Mammaglobin 在子宫内膜腺癌和宫颈腺癌的表达及临床意义

易静，何蓉，李君怡

(江西省萍乡市妇幼保健院病理科，萍乡 337000)

子宫内膜腺癌和宫颈腺癌均为妇科常见的恶性肿瘤，两者的临床治疗方法、手术方案的选择以及临床预后等各不相同。据统计，≤50岁年龄组子宫内膜癌患者有增高趋势，≤40岁和＞60岁年龄组宫颈癌患者呈增高趋势[1]。子宫内膜癌是妇科生殖道最常见的恶性肿瘤之一，其发生率约占女性生殖道恶性肿瘤的20%-30%，近年来，发病率呈持续上升趋势[2]。宫颈腺癌是宫颈癌中除宫颈鳞癌之外最常见的一种亚型，以往在宫颈癌中所占比例较小。近年来，宫颈腺癌的发病率逐年升高，且有年轻化趋势，因此人们对宫颈腺癌的研究越来越重视[3]。子宫内膜腺癌和宫颈原发腺癌生物学行为均可向下扩展与向上延伸，宫颈腺癌多数起源于宫颈管内膜，最常见的为颈管内膜型，它可向子宫内膜方向分化形成子宫内膜样癌和透明细胞癌，亦可向输卵管上皮方向分化形成浆液乳头状腺癌[4，5]。由此可见，两者无论从解剖学位置还是组织学形态均无一个明确的分界及区别。然而，子宫内膜腺癌和宫颈腺癌的鉴别诊断对于临床治疗和预后的判断具有重要的临床意义[6，7]，因此，两者的鉴别诊断显得尤为重要。1996年美国学者Mark A Watson和Timothy P Fleming[8]利用差式筛选和cDNA末端扩增（rapid amplification of cDNA ends，RACE）技术，从乳腺癌上皮细胞中克隆出一个分子量10.5kDa的分泌性差异表达蛋白，该蛋白是93个氨基酸残基构成的多肽，其氨基酸序列与子宫珠蛋白（uteroglobin，UG）超家族同源，从而将其命名为人乳腺球蛋白。2002年Darrick Carter等的研究表明hMAM与另一种子宫珠蛋白超家族成员Lipophilin B形成共价复合物，它们在乳腺癌组织中特异表达且表达水平显著相关[9]。Mammaglobin的生理功能不明，但UG超家族的成员全都是分泌性，少有糖基化的小分子二聚体蛋白，主要在粘膜组织中表达，结构相似，功能相近[10]。本文通过免疫组化S-P两步法对50例子宫内膜腺癌病例和21例宫颈腺癌病例进行Mammaglobin蛋白检测，并分析其结果，探讨Mammaglobin蛋白检测应用于子宫内膜腺癌和宫颈腺癌鉴别诊断中的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院病理科2014年4月至2017年11月存档蜡块中抽取子宫内膜腺癌50例，患者年龄41-67岁，平均年龄53.7岁；宫颈腺癌21例，患者年龄36-80岁，平均年龄59岁。两组中每个病例均由2名多年资且经验丰富的病理医师诊断。

1.2 实验操作方法 仪器设备：不锈钢锅，耐高温塑料染色架，电磁炉。所需试剂：鼠抗Mammaglobin单克隆抗体，为即用型抗体，购自福州迈新生物技术开发有限公司；酶标羊抗小鼠/兔IgG聚合物；EDTA抗原修复液，PH=9.0，蒸馏水。操作步骤：⑴前期蜡块制作。⑴组织处理：10%中性福尔马林缓冲液→80%乙醇→85%乙醇→95%乙醇→100%乙醇→二甲苯→石蜡。⑵组织包埋、切片。⑶脱蜡和水化：①石蜡切片置于二甲苯15min×2次；②无水乙醇浸泡3min×2次；③95%乙醇浸泡3min；④85%乙醇浸泡3min；⑤自来水冲洗1min；⑥PBS冲洗3min×3次。⑷高压锅开锅后加热EDTA抗原修复液，加热至沸腾，将功率调至最小 （处于保温状态），将切片置入已沸腾的修复液中，继续加热20min，自然冷却。①蒸馏水冲洗3min×2次。②PBS冲洗3min×2次。③加一抗（鼠抗Mammaglobin单克隆抗体）室温60min。④PBS冲洗3min×2次。⑤加二抗 （酶标羊抗小鼠/兔IgG聚合物）室温15-20min。⑥PBS冲洗3min×2次。⑦DAB显色剂3-5min。⑧苏木素复染10-30s、脱水、封片。⑸在显微镜下进行观察，每批染色均设已知阳性及阴性对照。

1.3 结果判读 Mammaglobin以细胞质出现棕黄色颗粒为阳性。判定标准：阳性细胞＜5%为阴性。

1.4 统计学分析 数据采用χ2检验，检验标准取P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

Mammaglobin阳性表达率在子宫内膜腺癌为72%（36/50），宫颈腺癌为 4.8%（1/21），子宫内膜腺癌Mammaglobin阳性率明显高于宫颈腺癌，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表 1。

表1 Mammaglobin在子宫内膜腺癌和宫颈腺癌中的表达[n（%）]

3 讨论

子宫内膜腺癌占女性生殖道恶性肿瘤20%-30%，近年来发病率不断上升，晚期癌灶可向下扩展侵及宫颈，其组织学类型主要分为子宫内膜样腺癌、黏液腺癌、浆液性癌及透明细胞癌[11]。宫颈癌为最常见的妇科恶性肿瘤，而宫颈腺癌占宫颈癌15%-20%，极少部分宫颈腺癌可向上延伸累及子宫内膜。其组织学类型分为普通型腺癌、黏液腺癌、微偏腺癌、绒毛管状腺癌、透明细胞癌、浆液性癌、中肾管癌和一些少见的亚型，其中普通型宫颈腺癌是最常见的组织类型，其形态类似子宫内膜腺癌，腺体形态既有宫颈内膜样分化，又有子宫内膜样分化[12]。因此，从癌灶发生的部位以及组织形态学方面均不能十分准确的区分子宫内膜腺癌和宫颈腺癌。近年来，免疫组织化学技术逐步发展成为临床病理诊断不可缺少的技术手段[13]，当组织形态不能做出明确的病理诊断时，免疫组化起着至关重要的作用。经过临床研究显示，已经有一些免疫组化标记物被证明对两者的鉴别诊断有一定的临床意义，如 P16、CEA、ER 等[14，15]，但特异性及敏感性都不是特别显著。我们需要研究并探讨，是否有更特异及更敏感的免疫组化标记物能应用于两者的鉴别诊断。由于Mammaglobin对乳腺癌的敏感性和特异性较高，已成为诊断外科病理的一种有效的免疫组织化学标志物[16-19]。有研究表明该蛋白与大鼠前列腺素蛋白具有42%的序列同一性，与兔和人的子宫分泌球蛋白家族1A成员1（SCGB1A1）具有高度同源性[20]。并且，子宫内膜癌是在Bhargava等人的研究中表达Mammaglobin最常见的非乳腺病变[20]。到目前为止，只有少数研究在恶性或良性的人体子宫内膜组织中检测到Mammaglobin[21-24]。一项研究报告称Mammaglobin存在于9个子宫内膜癌中的一个[16]，而另项研究报告在39个子宫内膜癌中存在30例[19]。本文研究结果显示，50个子宫内膜癌中存在36例Mammaglobin表达阳性。不可否认，Mammaglobin应用于子宫内膜腺癌和宫颈腺癌的鉴别诊断，具有重要的临床应用价值，尽管不是绝对特异，但仍可以作为一个重要参考指标，帮助判断子宫腺癌的原发部位，究竟是子宫内膜来源还是宫颈来源，尤其是当子宫内膜及宫颈均有癌灶时，能够进一步明确是子宫内膜腺癌侵及宫颈，还是宫颈腺癌累及内膜，还是双原发癌，从而提高病理诊断的准确性，并影响患者的治疗及预后，值得我们进一步研究推广。