KU55933对化疗后胶质母细胞瘤细胞株U87增殖、凋亡的影响及其机制探讨

王倩，蔡炜嵩

(中国医科大学附属盛京医院，沈阳 110000)

脑胶质瘤是颅内常见的原发性肿瘤，约占颅内肿瘤的30%；其中WHO Ⅳ级的恶性胶质母细胞瘤(GBM)约占胶质瘤的50%，且恶性程度高，预后差，中位复发期为7个月，中位生存时间12～14个月。NCCN指南推荐行最大范围手术切除，术后行病灶区放疗同步及辅助替莫唑胺(TMZ)化疗。TMZ为DNA烷化剂，是针对GBM的一线化疗药物，可以通过血脑屏障。然而，GMB容易对放化疗耐受，即使大剂量放化疗同样易于复发[1]。研究[2,3]显示，肿瘤对治疗抵抗多与细胞周期时相、细胞周期检查点及DNA损伤修复相关。共济失调毛细血管扩张突变基因(ATM)功能缺陷可导致共济失调毛细血管扩张症，其可表现出对放疗敏感性增加[4]。ATM/ATR基因在促进肿瘤细胞耐细胞毒性治疗方案中起核心作用，其可引起细胞周期阻滞，促进DNA修复，维持基因组稳定性。ATM/ATR阻滞剂可提高GBM细胞放疗敏感性[5]。KU55933为经典的ATM阻滞剂，KU55933联合放疗可使放疗引起的细胞周期阻滞消失[6,7]。本研究观察了KU55933对化疗后U87细胞增殖、凋亡的影响，并探讨其机制。

1 　材料与方法

1.1ATM/ATR阻滞剂、药物、细胞及试剂KU55933购于美国Selleck公司；TMZ购于默沙东制药公司；U87细胞为本实验室保存；DMEM培养基购于Hyclone公司，标准胎牛血清购于天晴灏洋生物制品科技有限公司，DMSO购于美国Sigma公司，细胞周期检测点激酶1(Chk1)、细胞周期检测点激酶2(Chk2)、磷酸化Chk1(pChk1)、磷酸化Chk2(pChk2)、细胞周期蛋白B(Cyclin B)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)多克隆抗体购自博士得公司。

1.2 U87细胞培养 细胞用高糖DMEM培养基(含 10%胎牛血清)培养基培养，37 ℃恒温培养箱内生长。……