卵巢癌细胞株SKOV3在人脐带间充质干细胞培养液中的增殖、凋亡和迁移情况观察

袁晓凤，袁修凯，周芳

(1中国人民解放军第97医院，江苏徐州 221000；2睢宁中医院)

脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)是一类具有自我更新和多向分化潜能的多能干细胞[1,2]。hUC-MSCs取材方便，易于分离培养，低免疫原性低，且遗传性状稳定[3,4]，故被认为是组织工程的理想种子细胞。越来越多的研究发现，间充质干细胞(MSCs)和肿瘤之间具有密切的联系[5,6]，卵巢癌是妇产科最常见的恶性肿瘤之一，由于该肿瘤起病比较隐匿，缺乏特异表现，在临床上确诊时大多已经晚期，是女性生殖系统肿瘤中病死率最高的肿瘤。本研究以卵巢癌细胞株SKOV3为研究对象，观察了卵巢癌细胞株SKOV3在hUC-MSCs培养液hUC-MSCs培养液中的增殖、凋亡和迁移情况。现报告如下。

1　材料与方法

1.1材料低糖DMEM和高糖DMEM购自Gibco公司；血清购自Excell公司；小鼠抗大鼠GAPDH单克隆抗体(mAb)、小鼠抗大鼠Bcl-2 mAb和小鼠抗大鼠Bax mAb购自Immuway公司；MTT四甲基偶氮唑蓝试剂购自碧云天生物技术公司；成骨、成脂诱导液以及碱性磷酸酶(ALP)和油红O染色液购自广州赛业公司；凋亡试剂盒购自Sigma公司；Transwell小室、6孔板、25 cm2细胞培养瓶购自Corning公司；倒置显微镜购自Nikon公司；二氧化碳孵育箱购自Thermo公司。

1.2hUC-MSCs的分离、培养及hUC-MSCs细胞培养液的制备在超净工作台中无菌操作，用PBS冲洗掉脐带表明残留的血液，在含双抗(青/链霉素，终浓度为100 U/mL)的营养液中浸泡约15 min，随后去掉脐带组织中的动脉和静脉，将脐带组织剪成约1 mm3的小块，小心均匀的贴在10 mm×35 mm小皿中并加入含有双抗的L-DMEM培养液，放在37 ℃、5%CO2孵箱内培养，每3 d换液1次。培养7～10 d可见纤维样的细胞从脐带组织块中爬出，待细胞融合到80%时消化传代。……