关于中药检测中顶空气相色谱法的应用

田壮

摘 要：在药物的检测方法中，特别是对于那些含有效芳香成分作为质量评价标准的中药，较为快捷的分析方法是顶空气相色谱法。本文应用色谱及仪器条件，进行中药检测中顶空气相色谱法的研究。提出了顶空气相色谱法在中药研究中的应用，包括顶空气相色谱法在药物溶剂残留分析中的应用与在中药芳香物质分析中的应用。

关键词：中药检测；顶空气相色谱法；应用

前言

顶空气相色谱法是一种局限空间内的样品是在系统达到平衡状态时，蒸汽挥发性成分的气相色谱分析技术，通过气体在样品成分的气相色谱分析，以确定在原始样品中这些成分的含量。这种方法主要用于气体采样，当色谱分析在使用该方法时可以具体收集样品中的挥发性组分，可以有效地避免溶剂中挥发物的去除，而且还减少了提取引起的噪声问题。该技术广泛应用于世界各个领域。

1.顶空气相色谱法的工作原理

顶空气相色谱法主要有三种分析方式，主要是静态顶空分析方法、动态顶空分析方法和顶空固相微萃取法。

1.1静态顶空分析方法

这种方式主要是将适量的样品封闭在容器中，在一定的温度下放置一段时间后使样品的气体和液体达到平衡，这个时候，取这个封闭容器上方的空气进行分析，就可以分析出容器下方的液体或者固体的成分。但是，这种分析法主要分析沸点在200℃以下的组分，并且较容易挥发的样品使用这种方式更合适。而对于那些不容易挥发的物质，则需要首先进行化学衍生化的处理。

1.2动态顶空分析方法

静态顶空分析方法需要在密闭且一定温度下，气液达到一定的平衡状态才能进行，而动态顶空分析的方法则不需要达到平衡状态，而是在还未达到平衡状态的时候就多次取样，直到样品的挥发物全部萃取出为止。

1.3顶空固相微萃取法

固相微萃取法是利用待测物对活性固体表面有一定的吸附亲和力而达到分离富集的目的，这种方式是将萃取的纤维头放置在待测样品上空，将分析物萃取出。在气化室中，由于温度的上升，分析物对于纤维的亲和力下降，分析物被分离出，而它们所处的较小的体积可以保证分析物可以快速地转入色谱柱。

2.资料与方法

2.1色谱及仪器条件

色谱柱：HP—PLOT/Q毛细管柱（柱长30m，内径0.32mm，涂层厚度20i.Lm；气相色谱参数：程序升温（初始温度50℃，1rain的保持度，结合10°C每分提升到150°C，也要保持5min左右），氮载气，载气流速1.5mL/min，分流注射（1∶1），入口温度为220°C左右。

2.2溶液制备与测定

二氧化硫的标准溶液被吸收，水被制成10、20，30、50和100料斗G的溶液，该溶液作为控制溶液被摇匀。对照溶液1mL，这是接近样品中的二氧化硫残留量、准确地吸收。在20mL顶空瓶，0.5mol/L氢氧化钠溶液5mL时迅速而准确地密封。将顶空进样器放入顶部空气样品中，取适量2g的微粉（如果实验的质量是软的，可以适当地减少）。在20mL顶空瓶中，在0.2mol/L的盐酸溶液中快速而准确地加入6mL，密封，在沸水浴中30rain加热，放入顶空顶空进样器。

2.3方法考察

专属性试验：中药汤剂，而用硫磺熏蒸，作为阴性对照品，按照试验方法进行操作，记录色谱图。结果表明，在阴性对照溶液的色谱图中没有发现色谱峰，没有杂质峰干扰样品的测定。

2.4线性关系考察

采用一系列控制方案，采用顶空气采样法记录峰值面积的积分值。以二氧化硫浓度（g/mL）为水平坐标，峰面积积分值为纵坐标绘制标准曲线。计算得回归方程为Y=2.301+2.229，X=0.9991（n=5）。结果表明，二氧化硫质量浓度在lO～100kg/mL范围内与峰面积积分值呈较好的线性关系。

3.结果

二氧化硫平均残留量为0.027mg/g，RSD=2.1%（n=6）。加样回收试验：从已知残留6例，20mL顶空瓶中，分别快速添加二氧化硫标准溶液（参照GB/t15262-94，校准后，用亚硫酸钠碘量法编制的0.050g/L的浓度）和1mL0.2mol/L5mL盐酸溶液，煮沸30min水浴密封和加热，在顶空进样器，顶空进样测定，依照测定。结果见表1。

4.顶空气相色谱法在中药研究中的应用

4.1顶空气相色谱法在药物溶剂残留分析中的应用

采用气相色譜法对白乐眠胶囊中苯、甲苯、二甲苯、正己烷、苯乙烯和一二乙苯的残留量进行检测，气相色谱条件为：色谱柱HP-5，载气为高纯氮，蒸发室温度为200。柱初始温度60，恒温5min，以30min的速率升至90，恒温3.5min；由30min的速率，它上升到140，恒温4min，最后上升到190在30min内，稳定在恒定的温度3min。检测器是FID，温度为220。

4.2顶空气相色谱在中药芳香物质分析中的应用

顶空气相色谱法进行顶空气体成分对芳香类中药的分析RadixCynanchipaniculati和芳香类中药具有方便、快捷的优点，准确和具体的方法表明，在芳香药材的质量鉴定和质量控制，尤其适用于以含有效芳香成分多少作为质量评价标准的中药。魏宁漪等利用GC—MS和顶空进样、固相微萃取进样结合的技术，对麝香中的掺伪物质进行鉴别。对其中掺加的苯甲酸、苯酚、樟脑、龙脑和一系列的烷烃用PDMS萃取头采集后都可以检测出来。

4.3顶空气相色谱在测定中药材成分含量中的应用

在中草药成分测量中，采用顶空气相色谱法也具有非常好的效果。其实验操作简单，准确性高，并且还具有专属性强的特点。而中药中的一些芳香类物质的测定中，更是具有非常准确和简便的测量效果。在对中药中的一些挥发油的成分检测和对中药质量控制中，顶空气相色谱法更是得到了广泛的应用，并且，在采用此法进行实验的时候，由于温度偏低，还能避免中药中的一些组分由于温度较高而分解的现象发生。

这种分析的方法应用在中药的检测中，特别是分析具有芳香类物质的检测中，不但有快速简单易于操作的特点，而且其准确性和专属性都比较高。

结语

综上所述，顶空气相色谱（GC）可以消除样品中难挥发物质的干扰，减少对毛细管柱的污染，可广泛应用于大孔吸附树脂残留物和溶剂残留等中药安全检查，保证人民用药安全，同时也为中药生产企业和检验单位的质量标准提供了理论依据和确定方法。

参考文献：

[1]刘冬.顶空气相色谱法用于药物中残留溶剂检测的研究[D].北京：北京中医药大学，2007.

[2]张琳.倪美萍.蒋晔等.离子液体-静态顶空气相色谱法检测十滴水中的樟脑和桉油精[J].分析化学，2013，41（4）：590-593.