分枝杆菌噬菌体DNAⅢ生物学特性及其抗耐药结核潜力*

邬亭亭 刘平 郭术良 魏强 罗永艾

(1.成都市第三人民医院呼吸内科，四川 成都 610031；2.重庆医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科，重庆 400016；3.重庆市长寿区人民医院呼吸内科，重庆 401220；4.成都市天府新区人民医院内二科，四川 成都 610213)

我国是全球结核高负担国家之一。结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)耐药形势严峻。耐药结核病的流行严重威胁我国结核病的防治工作，已经成为我国结核防控关注重点。噬菌体是一种细菌依赖性病毒，可以裂解细菌，具备抗菌潜力。噬菌体治疗铜绿假单胞菌等耐药菌属获得成功[1，2]的报道提示，分枝杆菌噬菌体具备治疗耐药结核病的潜力，为耐药结核病治疗提供新思路。本文研究分枝杆菌噬菌体DNAⅢ的生物学特性和抗耐药MTB的作用，为抗耐药MTB噬菌体鸡尾酒疗法提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料 ①噬菌体及其宿主菌 噬菌体TM4由美国匹兹堡大学Hutful教授惠赠；噬菌体DNAⅢ、Sedeg、Legendre、33D、BO4、Clark和Leo由加拿大Laval大学赠送；噬菌体D29和耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis ,MS) mc2155由中国药品生物制品检定所王国治教授赠送；分枝杆菌临床株由本课题组2010年5月～2011年4月期间从重庆医科大学附属第一医院结核病人痰中分离，比例法检测药敏；MTB H37Rv购于重庆市肺科医院。②主要试剂：OADC增菌液(美国sigma公司)，7H9/7H10培养基(美国BD公司)，福氏完全佐剂(美国sigma公司)，罗氏培养基(珠海贝索公司)。实验动物:新西兰大耳白兔(符合伦理要求)由重庆医科大学实验动物中心提供

1.2 方法

1.2.1 噬菌体的制备及噬菌斑观察 参照文献方法[3]，采用双层琼脂培养法制备噬菌体，次日观察噬菌斑。……