高效液相色谱法准确分析尿液中缩二脲含量

向利

摘 要：以相对极性强的超纯水作为流动相，在特殊处理的“艾氏-2号”反相色谱柱上进行分离，使样品中缩二脲得到了很好的分离。实验表明，用高效液相色谱—二极管阵列检测器，用自动进样器进样分析。无论是成品尿素粒子中的缩二脲，还是生产中间控制的尿液中的缩二脲，都能準确测出。该方法缩二脲线性范围为0.0005-0.030mg/mL，缩二脲回收率为102.7%，相对标准偏差都小于0.05。

关键词：缩二脲；高效液相色谱—二极管阵列检测器；自动进样器

氮肥生产装置以氨和二氧化碳为原料，经过高压合成、汽提，低压洗涤，水解解析等过程后会产生不同氨、二氧化碳、尿素浓度的尿液，經过蒸发造粒，生成了产品尿素颗粒。在尿素造粒的阶段，高温处理时会缩合产生缩二脲，其对农作物生长有抑制作用，特别对种子的发芽和幼根的成长均有害，植物吸收过量的缩二脲后会造成叶绿素减损和机体发育不全，尤其是其结果超过2%时，危害更加严重。所以要严格控制产品尿素颗粒中缩二脲的含量。

目前国家标准最新的有《尿素测定方法 缩二脲含量的测定 分光光度法》（GB/T2441.2-2001）。标准规定的分析步骤繁琐，分析时间长，分析过程需要加入众多的试剂，其中有些是对身体健康产生危害的，而且生产过程中系统内尿液中的缩二脲测定在一个工作日之内都不能完成。

目前检索到已申请的专利（CN 101413929）中，是使用液相色谱法，流动相为PH=6.0的磷酸盐缓冲溶液，甲醇：缓冲溶液=5：95，流速为1.2mL/min，检测波长为200nm，用紫外检测器对缩二脲含量进行测定，当缩二脲浓度在0.01-0.2mg/mL，有较好的线性关系，相关系数为0.999以上，进样量为5μL。此方法大大缩短了分析时间，但操作中还是要使用化学试剂，而且检测范围较窄，操作前样品处理步骤多，还要超声10min，无形中增加了分析时间，难以满足目前生产控制需要。

本次研究的目的就是利用高效液相色谱仪、二极管阵列检测器、自动进样装置（自动进样器和样品架）、LC-Solution工作站，采用高纯水作为流动相，快速准确的分析出溶液中缩二脲的含量。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

高效液相色谱仪、溶剂输送泵、二极管阵列检测器、柱箱（色谱柱和温控装置）、自动进样装置（自动进样器和样品架）、LC-Solution工作站。国家标准物缩二脲标准样品，储备液浓度：1mg/mL；标准液浓度为：0.0005mg/mL、0.001mg/mL、0.002mg/mL、0.005mg/mL、0.01mg/mL、0.015mg/mL、0.02mg/mL、0.025mg/mL、0.030mg/mL。

1.2 实验材料

尿素生产装置过程控制的各浓度的尿液；成品尿素颗粒。

1.3 样品的制备和测定

1.3.1 成品粒子中样品的制备

准确称取样品1.000±0.005克，置于500.0mL容量瓶中，用温度等同于室温的三级水充分溶解后，定容至刻度，用0.45μm的微孔水系滤膜过滤头过滤后进样。

1.3.2 尿液中样品的制

按取样的重量，定容到体积V1后，再从V1中取出体积V2，定容到体积V3，摇匀。用0.45μm的微孔水系滤膜过滤头过滤后进样。

1.4 测定条件

制备好的样品用高效液相色谱法进行测定。条件如下：柱箱温度：40℃、泵出口流量：0.8mL/min、进样量：2μL、色谱柱：特殊处理的可耐纯水相的C18柱；测定波长：190nm；流动相：超纯脱盐水，用二极管阵列检测器测定缩二脲含量。

2 结果与讨论

2.1 成品样中缩二脲含量的测定

成品粒子中缩二脲含量国标要求在1.50%以下，从分析数据可以看出，方法可以满足生产需要，且符合分析要求。

2.2 方法精密度实验

各选择不同浓度的缩二脲（Bi）样品三个，每个样品进样6次，计算出每个组分的含量，算出相对标准偏差

实验数据表明，相对标准偏差均小于0.5%，符合测定要求。

参考文献：

[1]傅若农.色谱分析概论[M].北京：化学工业出版社，1999.