绿色魏斯氏菌实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法的建立

张艺鸽，姜晓冰,*，于 涛，孙丽滢

（1.河南师范大学生命科学学院，河南 新乡 453007；2.新乡学院生命科学技术学院，河南 新乡 453003；3.佛山市海天调味食品股份有限公司，广东 佛山 528000）

绿色魏斯氏菌（Weissella viridescens）[1]属于乳杆菌目（Lactobacillales）、明串珠菌科（Leuconostocaceae）、魏斯氏菌属（Weissella）[2-4]。该菌在微观和宏观形态方面与乳酸菌的其他代表菌株相似，特别是容易与明串珠菌（Leuconostoc）和乳杆菌（Lactobacillus）[1]混淆。绿色魏斯氏菌为革兰氏阳性菌，呈不规则的短杆状，两端呈圆形或稍细小，成对或短链排列[5]；在MRS琼脂培养基上形成透明的小菌落，呈微隆起圆形轮廓[6]。

绿色魏斯氏菌属于异型发酵乳酸菌，能够导致食品特别是肉制品的腐败变质[1,6-7]。当暴露于氧气中时，一些肉制品，如香肠、真空包装肉、烟熏肉等会出现变绿的现象。绿色魏斯氏菌是造成肉制品表面出现黏液并发绿的主要原因[1,6]。起初，黏液仅在单个菌落周围出现，之后逐渐形成一整片绿色的黏液，并从肉制品的表面向内部渗透。绿色魏斯氏菌已经成为威胁肉制品质量与安全的重要腐败菌，给肉类加工行业造成巨大的经济损失[6]。因此，建立快速、准确的检测方法对预防和控制绿色魏斯氏菌对食品的污染、保障食品质量与安全具有重要意义。

目前，针对绿色魏斯氏菌的检测方法十分有限。传统的绿色魏斯氏菌检测方法包括增菌培养、分离纯化、镜检和生化鉴定等步骤，耗时长、操作繁琐且结果可靠性低[8-10]，严重影响检测鉴定的效率[11-13]。实时荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）检测技术具有操作简便、灵敏、特异、快速、直观、定量准确、闭管反应等优点[14-16]。……