宠物犬感染布鲁菌的诊断报告

孙 明 ， 刘巧荣 ， 乔明明 ， 张 谦 ， 陈西钊,2

(1.北京世纪元亨动物防疫技术有限公司 ， 北京 海淀 100094 ； 2. 中国动物疫病预防控制中心 ， 北京 朝阳 100125)

宠物犬感染布鲁菌的诊断报告

孙 明1， 刘巧荣1， 乔明明1， 张 谦1， 陈西钊1,2

(1.北京世纪元亨动物防疫技术有限公司 ， 北京 海淀 100094 ； 2. 中国动物疫病预防控制中心 ， 北京 朝阳 100125)

布鲁菌病是由布鲁菌引起的一种人兽共患传染病，以侵害生殖系统为主要特征的传染性疾病。主要表现为睾丸炎、附睾炎、流产、不育等特征。犬种布鲁菌属于粗造型菌株，主要引起犬类发病，导致母犬流产、公犬睾丸炎等。流产后的母犬常表现为子宫内膜炎，出现屡配不孕。公犬感染后，以睾丸炎、附睾炎、前列腺炎、包皮炎等。潜伏期一般为两周至半年。现将1例宠物犬感染布鲁菌病的诊断情况报告如下。

1 基本情况

1.1 患犬资料 来自东北某种犬养殖场，犬年龄2岁，性别：公，品种：巨型贵妇犬。

1.2 发病情况 公犬患病前身体健康，无不良病史。突患睾丸炎。简单治疗后没有治愈。后与同养殖场一经产母犬(之前生产正常)交配，母犬未怀孕。后来母犬又与同场别的公种犬(交配前身体健康)和外借种公犬交配，母犬亦没怀孕，且两只公犬亦发生睾丸炎。半年内养殖场大多数公犬出现睾丸炎症状：睾丸红肿，体积明显增大，局部增温、疼痛。阴囊皮肤紧张、发亮；母犬则发生不孕。巨型贵妇犬主人怀疑自家犬感染布鲁菌，取血送检，检测结果显示布鲁菌抗体阳性。

1.3 病史调查 养殖场为半封闭性场地，第1只公犬患睾丸炎2月前曾与场外1母犬交配，后期调查发现该母犬曾有不孕史，后诊断为布鲁菌感染。

2 诊断

2.1 实验室诊断 采集巨型贵妇犬精液、唾液、血、尿液和阴茎分泌物用北京世纪元亨动物防疫技术有限公司生产的布鲁菌快速荧光试剂盒进行抗原检测。检测结果显示：唾液和精液为阳性(见图1)。种型鉴定结果显示，此犬感染布鲁菌为犬种布鲁菌(见图2)。

2.2 序列测定分析 设计引物，从精液DNA中扩增OMP25(626 bp)基因和16S rRNA(1 368 bp)基因(扩增结果见图3)，连接载体，将鉴定阳性菌送上海美吉生物医药科技有限公司进行测序。测序和同源进化分析结果显示，扩增序列是犬种布鲁菌序列，并与犬布鲁菌xue1(中国)分离株、2010009751(美国)分离株和A52141(韩国)分离株亲缘关系最为接近。

3 讨论

当宠物犬公犬患睾丸炎、母犬出现流产、不孕时，一般可以考虑布鲁菌感染。布鲁菌潜伏期为2周至半年。布鲁菌病患犬的排泄物和流产物中可携带大量病原菌，成为传染源[1-2]。另外交配也可以传染病布鲁菌，该报告就是一例由交配传播引起的案例。

该案例养殖场，最初出现一例布鲁菌感染犬，后来出现养殖场内大范围暴发。究其原因，主要由于与外来布鲁菌病感染犬交配引起。起初公犬出现睾丸炎，母犬出现不孕，没有引起足够重视，没有及时隔离发病犬和健康犬，而是继续把发病犬当作种犬使用，从而导致小范围内暴发流行。该种犬场在首个公犬出现睾丸炎到全养殖场60%以上的种犬感染布鲁菌病仅半年时间，且极可能感染了场外的犬只。故在宠物犬养殖过程中，特别是养犬场，一旦发现公犬睾丸炎，母犬流产、屡配不孕等症状时，应及时隔离病犬和与其接触犬，并采集样品进行布鲁菌检测，确诊后，立刻上报动物检疫部门，并对患犬进行无公害化处理，同时对污染场地彻底消毒处理[3-4]。以尽可能的减少传播，以及由此带来的经济损失。

图1 布鲁菌快速荧光PCR检测

1：阳对； 2：精液； 3:唾液； 4:血； 5:尿液； 6：阴茎分泌物； 7：阴性对照

图2 犬布鲁菌种型鉴定

1：阳对； 2：精液； 3：唾液； 4：阴对

图3 从精液中扩增OMP25和16S rRNA 基因1：OMP25基因； 2：16S rRNA 基因； M：DNA Marker

4 小结

本文用布鲁菌快速荧光试剂盒对一例患睾丸炎犬进行了布鲁菌初步检测，并进一步通过序列测定对其进行确诊。序列同源进化分析显示，该株犬布鲁菌与中国的犬布鲁菌xue1分离株、美国的犬布鲁菌2010009751分离株和韩国的犬布鲁菌A52141分离株亲缘关系最为接近。

犬只可以通过交配传播布鲁菌病，管理不当会引起布鲁菌病的暴发流行。故养殖场，特别是种犬场一定要加强安全防范管理。

[1] 王宁，韩吉寿，吕艳丽，等.北京地区宠物犬布鲁氏菌的分离与鉴定[J]. 中国预防兽医学报，2014，36(6)：490-492.

[2] 王传清，李星.布鲁氏菌病的流行和研究现状及防控策略[J].中国动物检疫，2009，26(6)：63-65.

[3] 殷文武，孙辉.中国布鲁氏菌病疫情形势及对策建议[J].疾病监测，2009，24(7)：475-477

[4] 郑连湖.布氏杆菌病的检疫及处理办法[J].中国畜牧兽医文摘，2014，30(6)：99.

S858.292

B

0529-6005(2017)09-0048-02

2017-07-10

“十三五”国家重点研究计划(2016YFD0501006)

孙明(1963-)，男，博士，主要从事分子病毒诊断技术研究，E-mail: sunming@anheal.com

陈西钊，E-mail: chenxizhao@anheal.com