细胞和空白的HCT116细胞为对照组,分别采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、细胞倍增时间、平板克隆形成实验、流式细胞术检测沉默Arl4c基因后,HCT116细胞生长速度、细胞周期、克隆形成能力的改变。 结果 沉默Arl4c基因后,实验组细胞的生长速度明显下降,G1期细胞增多、S期细胞减少,空白对照、空质粒对照组和实验组细胞平均倍增时间分别为(4.718±0.212)h,(4.981±0.24)h和(6.0±0.137)h;空白对照、空质粒对照组和实验组平均细胞克隆形成数目分别为121±9.00，117±10.00和80±9.00。实验组与空白对照、空质粒对照组相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 Arl4c基因的沉默能够抑制结肠癌细胞HCT116的增殖,可能在结肠癌的发生发展中起重要作用。

RNA干扰; 基因沉默; Arl4c; 结肠癌; HCT116

结肠癌是胃肠道常见的肿瘤,严重危害着人类生命健康,随着诊断技术及治疗的进步,5年生存率仅为50%。结肠癌的发生是多基因多阶段的过程,现代靶向技术的不断进步,使得对结肠癌相关基因的探讨变得更有意义[1]。ADP-核糖基化样因子4C(ADP-ribosylation factor-like 4C,Arl4c)是Arl家族的成员,是ADP-核糖基化因子(ADP-ribosylation factor,Arf)的亚家族成员之一[2],在细胞内的囊泡运输和信号转导过程中具有重要作用。越来越多的研究表明,Arl4c与人类肿瘤的发生发展关系密切[3,4]。……