基于甾体皂苷的襄麦冬块根抑制性差减杂交文库的构建

余海忠，王海燕，赵慧君，孙永林

(湖北文理学院化学工程与食品科学学院，湖北 襄阳 441053)

【研究意义】襄麦冬Liriopespicatavar.proliferaY. T. Ma，百合科山麦冬属植物，是《中华人民共和国药典》收录的山麦冬基原植物之一，其块根与川麦冬、杭麦冬一样，中药处方均作麦冬同等入药[1]。甾体皂苷是襄麦冬的主要活性成分之一，具有降血糖、增强免疫、抗肿瘤、防治心血管疾病、调节免疫力等多种活性[2-4]。但是，由于受到诸如种植面积、气候条件、生长周期等因素影响，尤其是较低的含量水平，襄麦冬甾体皂苷的可持续利用受到了一定的制约。【本研究切入点】研究表明，皂苷类成分的含量及组成，不仅随植物遗传背景、组织类型、生长年龄、生理状况、环境因子的改变而发生显著变化，而且还取决于皂苷合成酶及其表达水平[5]。由于襄麦冬甾体皂苷的含量变化，具有明显的生长发育阶段特性[6]，提示与其相关的合成酶，在块根生长发育阶段进行了差异性表达，这为实验室进行差异基因的筛选提供了理论可能。【前人研究进展】在寻找与某一性状相关的基因时，抑制消减杂交(SSH)技术被认为是一种较为适合的常规技术，可在转录水平上发现两样品间差异表达的基因[7]。利用该技术，国内学者开展了一些与产苷调控基因筛选相关的基础工作。和凤美[8]构建了三七1年和3年生根cDNA的抑制消减文库，用于寻找三七皂苷调控基因。罗志勇[9-10]通过SSH文库鉴定出6个克隆(基因)在人参植物根生长发育阶段差异表达。……