鼻黏膜间充质干细胞的培养、鉴定及诱导分化

卓毅，吴沛，段答，葛丽特，王昊，龙浪，胡莉，卢明*

（1湖南师范大学第二附属医院，解放军第163医院神经外科，长沙410003；2湖南师范大学生命科学学院，蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室，长沙410006）

随着对干细胞研究的不断深入，神经损伤的修复与再生已成为可能。间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）不仅具有多向分化的潜能，还具有自我复制、造血支持以及免疫调节等功能[1,2]。目前研究比较广泛的MSCs主要有骨髓间充质干细胞（bone marrow MSCs, BM-MSCs），脂肪间充质干细胞（adipose tissue-derived MSCs, AD-MSCs）及脐带间充质干细胞（umbilical cord MSCs, UC-MSCs）3种，但是这些细胞仍有伦理、免疫排斥等问题以及细胞来源不足等局限。

2010年有研究者在人鼻黏膜的嗅区中发现了嗅黏膜间充质干细胞(olfactory mucosa mesenchymal stem cells，OM-MSCs），因其属于外胚层，也被称为也称为外胚间充质干细胞[3]（ectomesenchymal stem cells，OE-MSC）。又因其解剖位置属于固有层，所以也称为固有层间充质干细胞[4]（lamina propria mesenchymal stem cell，LP-MSCs）。OM-MSCs 易于获取培养，广泛分布于鼻内[5]，不受年龄限制[6]，且具有多向分化的潜能；又因其安全性高，且无免疫排斥反应，可用于自体移植治疗中枢神经系统损伤的修复[7]。本研究则从SD大鼠鼻内直接获取鼻黏膜组织块，在体外进行培养、扩增鼻黏膜间充质干细胞（nasal mucosa mesenchymal stem cells，NMMSCs），并研究其细胞形态、免疫表型、生物学特性及细胞周期等特性，旨在建立SD大鼠的NMMSCs培养体系，初步探讨其生物学特性，为接下来治疗中枢神经系统损伤修复的动物实验研究提供更为优越的种子细胞来源奠定基础。

材料与方法

1 实验材料与仪器

高糖 DMEM-F12 培养基 (1 ∶ 1)（GIBCO 公司，美国）；10% FBS（HyClone 公司，澳大利亚）；双抗（青霉素20 000 U/mL、链霉素 20000 ng/mL）；……