RAP1B在胃癌中的表达及其意义

刘云昊，荆浈岂

（陕西中医药大学第二临床医学院，陕西 咸阳 712000）

癌症是目前全世界死亡的主要原因之一，而胃癌是癌症中一种常见的消化系统的恶性肿瘤，是第三大肿瘤类型[1]。研究表明，RAP1B的作用机制已经证明与引起血管生成，内皮细胞迁移以及细胞增殖等有着密切的关系及影响，RAP1B还可以影响RAS-MAPK通路，使其信号通路的功能受阻[2]。本文针对RAP1B在胃癌中表达的实验研究，进一步了解胃癌的发生、浸润以及转移机制。

1 材料与方法

1.1 一般材料

收集陕西中医药大学第一附属医院以及西安交通大学第一附属医院自2008年1月～2009年12月之间进行外科根治手术并由病理明确诊断为胃癌的患者，收集他们的固体石蜡块标本100例以及30例距胃癌组织5 cm以上的癌旁正常组织。两组的性别、年龄及肿瘤大小均无统计学差异（P＞0.05）。

1.2 试剂与方法

图1 RAP1B在胃癌组织中高表达（①：SP×40、②SP×100、③SP×200）

将患者对应的蜡块放置于冰上进行20～30 min的预冷后，使用轮转式石蜡切片机进行连续切片（厚度为4～6 um）。按说明书用二甲苯脱蜡2次，梯度酒精水化，柠檬酸微波抗原修复，山羊血清封闭，滴加使用PBS稀释的一抗RAP1B（1:200），4℃过夜，第2天常规二抗孵育，DAB（proteintech生物公司）显色。

1.3 免疫组化评分

RAP1B的表达，大部分定位于细胞质，少数可出现于细胞核中；免疫组化的染色结果分别请两位参加工作年限超过5年的病理科老师进行免疫组化的阅片工作，对制作好的片子运用免疫反应积分打分法（IRS）分别进行评分，记平均值。

1.4 统计学方法

本文采用SPSS 19.0统计学软件对数据进行分析。运用x2检验分析。

2 结 果

2.1 RAP1B在胃癌组织与癌旁组织的表达

RAP1B主要表达在细胞质，少部分也可在细胞核中表达（图1）。实验结果提示（表1）：在100例胃癌组织中，RAP1B高表达的病例有72.0例，高表达率为72%，有28例为低表达，低表达率为28.0%。在30例胃癌癌旁正常组织中，高表达的病例有6例，高表达率为20.0%。

表1 RAP1B在胃癌组织与癌旁组织的表达 [n（%）]

3 讨 论

RAP1B是一种小型的Ras相关的（Ras-related protein）GTP酶类蛋白，是RAP1的一种亚型[3]，RAP1是Ras样GTP酶超级家族的进化保守蛋白。RAP1通过鸟嘌呤交换因子和GTP酶活化蛋白的作用下在与GTP结合的活性形式和与GDP结合的非活性形式之间循环作用。

RAP1B能够促进肿瘤细胞的增殖。最早的研究显示RAP1B具有促进细胞进行有丝分裂的生物学特性，正常的小鼠细胞在过表达RAP1B之后细胞倍增的时间能够明显的被缩短，随之在裸鼠中发展成为肿瘤。马明铭等人在2015年的研究也通过实验证实了RAP1B在非小细胞肺癌的组织中可能发挥着类似癌基因的功效[4]。近些年的研究表明RAP1B与许多消化系统的肿瘤的发生与转移也存在密不可分的关联[5]。

[1]Fitzmaurice C,Dicker D,Pain A,et al.The Global Burden of Cancer 2013 Global Burden of Disease Cancer Collaboration [J].Jama the Journal of the American Medical Association,2015,1(4):505-527.

[2]Dow L E,Elsum I A,King C L,et al.Loss of human Scribble cooperates with H-Ras to promote cell invasion through deregulation of MAPK signalling [J].Oncogene,2008,27(46):5988.